Hcy、NSE及IL-2与缺血性脑卒中急性期患者认知功能的相关性研究

陈华 钱文军 张晓刚

1滨州医学院附属医院烟台业达医院临床心理科，烟台 264003；2滨州医学院附属医院烟台业达医院神经内科，烟台 264003

缺血性脑卒中是指脑循环障碍导致的局限性或全面性脑功能损伤，脑功能损伤可引发吞咽障碍、大小便障碍、肢体功能障碍、认知功能障碍等［1］。认知功能障碍是指在学习、记忆、思维判断等有关大脑高级智能加工中出现的异常状况，认知功能障碍是缺血性脑卒中后常见的并发症，报道显示发病率约为20.0%～80.0%，发病率与地区、种族、诊断标准及脑卒中病情、救治水平等因素有关［2］。同型半胱氨酸（homocysteine，Hcy）是含硫氨基酸的代谢产物，研究发现Hcy可作为血管性痴呆患者神经功能缺损程度及日常生活功能水平的独立预测因子［3］。神经元特异烯醇化酶（neuron specific enolase，NSE）是中枢神经系统的特异性标志物，脑卒中后由于中枢神经系统受损，神经细胞膜被破坏，NSE可从细胞外溢进入血脑屏障，是反应神经系统损伤的重要指标。白细胞介素-2（interleukin-2，IL-2）是炎症指标之一，IL-2水平的大幅上升预示了炎症级联反应，IL-2还可与IL-6相互作用，在脑血管疾病中经氧化应激损伤，引起脑缺血灌注不足，加重脑神经病功能损伤［4］。本研究旨在明确Hcy、NSE及IL-2与缺血性脑卒中急性期（发病后1～2周）认知功能的关联，为临床上预防或减轻缺血性脑卒中认知功能损伤提供参考。

资料与方法

1、一般资料

本研究经烟台业达医院伦理委员会审批通过，患者或家属知情并同意。（1）纳入标准：①均符合《中国各类主要脑血管病诊断要点2019》［5］中关于缺血性脑卒中的诊断标准；②均为急性期患者，发病后1～2周；③发病前认知功能正常。（2）排除标准：①严重脏器官病变、恶性肿瘤、恶性血液系统疾病、严重心力衰竭、心房纤颤、呼吸衰竭等；②昏迷、休克、失聪等无法行认知功能评测者；③缺血性脑卒中发作前已存在影响认知功能疾病，如阿尔茨海默病、精神分裂、双相情感障碍、强迫症等；④伴脑出血、蛛网膜下腔出血等中枢神经系统疾病者；⑤精神类药物、镇痛类药物滥用、酗酒、吸毒者；⑥严重凝血功能障碍、营养不良、感染者；⑦既往有脑卒中史、颅脑损伤史、脑手术史者；⑧患者或家属拒绝研究内容者。选取经烟台业达医院神经内科2019年4月至2021年5月接收的缺血性脑卒中急性期患者122例作为研究对象，其中男70例，女52例；年龄52～84（66.67±9.16）岁；文化程度：小学及以下65例，初中33例，高中16例，大专及以上8例。

2、方法

2.1、认知功能检测认知功能评测采用简易智力状态检查量表（Mini-mental State Examination，MMSE）评测，该量表包含时间定向力、地点定向力、即刻记忆力、注意及计算力、延迟记忆、结构模仿、视觉空间共7个方面，包含30个条目，采用李克特（Likert）2级评分法评测，回答正确得1分，回答错误得0分，计分越高提示认知功能越好，认知功能正常：27～30分；轻度认知功能障碍：21～26分；中度认知功能障碍：10～20分，重度认知功能障碍：＜10分［6］。评测方法：由经训练的心理咨询师采用该量表逐项对患者开展评测，量表评测总体耗时20～30 min。

2.2、血清Hcy、NSE及IL-2检测于发病后7～11 d抽取患者空腹静脉血9 ml，3 000 r/min，离心10 min，离心半径15 cm；采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测患者血清中Hcy、IL-2、NSE水平，仪器为雅培C8000全自动生化仪，试剂盒购于美国R&D Systems公司。

2.3、基线资料调查采用自制调查表调查，社会学资料包含年龄、性别、文化程度，文化程度分为小学及以下、初中、高中、大专及以上4个水平。病史包含高血压、高脂血症、糖尿病，高血压标准为收缩压≥140 mmHg或舒张压≥90 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa）和/或2周内服用降压药［7］；高脂血症：总胆固醇≥5.2 mmol/L或三酰甘油≥2.3 mmol/L［8］；糖尿病：典型糖尿病症状，伴随机血糖≥11.1 mmol/L或空腹血糖≥7.0 mmol/L或糖化血红蛋白（HbA1c）≥6.5%［9］；发病至认知功能评测时间：记录患者有起病症状（头痛、眩晕、乏力、黑矇、卷舌等）至认知功能评测时间。

3、统计学方法

散点分布图绘制采用GraphPad Prism 8软件，数据处理采用SPSS 22.0统计学软件，计数资料采用例（%）表示，采用χ2检验；符合正态分布的计量资料以均数±标准差（±s）表示，多组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用LSD法，Hcy、NSE、IL-2与MMSE评分采用Pearson相关性分析；采用线性回归模型分析MMSE评分的影响因子，剔除标准P≥0.10；以P＜0.05表示差异有统计学意义。

结 果

1、不同认知功能组患者的基线资料比较

122例缺血性脑卒中急性期患者于发病后7～11 d进行了认知功能评测，并分为认知功能正常组（65例）、轻度认知功能障碍组（33例）、中度认知功能障碍组（15例）、重度认知功能障碍组（9例）。4组患者的年龄、高脂血症、糖尿病比例方面比较差异均有统计学意义（均P＜0.05）。详见表1。

表1 不同认知功能组缺血性脑卒中急性期患者的基线资料比较

2、不同认知功能组患者的Hcy、NSE及IL-2水平比较

轻度认知功能障碍组、中度认知功能障碍组及重度认知功能障碍组的Hcy、NSE及IL-2水平均高于认知功能正常组（均P＜0.05）；重度认知功能障碍组的Hcy、NSE水平均高于轻度认知功能障碍组，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。详见表2。

表2 不同认知功能组缺血性脑卒中急性期患者血清指标水平比较（±s）

表2 不同认知功能组缺血性脑卒中急性期患者血清指标水平比较（±s）

注：认知功能正常为简易智力状态检查量表（MMSE）评分27～30分，轻度认知功能障碍为MMSE评分21～26分，中度认知功能障碍为MMSE评分10～20分，重度认知功能障碍为MMSE评分＜10分；与其他3组比较，aP＜0.05，与中度认知功能障碍组比较，bP＜0.05；与重度认知功能障碍组比较，cP＜0.05

组别认知功能正常组轻度认知功能障碍组中度认知功能障碍组重度认知功能障碍组F值P值例数65 33 15 9同型半胱氨酸（µmol/L）18.42±4.84a 23.33±5.17c 24.88±6.15c 29.49±8.64 19.678＜0.001神经元特异烯醇化酶（ng/L）21.79±5.76a 24.28±6.12a 28.97±7.83c 33.25±8.32 13.116＜0.001白细胞介素-2（ng/L）126.64±11.89a 140.96±16.10b 150.26±8.97 145.10±15.72 20.160＜0.001

3、Hcy、NSE及IL-2与认知功能的相关性分析

Pearson相关性分析显示，Hcy、NSE、IL-2与MMSE评分均呈显著负相关性，相关系数分别为-0.577、-0.549、-0.498，均P＜0.001。详见图1。

图1 122例缺血性脑卒中急性期患者Hcy（A）、NSE（B）、IL-2（C）水平与MMSE评分的散点分布图

4、缺血性脑卒中急性期患者MMSE评分影响因素的线性回归分析

以MMSE评分为因变量，年龄、Hcy、NSE、IL-2、高脂血症、糖尿病为自变量，行线性回归分析。年龄、Hcy、NSE、IL-2均是缺血性脑卒中急性期患者MMSE评分的影响因子（均P＜0.05）。详见表3。

表3 122例缺血性脑卒中急性期患者MMSE评分影响因素的线性回归分析

讨 论

Hcy、NSE高表达与脑血管疾病发生后的神经功能缺损有密切关联。Hcy是蛋氨酸与半胱氨酸的重要代谢中间产物，Hcy上升被证明与动脉粥样硬化、脑血管疾病发生密切相关。Anniwaer等［10］的研究发现，随Hcy水平的上升，原发性缺血性脑卒中患者的美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）评分明显下降。NSE是参与糖酵解途径的烯醇化酶中的一种，在神经组织与神经内分泌组织中含量较高，NSE在脑细胞活性最高，且由于分子量低的特点，脑卒中后NSE可经被破坏的神经细胞膜流动至血脑屏障，诱发脑细胞凋亡；有研究发现，脑卒中患者的NSE水平显著高于健康人群，NSE水平与患者的蒙特利尔认知评估表（MoCA）评分呈负相关性［11］。IL-2是炎性反应的调节介质，其参与了缺血性脑卒中患者的炎症反应与免疫应答进程，IL-2可部分性的介导肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、IL-6的分泌，而TNF-α、IL-6水平的上升，可诱发或加重脑卒中患者的认知功能下降［12］。

张颖等［13］对血管性痴呆患者的Hcy检测后发现，与健康体检人群比较，血管性痴呆患者的Hcy水平显著升高，Hcy与患者的MMSE评分呈负相关性，与NIHSS评分呈正相关性。研究发现，NSE与脑卒中抑郁障碍、神经功能缺损有关，而抑郁障碍、神经功能缺损被认为是认知功能降低的原因［14］。有研究发现，IL-1β、IL-6、IL-8分别与脑小血管病、帕金森、脑卒中患者的认知功能有关，IL-1β、IL-6、IL-8水平越高，患者的认知功能越差［15-17］。李国胜等［18］研究发现，脑小血管病患者血清Hcy、超敏C反应蛋白（hs-CRP）及IL-1与患者的MoCA量表各维度评分呈现显著的负相关性，高Hcy、炎症状态与脑血管病患者认知功能损伤有关。缺血性脑卒中急性期患者认知功能下降的确切机制尚未完全明确，本研究显示，轻度认知功能障碍组、中度认知功能障碍组及重度认知功能障碍组的Hcy、NSE及IL-2水平均显著高于认知功能正常组；重度认知功能障碍组的Hcy、NSE水平均显著高于轻度认知功能障碍组；Pearson相关性分析显示，Hcy、NSE、IL-2与MMSE评分均呈现显著的负相关性。说明缺血性脑卒中患者的认知功能与Hcy、NSE及IL-2密切相关，高水平的Hcy、NSE及IL-2预示了缺血性脑卒中急性期的低认知功能，这提示在缺血性脑卒中急性期管理中，调节患者的Hcy、NSE及IL-2水平，可能有助于改善其认知功能。

报道显示，脑卒中认知功能障碍除了已知的脑卒中后带来的神经功能缺损有关外，还与患者的基础疾病、脑梗死部位、不良饮食习惯等因素有关［19］。赵凤华等［20］对88例急性缺血性脑卒中后认知功能障碍的相关因素行logistic回归分析显示，高脂血症、高NIHSS评分、额颞叶梗死、Nod样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）炎症小体活化水平是脑卒中后认知功能障碍的危险性因子。一项大样本研究发现，受教育年限、高血压、高脂血症、房颤与Hcy是卒中后认知功能障碍的危险性因素［21］。本研究发现，年龄、Hcy、NSE、IL-2是缺血性脑卒中急性期患者MMSE评分的影响因子，年龄、Hcy、NSE、IL-2每上升1个单位，对应的MMSE评分将下降0.343、0.345、0.280、0.049分，进一步证实了Hcy、NSE、IL-2与缺血性脑卒中急性期认知功能损伤的关联。年龄作为缺血性脑卒中急性期认知功能损伤的危险性因子已被有关研究证实，与高龄带来的脏器官功能衰退，卒中后神经细胞大面积损伤、脑组织微灌注不足，引起的神经功能缺损加重有关［22］。高Hcy可经细胞毒性损害、血管内皮损伤、钙离子超载与活性氧释放带来的氧化应激损伤、炎性反应、动脉粥样硬化等途径导致认知功能下降；高NSE可直接引起神经细胞损伤、自由基损伤，引起认知功能降低；高IL-2可引起氧化应激损伤、血管内皮功能障碍、关键酶合成障碍、T淋巴细胞亚群异常等途径加重血管损伤，最终导致认知功能损伤［23］。

综上，缺血性脑卒中急性期患者认知功能损伤与Hcy、NSE、IL-2有密切关联，Hcy、NSE、IL-2与缺血性脑卒中急性期MMSE评分呈现显著的负相关；年龄、Hcy、NSE、IL-2是缺血性脑卒中MMSE评分的影响因子。

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