孕妇血清VEGF、sFlt-1、Eph-A5及胎盘形态与胎盘植入的相关性研究

吴雪柯 胡孟彩 高 翔 孙文静 王美芝

郑州大学第三附属医院妇产科，河南郑州 450000

胎盘植入临床症状较为隐匿，且发病急促，发病率高，近年来胎盘植入的发病率呈逐年升高的趋势，且产前诊断较为困难，严重影响母婴生命安全[1]。目前临床主要根据高危因素结合彩色多普勒超声和（或）MRI进行诊断[2]。在正常怀孕期间，血管系统的发育为胚胎和胎儿提供充足的营养和氧气供应。多种调节分子在胎盘滋养细胞的侵袭和发育过程中发挥着功能性作用。调查显示[3]，近年来，血清学标志物预测妊娠期危重症的价值被广泛关注，因此本研究分析孕妇血清血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）、可溶性血管内皮生长因子受体1（soluble vascular endothelial growth factor receptor 1，sFlt-1）、促红细胞生成素产生肝细胞受体（erythropoietin produces hepatocyte receptors，Eph-A5）、胎盘形态与胎盘植入的相关性，为临床上胎盘植入的早期诊断提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2021年1—5月于郑州大学第三附属医院产科就诊高度怀疑胎盘植入，后经剖宫产后最终临床诊断和病理诊断证实为胎盘植入的孕妇60例作为试验组；另外选取30例正常剖宫产分娩的孕妇作为对照组。纳入标准：①有子宫切开史、剖宫产史、多产史、人工流产史、高龄孕妇及孕期超声提示胎盘植入等产前胎盘植入高危因素；②单胎妊娠；③产前检查资料保存完整；④剖宫产终止妊娠。排除标准：①多胎妊娠；②妊娠合并糖尿病及高血压；③胎儿畸形；④胎盘形态异常（血肿、血池）。试验组在产后最终临床诊断和病理诊断均证实为胎盘植入，符合《胎盘植入诊治指南（2015）》[4]中对胎盘植入的诊断标准。对照组胎盘正常。两组均自愿参与本研究，签署了知情同意书，且经郑州大学第三附属医院医学伦理委员会审核批准。

1.2 方法

1.2.1 实验室检测 所有纳入的对象均在分娩前一周内清晨采集空腹静脉血3 ml，室温静置30 min，3000 r/min离心15 min，取上清液并进行分装保存于-80℃冰箱中待用。采用ELISA法检测血清VEGF、sFlt-1、Eph-A5的水平，ELISA试剂盒均由上海江莱生物科技有限公司提供，货号分别为：JL18341、JL13928、JL11336，检测方法严格按照说明书进行。

1.2.2 胎盘形态 所有孕妇产前采用Siemens Verio 3.0T MRI磁共振仪检查，MRI检查使用GE 1.5T Signa HI超导型MR系统，行横断面T1W1、FIESTA序列、SS-FSE序列扫描，由2名经验丰富高年资的影像诊断医师采用双盲法评价胎盘形态。根据核磁征象对胎盘形态进行判读和记录：胎盘形态，根据是否膨隆分为3种类型，Ⅰ型：胎盘母体面光滑，无局限性膨隆；Ⅱ型：胎盘轻度膨隆，宫外轮廓平滑肌层无明显中断表现；Ⅲ型：胎盘膨隆，宫外轮廓结节状突起。

1.3 观察指标

①比较两组一般资料。②比较孕妇血清VEGF、sFlt-1、Eph-A5水平变化与胎盘植入的关系。③孕妇血清VEGF、sFlt-1、Eph-A5水平变化与植入组孕妇MRI检测的胎盘形态的关系分析。④分析血清VEGF、sFlt-1、Eph-A5及胎盘形态对胎盘植入的诊断价值。⑤分析血清VEGF、sFlt-1、Eph-A5及胎盘形态与胎盘植入的相关性。

1.4 统计学处理

采用SPSS 26.0统计学软件进行分析处理。应用Kolmogorov-Smirnov检验数据是否符合正态分布，符合正态分布的计量资料以均数±标准差（）表示，多组间比较采用方差分析，两组间比较采用独立样本t检验；采用ROC曲线分析血清VEGF及sFlt-1、Eph-A5及胎盘形态对胎盘植入的诊断价值，logistic回归分析VEGF、sFlt-1、Eph-A5及胎盘形态与胎盘植入的相关性。P＜ 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组一般资料比较

试验组年龄25～36岁，平均（29.35±3.45）岁，初产妇29例、经产妇31例，既往剖宫产史16例，根据疾病类型分为胎盘粘连组（18例）、胎盘植入组（29例）、穿透性胎盘植入组（13例）三个亚组。对照组年龄25～37岁，平均（29.68±3.45）岁，产妇18例、经产妇12例，既往剖宫产史6例。试验组和对照组孕妇一般资料比较，差异无统计学意义（P＞ 0.05）。具有可比性。

2.2 孕妇血清VEGF、sFlt-1、Eph-A5水平变化

试验组血清VEGF高于对照组，sFlt-1、Eph-A5低于对照组，差异有统计学意义（P＜ 0.05）；胎盘植入组、穿透性胎盘植入组血清VEGF高于胎盘粘连组，血清sFlt-1、Eph-A5低于胎盘粘连组，差异有统计学意义（P＜ 0.05）；穿透性胎盘植入组血清VEGF高于胎盘植入组，血清sFlt-1、Eph-A5低于胎盘植入组，差异有统计学意义（P＜ 0.05）。见表1。

表1 孕妇血清VEGF、SFIt-1、Eph-A5水平变化（x ± s）

2.3 孕妇血清VEGF、sFlt-1、Eph-A5水平变化与植入组孕妇胎盘形态的关系分析

试验组胎盘形态Ⅱ型、Ⅲ型孕妇血清VEGF高于Ⅰ型，血清sFlt-1、Eph-A5低于Ⅰ型，差异有统计学意义（P＜ 0.05）；试验组胎盘形态Ⅲ型孕妇血清VEGF高于Ⅱ型，血清sFlt-1、Eph-A5低于Ⅱ型，差异有统计学意义（P＜ 0.05）。见表2。

表2 孕妇血清VEGF、sFlt-1、Eph-A5水平变化与试验组孕妇胎盘形态的变化（x ± s）

2.4 ROC曲线分析血清VEGF、sFlt-1、Eph-A5及胎盘形态对胎盘植入的诊断价值

ROC曲线显示，与血清VEGF、sFlt-1、Eph-A5及胎盘形态单项诊断比较，四项联合对胎盘植入的诊断价值较高（P＜ 0.05）。以正确诊断指数最大对应的血清VEGF、sFlt-1、Eph-A5值作为最佳诊断分界点，分界点VEGF值为282.35 pg/ml，血清sFlt-1值为2816.35 pg/ml，Eph-A5 值为 9.15 pmol/L。见表3、图1。

图1 血清VEGF、sFlt-1、Eph-A5及胎盘形态对胎盘植入的诊断价值ROC曲线

表3 ROC曲线分析血清VEGF、sFlt-1、Eph-A5及胎盘形态对胎盘植入的诊断价值

2.5 logistic回归分析胎盘植入影响因素

胎盘植入发生作为因变量（赋值：未发生=0，发生 =1），将血清 VEGF（赋值：＜282.35 pg/ml=0，≥282.35 pg/ml=1）、血清sFlt-1（赋值：≥2816.35 pg/ml=0，＜2816.35 pg/ml=1）、血清Eph-A5（赋值：≥9.15 pmol/L=0，＜9.15 pmol/L=1）及 胎 盘 形 态（赋 值：Ⅰ 型 =0，Ⅱ/Ⅲ型=1）作为自变量，纳入二分类多因素logistic回归模型分析，结果显示，血清VEGF、sFlt-1、Eph-A5及胎盘形态为影响胎盘植入发生的因素。见表4。

表4 logistic回归分析胎盘植入的影响因素

3 讨论

胎盘植入属于一种在围产期较为严重的并发症，是影响母婴结局、产后出血、围产期紧急子宫切除的重要因素，目前胎盘植入的发生率呈逐年升高的趋势，因此早期的诊断评估显得尤为重要[5]。临床上采用血清学指标诊断胎盘植入，sFlt-1是一种可溶性血管内皮生长因子受体，主要分布于子宫内膜及胎盘等众多组织，是VEGF受体Flt-1的可变剪接体，但与Flt-1蛋白具有不同的生物学活性，对VEGF具有拮抗作用，能够与VEGF的受体KDR/Flt-1竞争结合VEGF，进而阻断VEGF在体内发挥促血管新生的生物学活性[6]。研究表明[7]，VEGF对可对血管生长进行调节，进而对血管通透性造成了影响，VEGF在妊娠期胎盘内膜、胎儿滋养层细胞等组织中有较为广泛的表达，进而对胎盘血管网络的构建起到了促进作用。另有研究显示[8]，在胎盘植入发生后，母体血清中的VEGF含量明显增加，而sFlt-1含量降低。本研究分析了孕妇血清VEGF、sFlt-1与胎盘植入的关系，结果显示，发生胎盘植入的孕妇血清中VEGF表达升高，sFlt-1表达降低，其结果与上述研究结果一致。分析其原因为正常孕晚期孕妇体内VEGF、sFlt-1处于较为稳定的状态，当VEGF表达升高、sFlt-1表达降低时对孕妇胎盘血管的形成、发育起到了促进作用，进而推动了胎盘植入的发生、发展[9]。

另外有研究显示，在胎盘合体滋养细胞活性改变、胎盘附着部位缺血性氧化应激发生时Eph-A5出现明显的波动，Eph-A5可经激活下游酪氨酸激酶的活性而加剧机体内氧化应激反应，促进胎盘组织发生炎症级联作用[10]。本研究结果显示，胎盘植入孕妇血清中Eph-A5表达降低，其结果与杨琳等[11]关于Eph-A5在前置胎盘合并胎盘植入的研究结果一致，提示着Eph-A5可能与胎盘植入相关，但目前临床关于Eph-A5在胎盘植入的相关研究甚少，且本研究未对其具体作用机制进行分析，因此需后续大样本，多中心的进行分析其具体作用机制。

胎盘在维持胎儿宫内生长发育方面具有重要的意义，正常的胎盘形态是胎盘维持自身功能的基础，但当胎盘形态失常后会影响其营养物质运输、代谢功能，进而影响胎儿生长发育，导致不良妊娠结局的发生[9-13]。临床研究发现，多种疾病与胎盘形态异常相关，如妊娠期糖尿病患者胎盘体积增大、胎盘前置患者胎盘形态不良等[14-16]。目前临床上关于胎盘形态与胎盘植入的关系研究较少，研究认为，评估胎盘形态有助于诊断胎盘植入，鉴于此，在本研究中分析胎盘形态与胎盘植入的关系，结果显示，胎盘植入孕妇均伴随着的不同程度的胎盘形态改变，提示着胎盘形态改变与胎盘植入相关，其结果与张杰等[17-18]关于MRI诊断胎盘植入的相关研究一致。且本研究分析不同胎盘形态下胎盘植入孕妇血清VEGF、sFlt-1、Eph-A5水平变化，结果显示，随着胎盘形态的改变程度加深，血清VEGF、sFlt-1、Eph-A5水平变化越来越显著，本研究结果提示，血清VEGF、sFlt-1、Eph-A5水平改变可能与胎盘植入孕妇胎盘形态相关。

另外本研究采用ROC曲线明确血清VEGF、sFlt-1、Eph-A5最佳诊断分界点，并进一步采用logistic回归分析血清VEGF、sFlt-1、Eph-A5及胎盘形态与胎盘植入的相关性，结果显示，血清VEGF、sFlt-1、Eph-A5及胎盘形态与胎盘植入发生相关。但本文并未深入研究具体作用机制，因此本研究结果还需后续研究验证，以期望为临床上胎盘植入的早期评估提供参考。