乙型肝炎肝硬化伴肺部感染患者分离株菌种及药敏分析

姚朝光 蓝婧 黄理 陈丽芬 覃冬林 黄洁婕 黄佳

乙型肝炎肝硬化患者存在不同程度免疫功能失调，更易发生肺部感染，可进一步加重免疫功能失调，增加肺性脑病发生风险，危及患者生命[1]。及时应用抗生素治疗是控制肺部感染的主要手段，但乙型肝炎肝硬化伴肺部感染患者病原菌分布较为复杂，增加了抗生素应用难度[2]。此外，滥用抗生素可刺激不敏感细菌生长，增加菌群紊乱风险，可能诱发新的感染[3]。本研究分析乙型肝炎肝硬化伴肺部感染患者分离株菌种及其药物敏感性，现将结果报道如下。

资料与方法

一、研究对象及纳入排除标准

分析2016—2020年河池市人民医院收治的123例乙型肝炎肝硬化伴肺部感染患者的临床资料，患者年龄32～91岁，平均67.00(57.00, 72.25)岁，男性76例，女性47例，住院时间为1～8 9d，平均13.50(8.00, 19.00)d。本研究符合伦理学有关规定。纳入标准：①符合乙型肝炎肝硬化[4]及肺部感染[5]的诊断标准，且经肝功能、肺部听诊、X线及痰液涂片等检查确诊；②患者有咳痰或发烧等症状；③资料完整。排除标准：①既往有全身性感染病史；②既往应用抗生素治疗；③合并其他肺部疾病；④处于昏迷状态。

二、方法

(一)采集标本 清晨，患者用生理盐水漱口，咳痰液至无菌瓶，密封储存。

(二)分离株菌种检测及药敏 应用上海立力申科学仪器有限公司提供的二氧化碳培养箱和平板，于血平板、沙氏平板和巧克力平板上接种培养痰液，分别置于普通培养箱和二氧化碳培养箱，35 ℃孵育24 h。应用梅里埃相关鉴定卡片和梅里埃全自动微生物鉴定及药敏分析系统VITEK-2 compact检测病原菌。药敏采用梅里埃相关药敏卡片GN13药敏卡片和配套质控菌株，选取药敏卡片均在有效期内，参照有关标准进行药敏试验及结果评估[6]。

(三)超广谱β-内酰胺酶(ESBL)及碳青霉烯酶评估 对大肠杆菌和肺炎克雷伯杆菌进行ESBL及碳青霉烯酶检测，仪器专家系统根据耐ESBL药物及耐碳青霉烯药物的情况进行综合判断。

三、评价指标

包括：①分析分离株菌种分布情况；②分析主要菌种的药敏情况；③分析分离菌株的ESBL状态。

四、统计学方法

采用SPSS 24.0进行统计分析。计量资料经Shapiro-Wilk正态性检验，偏态分布以中位数(四分位数间距)[M(P25，P75)]表示；计数资料以百分比表示。

结 果

一、分离株菌种分布情况

123例患者共分离出149株病原菌，其中60.40%为革兰阴性菌，38.26%为革兰阳性菌，1.34%为真菌，革兰阴性菌为主要病原菌。见表1。

表1 分离株菌种分布情况

二、革兰阴性主要分离株的敏感株数及敏感率

患者革兰阴性主要分离菌株对多种抗菌药物耐药。见表2。

表2 革兰阴性主要分离菌株的敏感株数及敏感率(n)

三、革兰阳性主要分离菌株的敏感株数及敏感率

患者革兰阳性主要分离菌株对多种抗菌药物耐药。见表3。

表3 革兰阳性主要分离菌株的敏感株数及敏感率(n)

四、革兰阴性分离菌株的ESBL及碳青霉烯酶状态

肺炎克雷伯菌及大肠杆菌菌株均有一定ESBL阳性率(>30%)，而碳青霉烯酶阳性率较低(<30%)。见表4。

表4 革兰阴性分离菌株的ESBL及碳青霉烯酶状态(n，%)

讨 论

大量研究证实，革兰阴性菌是肺部感染的主要致病菌[7-8]。本研究结果与既往研究一致。原因是革兰阴性菌存在于呼吸道、胆道及腹腔内，可经呼吸道传播，当患者机体免疫力降低时，革兰阴性菌可过量增殖，诱发肺部感染[9-10]。

本研究表明，患者革兰阳性和革兰阴性菌对多种抗菌药物耐药。肺炎克雷伯菌具有形成自身生物被膜的能力，可隔绝膜内细菌与所用抗菌药物，并借助AcrAB外排系统，外排抗菌药物，使抗菌药物难以发挥灭杀细菌效果[11]。大肠杆菌可发生由质粒介导的耐药，耐药基因发生突变选择或结合，产生耐药质粒，耐药质粒可产生同工酶和钝化酶，并降低细胞膜对抗菌药物的通透性，从而抑制抗菌药物发挥作用[12-13]。厄他培南、亚胺培南等对革兰阴性菌感染患者敏感率较高，可用于临床治疗。

金黄色葡萄球菌可经细菌胞膜产生青霉素结合蛋白，引起抗生素作用靶点改变，进而导致青霉素和头孢菌素等抗菌药物亲和力降低，杀菌能力减弱[14]。凝固酶阴性葡萄球菌可通过自身携带的基因影响生物被膜形成，发挥抗菌效果[15]。左氧氟沙星、万古霉素等对革兰阳性菌感染患者敏感率较高，可用于临床治疗。

肺炎克雷伯菌及大肠杆菌菌株均有一定ESBL阳性率(>30%)，而碳青霉烯酶阳性率较低(<30%)。ESBL可导致细菌对单环β-内酰胺类抗菌药产生耐药，ESBL阳性提示细菌对头孢曲松等抗菌药物耐药性较高，不应对患者使用单环β-内酰胺类抗菌药或第三代头孢菌素进行治疗，可应用碳青霉烯类抗菌药物[16]。

本研究未能分析患者多时点病原菌分布情况及药敏，结论存在局限性，未来还应定期评估患者病原菌分布情况，以在治疗期间及时调整患者抗菌药物。