血清TLR2、PGE2、IL-6对自发性早产的预测价值研究

于春梅 柴婷婷 王青

济南市妇幼保健院妇产科急诊，济南 250002

早产是引起新生儿近远期并发症和死亡的主要原因，其不仅是严重的医学问题，同时也是严重的公众健康和社会问题［1］。临床上预测早产常用的方法有询问早产病史、监测宫缩、孕中期测量宫颈长度及形态、监测宫颈阴道分泌物中胎儿纤维连接蛋白浓度等［2-4］。这些适用于临床诊断为先兆早产或有早产高危因素孕妇的早产预测，目前仍缺乏预测自发性早产（spontaneous preterm birth，SPB）的敏感性指标。近年研究表明，TOLL样受体2（toll-like receptor 2，TLR2）、前列腺素E2（prostaglandin E2，PGE2）及白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）等炎症因子与早产相关［5-7］。本研究对济南市妇幼保健院产检具有早产高危因素的289例孕妇进行分析，旨在进一步探讨炎症因子TLR2、PGE2及IL-6对SPB的预测价值。

资料与方法

1、一般资料

收集2019年3月至2020年3月于济南市妇幼保健院产检具有早产高危因素的孕妇289例，孕20～24周时抽取静脉血，离心后分离血清，保存备用，随访妊娠结局并记录终止妊娠孕周。289例孕妇中，有21例SPB，263例足月产，3例治疗性早产，1例晚期流产，1例失访，最终纳入284例。将孕28～36周SPB的孕妇作为研究组，孕37周后足月产的孕妇作为对照组。研究组21例（SPB），平均分娩孕周（34.08±2.16）周；对照组263例（足月产），平均分娩孕周（39.25±1.11）周。两组年龄、BMI、受教育程度、孕次、产次、分娩方式比较，差异均无统计学意义（均P＞0.05），研究组受孕方式中辅助生殖技术人数显著多于对照组（P＜0.05），见表1。纳入标准：于我院产检并分娩的孕妇；孕周20～24周；单胎妊娠；具有早产高危因素。排除标准：因胎儿异常或畸形引产者；因妊娠期合并症治疗性引产者；有吸烟、酗酒等不良嗜好者；双胎妊娠；失访者。本研究通过济南市妇幼保健院医学伦理委员会批准，受试者均签署知情同意书。

表1 两组孕妇一般资料比较

2、资料收集

收集研究对象年龄、体质量指数（body mass index，BMI）、受教育程度、受孕方式、孕产史及分娩方式等一般资料。采用酶联免疫吸附法检测血清中TLR2、PGE2、IL-6浓度，仪器为美国全自动酶标检测仪VERSAmax，试剂盒均购自上海润裕生物科技有限公司。

3、统计学方法

采用SPSS 22.0软件进行统计学分析，计量资料符合正态分布，以均值±标准差（±s）描述，采用独立样本t检验。计数资料比较采用χ2检验，应用多因素logistic回归模型来分析SPB的独立预测因素，应用受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic，ROC）分 析 血 清TLR2、PGE2及IL-6对SPB的预测价值。P＜0.05表示差异有统计学意义。

结 果

1、两组TLR2、PGE2和IL-6水平比较

研究组血清TLR2、PGE2、IL-6水平均显著高于对照组（均P＜0.05），见表2。

表2 两组孕妇TLR2、PGE2和IL-6水平比较（±s）

表2 两组孕妇TLR2、PGE2和IL-6水平比较（±s）

注：研究组为孕28～36周SPB的孕妇，对照组为孕37周后足月产的孕妇；TLR2为TOLL样受体2，PGE2为前列腺素E2，IL-6为白细胞介素-6

组别研究组对照组t值P值例数21 263 TLR2（μg∕L）3.75±0.83 2.38±0.66 8.971＜0.001 PGE2（pg∕ml）41.73±8.19 31.74±7.53 5.813＜0.001 IL-6（pg∕ml）175.81±37.32 141.49±28.21 5.228＜0.001

2、Logistic多因素回归分析

多因素logistic回归分析显示，TLR2、PGE2和IL-6的比值比（odds ratio，OR）分别为1.590、1.714、1.501，是SPB的独立预测因子（均P＜0.05），见表3。

表3 预测SPB的logistic多因素回归分析（284例）

3、TLR2、PGE2和IL-6预测SPB的ROC

ROC分析显示，TLR2、PGE2和IL-6预测SPB的曲线下面积（area under curve，AUC）分别为0.895、0.807和0.900，以IL-6的预测价值最大，见表4、图1。

表4 TLR2、PGE2和IL-6预测SPB的价值（284例）

图1 TLR2、PGE2和IL-6预测SPB的ROC

讨 论

早产是多因素作用的结果，根据病因可分为SPB和医源性早产。近20年来，早产率呈逐渐上升趋势。全球每年约有1 300万早产儿出生，占全部新生儿的10%左右，SPB占早产发生的70%左右［8-9］。早产是导致婴幼儿脑瘫、发育迟缓、视网膜病变及慢性肺部疾病等长期并发症和后遗症的重要因素，也是导致新生儿死亡的主要原因之一，因此，降低早产（尤其是SPB）是降低围产儿病死率及提高新生儿生存质量的主要措施。SPB的病因和发病机制尚不明确，其高危因素主要包括母体感染、宫颈缩短、既往早产史及本次妊娠的危险因素等［10］。感染引起的早产通常是隐匿的，孕中期感染可导致数周后早产，且分娩孕周越小，宫腔感染越常见。微生物学研究表明，25%～40%的早产是由感染相关炎症导致的［11］。感染时母胎界面出现炎症性级联反应，释放炎症因子和趋化因子，刺激羊膜、绒毛膜、底蜕膜及子宫肌层释放前列腺素（prostaglandin，PG），诱发子宫收缩，还可刺激羊膜、宫颈释放金属蛋白酶，基质降解酶，引起胎膜细胞外基质降解，导致未足月胎膜早破，从而诱发早产［12］。

PG是分娩发动的最重要刺激源，对生殖系统有较强生物学效应的PG有PGE1、PGE2和PGF2，且含量会随着孕周的延长而增加［13］。临产时母体血浆和羊水中PG及其代谢产物浓度升高，使子宫肌细胞内钙离子水平升高，活化肌球蛋白轻链激酶，引起子宫平滑肌收缩，并增加子宫肌细胞间缝隙连接，使宫缩保持协调性［14］。有研究发现，早产妇女血清中PGE2水平较同孕龄晚期妊娠妇女、足月妊娠临产妇女显著增高，提示血液中PGE2过高可能是导致早产的因素之一［15］。本研究显示，研究组孕20～24周时血清中PGE2含量显著高于对照组（P＜0.05），与上述研究结果一致，说明TLR2含量异常上升可能与SBP有关。考虑Toll样受体（TLR）是一类识别病原分子的蛋白质受体，参与非特异性免疫，也是连接非特异性免疫和特异性免疫的桥梁，其最重要的生物学功能是促进细胞因子的合成与释放，引起炎性反应。研究证实，TLR2是TLR家族中参与免疫和感染的重要成员之一，可诱导合成环氧合酶-2、PGE2，引起子宫收缩，诱发早产［16］。妊娠女性滋养细胞TLR2表达上调可通过介导炎性反应、诱导细胞凋亡等途径，导致滋养细胞凋亡数目增多，大量PGE2分泌，导致胎膜早破，诱导早产发动。

IL-6是一种典型的细胞因子，介导细胞间的免疫应答。当机体出现感染时，骨髓基质细胞产生IL-6，刺激细胞核转录因子-kB（nuclear factor-kappa B，NF-kB）受体活化因子配体，增强NF-kB活性，诱导IL-6 mRNA转录，从而产生免疫应答反应［17］。宫内感染时，病原体侵入绒毛膜蜕膜间隙，产生多种细胞因子，激活PG合成系统，降低PG降解酶活性，PG含量增加，引起子宫收缩，诱发早产；另外，细胞因子还可以产生蛋白水解酶，水解胎膜细胞外基质，使胎膜细胞坏死，胎膜破裂，诱发早产［18］。已有研究证实，分娩发动时，IL-6水平显著升高，直接或间接刺激PG合成，引发早产［19］。马艳［20］与曹士红等［21］学者指出，SPB者孕中期血清TLR2和IL-6浓度显著高于足月产者，TLR2和IL-6可预测早产。本研究结果显示，研究组血清TLR2、PGE2和IL-6水平均显著高于对照组，且多因素分析显示，TLR2、PGE2和IL-6均是SPB的独立预测因子，说明这些炎症因子可能与自发性早产相关。妊娠期间，羊膜、子宫蜕膜与胎盘滋养层细胞均可合成IL-6，其表达异常上升可通过影响花生四烯酸代谢途径刺激PGE2合成及分泌，促宫颈成熟及子宫收缩，导致宫缩提前，造成宫颈软化，诱发早产。而TLR家族承担调节先天免疫与后天获得性免疫的作用，可通过介导NF-kB转录，诱导IL-6分泌，影响母胎免疫耐受，导致母体、胎儿产生免疫排斥，引起早产。故认为可通过监测妊娠期间三者水平表达的变化预测SPB发生。

此外，为进一步验证上述因子预测SPB的价值，本研究还采用ROC分析评价各指标的预测价值，结果显示，TLR2、PGE2和IL-6预测SPB的AUC分别为0.895、0.807和0.900，以IL-6对SPB的预测价值最大，其灵敏度为90.48%，特异度为77.78%。由此可见，监测血清TLR2、PGE2和IL-6水平变化有助于早期预测SPB发生，从而为临床防治提供指导。

综上所述，炎症因子TLR2、PGE2和IL-6与早产密切相关，可作为SPB的预测指标，孕中期孕妇血液中3种细胞因子表达显著升高，可诱发炎性反应，易导致早产。

利益冲突所有作者均声明不存在利益冲突