血清人胎球蛋白A抗体在乳腺癌中的诊断及预后价值

张 盼, 方静雯, 徐文怡, 伍 敏, 任传利

(1. 江苏省苏北人民医院 检验科, 江苏 扬州, 225001;2. 江苏省中西医结合老年病防治重点实验室, 江苏 扬州, 225009; 3. 扬州大学医学院, 江苏 扬州, 225009)

早期乳腺癌症状不明显, 多数乳腺癌患者在就诊时已经发展至中晚期，严重威胁女性的健康和生命安全[1]。乳腺癌在发展中国家的病死率偏高[2]。因此，早期诊断是实现乳腺癌良好预后的基础。癌症患者的血清中含有肿瘤相关抗原产生的自身抗体[3]。通常在癌症进展之前，血清自身抗体水平升高[4]。因此，血清自身抗体已被提出作为癌症早期诊断的理想生物标志物[5]。胎球蛋白A(AHSG)是AHSG基因的产物，作为一种多功能糖蛋白，在糖尿病、肾病和癌症中发挥重要作用[6]。AHSG抗体在乳腺癌患者血清中高水平表达，其在乳腺癌中的诊断价值值得关注。临床常用于诊断和监测乳腺癌的肿瘤标志物包括血清糖类抗原153(CA153)和癌胚抗原(CEA)。本研究分析血清中AHSG抗体水平的变化，并与CA153、CEA比较，探讨3种指标单项或联合检测对早期乳腺癌诊断及预后的价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2018年3月—2019年12月苏北人民医院收治的101例女性乳腺癌患者为乳腺癌组，经影像学检查和病理学检查确诊，年龄21～72岁，中位年龄52岁；主要病理类型: 浸润性导管癌72例，浸润性小叶癌23例，其他类型6例；采用2017年美国癌症联合委员会癌症分期手册进行分期[7], 其中Ⅰ期45例, Ⅱ期56例; 32例乳腺癌患者对应的术后标本为术后5～7 d的血清。选取同期确诊乳腺良性疾病的女性患者50例为良性疾病组，年龄22～71岁，中位年龄50岁，其中乳腺纤维腺瘤27例、导管内乳头状腺瘤13例、脂肪瘤5例、其他良性疾病5例。选取同期体检健康的女性50例为对照组，年龄21～70 岁，中位年龄50岁。3组一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05), 具有可比性。

乳腺癌组纳入标准: 手术前2周内收集血标本者; 确诊之前未经任何相关治疗者; 早期(Ⅰ期+Ⅱ期)乳腺癌患者。排除标准: 临床资料不完整者; 合并严重心、脑、血管疾病和其他恶性肿瘤者; 男性乳腺癌患者。良性疾病组纳入标准: 病理诊断结果为乳腺增生、乳腺纤维腺瘤、导管内乳头状瘤者。对照组纳入标准: 乳腺彩超、乳腺钼靶射片、腹部彩超、胸片、电解质、肝肾功能等无特殊异常者; 既往无恶性肿瘤病史患者; 无免疫系统疾病及糖尿病病史患者; 否认半年来有激素药物使用史患者。本研究经苏北人民医院伦理委员会评审通过，所有研究对象均签署知情同意书。

1.2 方法

所有研究对象均采集空腹静脉血4 mL, 3 000转/min离心10 min, 分离血清。采用酶联免疫吸附试验检测AHSG抗体，试剂盒由优尔生生物试剂公司生产。采用德国罗氏诊断有限公司E601电化学发光仪及配套试剂检测血清CA153和CEA。3种指标理论阈值分别为4.9 ng/mL(CEA)、35 U/mL(CA153)、42.68 ng/mL(AHSG抗体)。

1.3 观察指标

比较3组患者血清AHSG抗体、CEA、CA153水平; 比较Ⅰ期、Ⅱ期乳腺癌患者血清AHSG抗体、CEA、CA153水平。评估AHSG抗体、CEA、CA153单项检测及联合检测对早期乳腺癌的诊断效能。

1.4 统计学分析

采用SPSS 19.0软件进行数据统计分析。不符合正态分布的计量资料以[M(P25,P75)]表示。计量资料组间比较采用非参数Mann-Whitney检验，配对样本比较采用配对t检验。采用受试者工作特性(ROC)曲线评估CEA、CA153、AHSG抗体检测对早期乳腺癌的诊断价值。P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 3组血清AHSG抗体、CEA、CA153水平

乳腺癌组血清AHSG抗体、CEA、CA153水平高于良性疾病组和对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。良性疾病组血清AHSG抗体、CEA水平与对照组比较，差异无统计学意义(P>0.05)。良性疾病组血清CA153水平高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 3组血清AHSG抗体、CEA、CA153水平比较[M(P25, P75)]

2.2 Ⅰ期、Ⅱ期乳腺癌患者血清AHSG抗体、CEA、CA153水平

Ⅱ期乳腺癌患者血清AHSG抗体、CEA、CA153水平高于Ⅰ期，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 不同分期乳腺癌患者血清AHSG抗体、CEA、CA153水平比较[M(P25, P75)]

2.3 ROC曲线分析

在早期乳腺癌诊断中，采用单项检测时, AHSG抗体的曲线下面积(AUC)为0.896(95%CI为0.854～0.938), 灵敏度为80.2%, 特异度为85.0%, 阳性预测值为85.4%, 阴性预测值为81.9%, 准确度达83.6%, 优于CA153和CEA; 3项联合检测的各项诊断指标均高于单项检测，其AUC为0.934(95%CI为0.903～0.965), 灵敏度为84.2%, 特异度为90.0%, 阳性预测值为90.4%, 阴性预测值为85.1%, 准确度达87.6%。见图1和表3。

图1 单项和联合检测在早期乳腺癌诊断中的ROC曲线

表3 血清AHSG抗体、CEA、CA153的诊断效能

2.4 手术前后血清AHSG抗体、CEA、CA153水平

乳腺癌患者手术后血清AHSG抗体、CEA、CA153水平低于术前，差异有统计学意义(P<0.05)。见表4。

表4 乳腺癌患者手术前后血清AHSG抗体、CEA、CA153水平比较[M(P25, P75)]

3 讨 论

乳腺癌是全球女性最常见恶性肿瘤之一，也是癌症相关死亡的主要原因[8-9]。准确、早期、无创的恶性病变检测是影响癌症患者治疗和预后的重要因素。乳腺癌诊断率的提高将大幅提高患者生存率，降低病死率。血清肿瘤标志物的检测具有简便快捷、创伤小等优势[10]。CEA和CA153是检测乳腺癌比较常见的肿瘤标志物，已被广泛应用于乳腺癌的诊断、治疗和预后监测[11-12]。寻找早期诊断、预测预后的新生物标志物是改善乳腺癌患者生存质量的必要条件[13]。

由于在血清中的特异性和稳定性，针对肿瘤相关抗原产生的自身抗体是一种极有潜力的生物标记物[14]。研究[15]发现，血清真核翻译起始因子3亚基A(EIF3A)自身抗体是有助肝癌诊断的生物标志物，单项检测灵敏度为79.4%, 特异度为83.5%,AUC高达0.87, 且与其他生物标志物联合检测可提高肝癌诊断的准确性。高迁移率族蛋白B3(HMGB3)自身抗体可作为早期肺癌潜在的血清学生物标志物，单项检测AUC为0.85, 与其他蛋白标记物(CEA、CA125)结合检测有助于早期肺癌诊断[3]。TOPO48抗体在早期结直肠患者血清中阳性率较高，并且TOPO48抗体阳性的结直肠癌患者总生存率较高。因此, TOPO48抗体可作为结直肠癌早期诊断和预后良好的潜在生物标志物[16]。AHSG主要由成年人的肝脏合成，分泌于血液中，其浓度从0.2 mg/mL到0.8 mg/mL[6]。AHSG参与调节人体多种生理或者病理变化过程，如大脑发育、骨代谢、胰岛素抵抗、结直肠癌迁移和侵袭等[17]。此外，血清AHSG检测可用于乳腺癌和胃癌等肿瘤诊断，是一种潜在的肿瘤标志物[18]。

目前，有关血清AHSG抗体与肿瘤的研究报道较少。肝细胞癌患者血清中包括AHSG自身抗体在内的5种自身抗体的阳性率高于慢性肝炎和正常人血清[19]。相关研究[20]检测并比较了包括AHSG抗体在内的9种自身抗体在卵巢癌患者和正常人血清中的变化，佐证自身抗体的检测是肿瘤诊断的有力手段。一项研究[21]利用免疫蛋白质组学方法发现，在91.7%乳腺癌患者中能检测到AHSG抗体, AHSG抗体检测灵敏度高达91.7%。研究[22]采用蛋白质印迹法分析发现，在79.0%乳腺癌患者中能检测到AHSG抗体，检测灵敏度为79.0%。上述研究提示乳腺癌患者血清中AHSG抗体可作为早期乳腺癌筛查的血清生物标志物。本项研究利用酶联免疫吸附试验检测发现，在85.4%乳腺癌患者中检测到AHSG抗体，灵敏度为80.2%。本研究与其他研究结果不同的原因可能在于检测方法和检测人群具有差异。

本研究发现，乳腺癌组血清AHSG抗体水平显著高于良性疾病组和对照组, Ⅱ期乳腺癌患者血清AHSG抗体水平显著高于Ⅰ期，表明AHSG抗体检测在早期乳腺癌诊断中具有潜力。此外，本研究利用灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值和AUC等参数评估AHSG抗体检测对早期乳腺癌的诊断效能。单项检测中, AHSG抗体检测上述各指标参数优于CA153和CEA。由于单一标志物在乳腺癌诊断中的效果往往不具备临床诊断作用，故将CEA、CA153和AHSG抗体进行联合检测应用于乳腺癌的诊断。3项联合检测各诊断指标均达到最优，具有较高的临床应用价值。早期乳腺癌的治疗以手术为主。因此本研究检测手术前后患者血清中AHSG抗体水平变化，术后AHSG抗体水平较术前呈显著降低趋势，表明AHSG抗体可应用于乳腺癌患者的术后疗效监测。与既往研究[23]一致，本研究中CEA和CA153表达水平在乳腺癌患者血清中升高。同时，在早期乳腺癌诊断中，其AUC值较低，均小于0.8, 也佐证了CEA和CA153对早期乳腺癌的诊断效能较低。LIAN M J等[24]研究表明，在乳腺癌Ⅰ期、Ⅱ期患者血清中, CEA表达水平无显著差异，与本研究结果不一致。分析原因可能与本研究中使用的仪器型号、试剂类型、检测原理、定标液批号等差异有关; 此外，还与纳入的人群有关，本研究仅纳入早期乳腺癌患者(Ⅰ期、Ⅱ期)，而LIAN M J等研究纳入了Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期乳腺癌患者。

综上所述, AHSG抗体在早期乳腺癌的诊断和预后方面具有较大优势，提示 AHSG抗体可能成为乳腺癌筛选和预后监测的一种重要生物标志物。同时，本研究采用 CEA、CA153 和AHSG抗体联合检测，建立了一个应用于早期乳腺癌诊断的肿瘤标志物群，提高了诊断性能，具有较高的临床应用价值。但AHSG抗体是否可作为乳腺癌诊断的特异性指标，仍需进一步深入研究。