糖尿病足溃疡老年患者免疫因子水平变化的研究①

李新杰 周玉森 孔艳华 张允 梅艳洁 石方方 郝树立（亳州市人民医院，亳州 236800）

糖尿病足溃疡（diabetic foot ulcers，DFU）为糖尿病患者血管病变及周围神经病变严重并发症类型，老年群体因机体功能、免疫代谢等功能发生退化，故成为该疾病高危人群［1-2］。流行病学研究表明，近年来，随人口老龄化形势加剧，发展中国家及发达国家糖尿病患病率均呈持续升高趋势，预计全球糖尿病患病率可于2025年达到约7%，社会经济负担显著增加［3-4］。另有研究显示，25%的糖尿病患者可于某一时期发生足溃疡，若未及时得到有效干预，可导致截肢［5-6］。近年来临床研究发现，DFU发生发展与免疫因素密切关联，患者多存在不同程度的免疫功能紊乱，针对不同病情程度DFU患者施以相应干预措施，是保证疾病治疗效果及预后的重要措施［7-8］。因此，除炎症因子水平监测外，明确DFU患者免疫功能相关指标水平及其与病情程度间的关联性对指导临床针对性制定干预方案有积极意义。基于此，本研究选择亳州市人民医院内分泌科116例DFU老年患者为研究对象，探讨其体液免疫因子水平及与病情程度的关联性。

1 资料与方法

1.1资料选择2017年10月至2019年10月亳州市人民医院内分泌科收治的DFU老年患者116例为研究组、单纯糖尿病老年患者116例为对照组，同期健康体检者116例为健康组。3组对象性别、年龄等一般资料差异无统计学意义（P＞0.05，表1）。根据病情（Wagner分级）将研究组分为5级，其中糖尿病足1级（无感染，皮肤表面存在溃疡）16例，2级（无骨感染及脓肿，存在软组织炎症，较深溃疡）21例，3级（存在脓肿及骨组织病变，深部感染）37例，4级（局限性坏疽）32例，5级（全足坏疽）10例（图1、2）。Anay 360型速率散射免疫比浊仪购自美国Beckman公司。

图1 男性，64岁，右足溃烂2个月Fig.1 Male，64 years old，with right foot ulcer for 2 months

表1 比较3组对象一般资料（±s，n=116）Tab.1 Comparation general information of 3 groups of subjects（±s，n=116）

表1 比较3组对象一般资料（±s，n=116）Tab.1 Comparation general information of 3 groups of subjects（±s，n=116）

Groups Research Control Healthy t P Gender（Male/Female）65/51 63/53 68/48 3.687 1.231 Age 66.41±6.13 66.02±5.98 63.81±6.06 9.623 0.476 Course of disease/year 8.78±2.04 9.02±1.97-5.314 0.339

1.2方法

1.2.1纳入与排除标准纳入标准：各组年龄均≥60岁；研究组及对照组空腹血糖≥7.0 mmol/L、餐后2 h血糖≥11.1 mmol/L；研究组糖尿病足病情程度为1～5级。排除标准：合并感染性疾病及甲状腺疾病；合并免疫系统疾病者；入院后采集患者血液样本测定伴有贫血等症状。合并肾肝等器质性病变者；合并恶性肿瘤；存在酮症酸中毒、糖尿病性心脏病、糖尿病肾病；合并慢性酒精中毒、心力衰竭。

1.2.2观察指标入院后2 d抽取各组空腹静脉血4 ml，离心（3 000 r/min，10 min）处理，取上清液，Anay 360型速率散射免疫比浊仪以速率散射免疫比浊法检测C3、C4、IgA、IgG、IgM水平，观察比较3组免疫因子差异；同时比较研究组不同糖尿病足病分级患者体液免疫因子水平差异，分析其与病情的关联性。

1.3统计学方法应用SPSS25.0软件对数据进行分析，计量资料以±s表示，组间比较采用独立样本t检验，若数据符合正态分布、方差齐采用方差分析，若是经变量变换后仍然不符合上述条件的则采用秩和检验；相关性分析采用Spearman相关分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.13组对象体液免疫因子水平比较结果表明，研究组C3、C4、IgG、IgM水平均高于对照组、健康组，IgA水平低于对照组、健康组，差异有统计学意义（P＜0.05）；对照组C3、C4、IgA、IgG、IgM水平与健康组差异均无统计学意义（P＞0.05，表2）。

表2 比较3组对象体液免疫因子水平（±s，n=116）Tab.2 Comparison of levels of humoral immune factors in 3 groups（±s，n=116）

表2 比较3组对象体液免疫因子水平（±s，n=116）Tab.2 Comparison of levels of humoral immune factors in 3 groups（±s，n=116）

Note：Compare with healthy group，1）P＜0.05；compare with control group，2）P＜0.05.

Groups Research Control Healthy F P C3 1.31±0.401）2）1.06±0.31 1.04±0.29 23.152＜0.001 C4 0.41±0.071）2）0.28±0.08 0.27±0.07 131.037＜0.001 IgA 2.15±0.791）2）2.72±1.02 2.69±0.86 14.895＜0.001 IgG 11.99±2.351）2）10.01±2.13 10.10±1.79 32.799＜0.001 IgM 1.51±0.541）2）1.10±0.46 1.12±0.41 27.700＜0.001

2.2不同病情程度患者体液免疫因子水平比较不同病情程度患者C3、C4、IgA、IgG、IgM水平差异有统计学意义（P＜0.05，表3）。

表3 比较不同病情程度患者体液免疫因子水平（±s）Tab.3 Comparison of levels of humoral immune factors in patients with different disease levels（±s）

表3 比较不同病情程度患者体液免疫因子水平（±s）Tab.3 Comparison of levels of humoral immune factors in patients with different disease levels（±s）

Disease level 1 class 2 class 3 class 4 class 5 class F P n 16 21 37 32 10 C3/（mg·dl-1）1.10±0.32 1.22±0.36 1.32±0.41 1.40±0.42 1.53±0.40 2.635 0.038 C4/（mg·dl-1）0.31±0.06 0.36±0.08 0.42±0.09 0.47±0.10 0.53±0.11 14.592＜0.001 IgA/（g·L-1）2.89±0.75 2.58±0.73 2.17±0.80 2.01±0.69 1.89±0.54 5.661＜0.001 IgG/（g·L-1）10.04±1.91 10.95±2.04 12.02±2.34 12.71±1.99 13.57±2.12 6.887＜0.001 IgM/（g·L-1）1.15±0.40 1.29±0.44 1.53±0.53 1.61±0.51 1.70±0.49 3.763 0.007

图2 入院后采用VSD联合UDMFig.2 VSD combined with UDM after admission

2.3体液免疫因子水平与病情程度的相关性分析Spearman相关分析结果显示，C3、C4、IgG、IgM水平与DFU病情呈正相关，IgA水平与疾病病情程度呈负相关（P＜0.0，图3、表4）。

图3 体液免疫因子水平与病情程度间的相关性Fig.3 Correlation between level of humoral immune factors and severity of disease

表4 体液免疫因子水平与病情程度的相关性Tab.4 Correlation between level of humoral immune factors and severity of illness

3 讨论

DFU为糖尿病患者多发重度慢性并发症，其致病机制较复杂，通常为多致病因素共同作用结果，与神经病变、下肢血管病变均有相关性［9-10］。DFU患者常合并严重的感染，且严重的患者体内细胞因子严重失衡，导致治疗难度提高［11-12］。有研究表明，DFU患者较单纯糖尿病患者免疫因子IgG水平明显升高，提示DFU可引起免疫因子水平变化［13］。国内亦有研究显示，DFU患者血清IgG、IgM、IgE较对照组显著升高［14］。本研究显示，研究组患者C3、C4、IgG、IgM水平高于对照组、健康组，IgA水平低于对照组、健康组，差异有统计学意义（P＜0.05），与相关研究结果一致［15］。表明DFU患者体液免疫功能异常，且免疫功能紊乱可于疾病发生发展中有重要作用，临床可以此为疾病治疗辅助方向，通过调节患者免疫功能改善其临床症状及疾病整体治疗疗效。DFU患者免疫功能发生紊乱原因，可能在于患者血糖长期处于高水平状态，白细胞杀菌能力、吞噬作用、趋化性减弱，以致免疫力降低。

本研究结果同时显示，不同病情程度DFU患者C3、C4、IgA、IgG、IgM存在显著差异，且其中C3、C4、IgG、IgM水平与病情呈正相关，IgA与病情呈负相关（P＜0.05），提示体液免疫因子水平可作为评估DFU病情程度的重要辅助指标，并可据此制定、调整针对性干预方案，保证治疗有效性及安全性。分析其原因DFU患者患病后体内免疫功能已经失衡，体液免疫作用效果低下。可能为患者长期处于高糖状态，血液循环受到影响，吞噬作用与杀菌能力均明显降低所致。本研究发现血清免疫球蛋白水平IgA、IgG、IgM广泛弥漫分布于DFU患者足部创面，可促进创面愈合，因此机体的体液免疫指标与DFU病情的转归密切相关。免疫球蛋白IgA、IgG、IgM是机体遭受抗原刺激而产生的主要抗体，与抗原结合可发挥免疫作用，减弱机体内病原体致病能力。补体C3、C4有酶活力，可介导免疫溶菌、溶血，当机体遭受病原体侵害时，可充分发挥吞噬作用，准确识别病原体，并激活级联酶促反应，进一步清除危害病原体。

本研究发现，C1、C3、C4是补体系统的重要组分之一，C1q属于C1的亚单位，有6个可与免疫球蛋白分子补体结合点相结合的部位，当＞2个结合部位与Ig分子结合时方可激活后续补体成分；C3c与C4c是C3与C4激活过程中裂解的重要片段，补体系统活化后可发挥杀菌、调理、免疫及炎症介质等作用，上述因子表达下调表明机体细胞免疫功能下降，可导致机体防御等相关生理功能下降，使机体更易并发感染且自身修复能力降低。本实验结论：体液免疫因子水平可通过促进创面局部免疫功能提高，增强局部抗感染与清除腐败组织的能力，通过免疫机制，促进创面愈合。因此上调创面局部免疫表达，提高局部免疫能力，可能是C3、C4、IgA、IgG、IgM促进创面愈合的机制之一。

综上所述，DFU患者体液免疫因子发生不同程度紊乱，C3、C4、IgG、IgM水平呈升高趋势，IgA水平呈降低趋势，因此检测免疫因子水平可为临床评估DFU病情提供参考。