外周血sTREM-1、sIL-2R及leptin水平与新生儿肺炎病情程度及预后的相关性

梁云香，徐 容，赵颖琼，唐碧玺

新生儿肺炎(NP)是新生儿阶段常见的呼吸系统疾病之一，据统计因肺炎死亡的新生儿占所有死亡儿童的10%左右[1]。既往研究表明，若未及时给予治疗或治疗效果不好，NP易发展为重症肺炎，甚至导致气胸、肺不张等，使得患儿预后不良[2]。现阶段病原菌培养仍是诊治NP的重要依据，但因培养所需时间长，存在一定局限性。随着学者对NP发生机制的深入研究，发现NP的发生发展与炎症反应、免疫功能密切相关[3]。可溶性髓样细胞触发性受体-1(sTREM-1)是与炎症相关的免疫球蛋白超家族成员，可促进炎性因子的产生，是激发、放大炎症反应的重要介质[4]。可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)是活化淋巴细胞膜IL-2R的主要成分，通过竞争性结合白细胞介素-2发挥免疫抑制作用，已被证实与炎症性疾病、病毒感染等病情进展相关[5]。瘦素(leptin)属于内分泌代谢激素，近年来研究发现其除可抑制进食、增加代谢外，还与炎症反应应答、修复、免疫功能等相关[6]。目前少有研究将外周血sTREM-1、sIL-2R及leptin水平与NP相联系。基于此，本研究探讨上述血清学指标与NP患儿病情严重程度及预后的相关性。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择本院2017年4月—2020年6月诊治的109例NP。纳入标准：①符合肺炎诊断标准[7]；②无其他呼吸系统疾病；③患儿临床资料完整。排除标准：①存在循环系统、消化系统、神经系统等合并症或其他感染症状；②存在免疫系统缺陷疾病或先天性疾病；③近期有糖皮质激素或免疫球蛋白等免疫制剂使用史者。所有患儿中，男57例、女52例；日龄5～17(12.43±2.15)d；胎龄35～39(37.84±0.93)周；出生体质量2.3～4.5(3.15±0.46)kg；分娩方式：顺产50例，剖宫产59例。

1.2研究方法 收集所有患儿临床资料，包括性别、胎龄、疾病类型等。抽取患儿晨起空腹静脉血3 ml，3000 r/min离心15 min，留取上清液储存于-20 ℃环境保存备用。采用酶联免疫吸附试验检测sTREM-1、sIL-2R及leptin水平。具体操作：将待测标本与试剂盒置于室温下解冻，在酶标板上分设空白孔、标准孔、试验组待测样品孔、对照组待测样品孔，其中前两者分别加样品稀释液100 μl、标准品稀释液100 μl，后两者分别加试验组、对照组血清样本各100 μl，混匀后封闭，37 ℃温育2 h；弃液体，甩干，每孔分别加检测溶液A 100 μl，37 ℃温育1 h；弃液体，甩干，每孔加洗涤液400 μl，洗板3次；每孔加检测溶液B 100 μl，37 ℃温育1 h；洗板5次，每孔加底物溶液90 μl，避光显色15～20 min，然后加终止液50 μl，终止反应。测量光密度值。根据患儿疾病严重程度分为轻症组和重症组[8]，根据治疗2周后预后情况分为预后不良组和预后良好组。预后判断标准参照《儿科住院医师手册》[8]，将治疗效果欠佳，生命体征不稳定，且出现心力衰竭、肺不张、呼吸衰竭等并发症或死亡者视为预后不良，否则视为预后良好。

1.3治疗方法 清理患儿呼吸道并保持通畅；给予抗感染治疗，对于早发性肺炎患儿予革兰阴性菌敏感抗生素治疗，晚发性肺炎患儿予革兰阳性菌敏感抗生素治疗，必要时考虑呼吸机治疗。

1.4观察指标 比较不同程度NP患儿sTREM-1、sIL-2R及leptin水平；比较不同预后NP患儿sTREM-1、sIL-2R及leptin水平；采用受试者工作特征(ROC)曲线评估sTREM-1、sIL-2R及leptin水平预测NP患儿预后的价值；采用Cox单因素及多因素分析探讨影响NP患儿预后的相关因素。

2 结果

2.1不同程度NP患儿sTREM-1、sIL-2R及leptin水平比较 重症组患儿sTREM-1、sIL-2R水平显著高于轻症组，leptin水平显著低于轻症组(P<0.01)。见表1。

表1 不同程度NP患儿sTREM-1、sIL-2R及leptin水平比较

2.2不同预后患儿sTREM-1、sIL-2R及leptin水平比较 预后良好组患儿sTREM-1、sIL-2R水平显著低于预后不良组，leptin水平显著高于预后不良组(P<0.01)。见表2。

表2 不同预后NP患儿sTREM-1、sIL-2R及leptin水平比较

2.3sTREM-1、sIL-2R及leptin水平对NP患儿预后的预测价值 sTREM-1、sIL-2R及leptin水平预测NP患儿预后的最佳截断值分别为>96.07 ng/L、>335.44 ng/L和≤4.33 ng/ml，三者联合预测的曲线下面积(AUC)及特异度均高于单一指标预测。见表3和图1。

表3 sTREM-1、sIL-2R及leptin水平对NP患儿预后的预测价值

2.4影响NP患儿预后的相关因素 将预后良好与预后不良作为因变量，将分娩方式、日龄、性别、出生体质量等指标作为自变量，分别赋值(表4)行Cox单因素及多因素分析，结果显示sTREM-1、sIL-2R及leptin水平均是NP患儿预后不良的独立危险因素(P<0.05，P<0.01)。见表5。

表4 NP患儿预后影响因素赋值表

3 讨论

NP在新生儿疾病中发病率和病死率均占首位，其发生多因低体质量、呼吸中枢或器官发育不成熟、肺表面活性物质少、免疫功能低下等原因引起，极易引起呼吸衰竭、心力衰竭等并发症[9]。因NP临床表现多样，症状、体征缺乏特异性，且日龄越小新生儿临床症状越不典型，给疾病的诊断及病情监测带来较大困难，导致贻误病情，造成不良预后。既往通常经X线片、病原学检查诊断NP，但存在所需时间长、特异度低等局限性，且难以用于疾病监测和预后评估。近年来，为快速高效诊断NP，已有多个生物学标志物被证实不仅在NP诊断方面具有较高的效能，还在疾病监测和预后评估方面也有一定的指导意义。

sTREM-1是新近发现的一个受体家族，郑瑜等[10]研究发现其在铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌等细菌或真菌感染时明显升高；相反，在非感染性疾病中无明显升高。sTREM-1可释放进入血液、体液，并与脓毒症、肺炎等多种疾病密切相关，现已成为早期诊断炎症性疾病的新指标[11]。sIL-2R由活化的T淋巴细胞及单核细胞产生，是一种重要的免疫抑制物质，可较好反映机体细胞免疫功能，其在血清及其他体液中水平变化与临床多种疾病程度密切相关。leptin是一种ob基因编码的以脂肪细胞合成的与代谢密切相关的蛋白激素，以单体形式存在于血浆中。最初多数学者认为leptin可通过抑制神经肽Y的分泌参与食物摄入与能量代谢调节，但近年研究发现其与感染性疾病的发生发展也存在一定的相关性[12-13]。本研究对NP患儿根据病情严重程度分组，结果显示重症组患儿sTREM-1、sIL-2R水平显著高于轻症组，leptin水平显著低于轻症组，提示外周血sTREM-1、sIL-2R及leptin水平与NP患儿病情严重程度密切相关。分析其原因，重症NP发生时，常伴有缺氧、酸中毒，加之内毒素作用，抗原呈递细胞分泌的前炎性因子会促进内皮细胞、成纤维细胞等释放更多、更强烈的炎性介质，导致剧烈的炎症反应，严重破坏机体组织和功能。上述诸多因素可能会抑制leptin水平，从而导致重症患儿体内leptin水平降低[14]。NP发生感染的同时T淋巴细胞活化增殖，并释放IL-2，从而增强T淋巴细胞的杀伤能力，当IL-2R高表达时，因亲和力降低，血清中sIL-2R水平也会升高，降低IL-2活性，阻碍T淋巴细胞活化增殖，影响其杀伤能力，从而导致NP患儿病情加重[15]。NP的发生会刺激机体细胞合成和释放多种细胞因子，sTREM-1作为细菌和真菌急性炎症反应的触发器和放大剂，会放大炎症反应，触发瀑布级联反应，导致组织器官炎性损伤，加重病情[16]。当NP患儿病情进展至重症时，预后情况较轻症患儿差。

本研究对不同预后患儿外周血sTREM-1、sIL-2R、leptin水平进行分析，结果显示预后良好组患儿sTREM-1、sIL-2R水平显著低于预后不良组，leptin水平显著高于预后不良组，提示外周血sTREM-1、sIL-2R水平较高及leptin水平较低的患儿病情更为严重，预后也更差。为明确上述各外周血指标对患儿预后的评估价值，笔者通过绘制ROC曲线进行分析，结果显示三者联合预测的AUC值及特异度均高于单一指标预测，提示sTREM-1、sIL-2R及leptin水平均对NP患儿预后有一定的预测价值，其中三者联合预测效能最高。此外，本研究结果还显示，sTREM-1、sIL-2R及leptin水平均是NP患儿预后不良的独立危险因素，进一步证实了sTREM-1、sIL-2R及leptin水平异常变化与NP患儿预后不良的相关性。

综上，外周血sTREM-1、sIL-2R及leptin水平与NP患儿病情严重程度相关，是影响患儿预后的重要因素，其水平高低可作为评估患儿病情、预测预后的重要指标，且三者联合检测可提高对预后的预测效能。但本研究也存在局限性，未从生物学角度探讨sTREM-1、sIL-2R及leptin水平在NP中的变化情况，可能会影响结果判断，故今后仍有待于论证本研究结果。