高效液相色谱-质谱法测定食品中安赛蜜的方法研究

孙 文，张慧芳

（山西省检验检测中心食品与粮食检验技术研究所，山西太原 030012）

安赛蜜具有价格便宜、稳定性好、甜度高、易溶解及用量少等优点，备受食品生产厂青睐，但摄入过多对人体有害[1]。根据《食品安全国家标准 食品添加剂使用标准》（GB 2760—2014），安赛蜜可用于饮料冷冻饮品、果酱、蜜饯、酱腌菜、糖果、焙烤食品、调味品、饮料和果冻等食品中，并规定了相应的最大使用量[2]，防止滥用甜味剂的现象发生。本方法采用高效液相色谱-质谱联用法，可快速、简便、准确地定性定量检测食品中的安赛蜜，适用于实验室进行大量检测[3-4]。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

红酒、果汁、糕点、蜜饯、牛奶及酸奶样品均购于超市；安赛蜜标准溶液[证书编号为GBW(E)100171，北京海岸鸿蒙标准物质技术有限责任公司]；甲醇、乙腈、甲酸（Fisher公司，色谱纯）；三氯甲烷、甲酸铵、三乙胺、亚铁氰化钾、乙酸锌（分析纯，国药集团）；HLB固相萃取柱（Waters oasis，6 mL）；实验室一级超纯水。

1.2 仪器与设备

LCMS-4500高效液相色谱质谱联用仪（配ESI源，AB公司）；BSA124S-CW电子天平（精密度0.000 1 g，赛多利斯科学仪器有限公司）；IKA VORTEX 3涡旋混匀器；离心机（湖南湘仪实验室仪器开发有限公司）；HSC-B水浴氮吹仪（天津市恒奥科技发展有限公司）；KQ5200DE型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）等。

1.3 试验方法

1.3.1 标准溶液配制

将浓度为1 000µg·mL-1的安赛蜜标准溶液分别用甲醇-水（体积比1∶1）稀释成20 ng·mL-1、50 ng·mL-1、100 ng·mL-1、200 ng·mL-1和500 ng·mL-1的标准工作液。

1.3.2 样品前处理

参照《出口食品中六种合成甜味剂的检测方法 液相色谱-质谱/质谱法》（SN/T 3538—2013）进行处理。

1.3.3 仪器条件

（1）液相色谱条件。色谱柱：Eclipse Plus C18（100 mm×2.1 mm，3.5µm）；流动相：0.1%甲酸-5 mmol·L-1甲酸铵+乙腈，梯度洗脱，见表1；流速：0.5 mL·min-1；进样量：2µL；柱温：40 ℃。

表1 液相色谱的梯度洗脱条件

（2）质谱条件。离子化模式：ESI-；扫描模式：多反应监测（MRM）；离子源温度：550 ℃；电喷雾电压（IS）：-4 500 V；气帘气（CUR）：35 Psi；碰撞气（CAD）：9 Psi；雾化器（GS1）：50 Psi；辅助加热器（GS2）：50 Psi；其他多反应监测条件见表2。

表2 多反应监测条件

2 结果与分析

2.1 色谱及质谱图

由图1可知，目标化合物峰型尖锐对称、半峰宽符合要求，响应值可达5.5×104，信噪比远大于10，定性与定量离子对稳定存在，可有效确定该化合物为安赛蜜，从而进行准确的定性定量分析。

图1 目标物色谱图

2.2 线性范围及定量限

以安赛蜜定量离子的峰面积为纵坐标（y），相应的质量浓度为横坐标（x），在20～500 ng·mL-1线性关系良好，绘制的标准曲线方程：y=25 900x+40 800，相关系数r=1.000 0。

仪器定量限：当上机浓度为20 ng·mL-1时，仪器的信噪比为83.1。当信噪比为10时，对应的上机浓度为2.4 ng·mL-1。

方法定量限：当上机浓度为2.4 ng·mL-1，计算得牛奶和酸奶中安赛蜜的方法定量限为0.001 2 mg·kg-1，红酒、果汁、糕点和蜜饯中安赛蜜的方法定量限为0.12 mg·kg-1，能满足SN/T 3538—2013标准中0.01 mg·kg-1和1.0 mg·kg-1的定量限要求。

2.3 回收率与精密度

在不同基质的空白样品中，分别添加1、2、5倍定量限浓度水平的标准溶液进行加标回收试验，且分别在不同浓度下做6平行试验，计算加标回收率和精密度RSD，结果见表3～表4。本方法准确度和精密度良好，满足GB/T 27404—2008[5]的要求。

表3 红酒、果汁、糕点、蜜饯基质中加标回收率及精密度

表4 牛奶、酸奶基质中加标回收率及精密度

3 结论

本文参照《出口食品中六种合成甜味剂的检测方法 液相色谱-质谱/质谱法》（SN/T 3538—2013），对安赛蜜的液相分离条件及离子对的扫描条件进行了优化，能准确检测出不同基质中添加的安赛蜜含量，并从线性关系、重复性、定量限点的信噪比、不同浓度水平的加标回收率及精密度等方面做了大量试验，结果表明，该方法测定不同基质中的安赛蜜，方法稳定，准确可靠，为研究食品中安赛蜜的测定提供了一定的检测依据。