带状疱疹患者Treg/Th17与病情严重程度、后遗神经痛持续时间的相关性研究*

葛金芳，顾雪芹，薛文杰，严翘

（1.南通市第二人民医院 皮肤科，江苏 南通 226000；2.东南大学附属中大医院皮肤科，江苏 南京 210009）

带状疱疹年发病率为3‰～5‰[1]，年住院率为2/10 万～25/10 万[2]。后遗神经痛是带状疱疹常见的一种并发症，急性期带状疱疹治愈后仍存在疼痛，可持续数月甚至数年，严重影响患者生活质量。早期有效诊断带状疱疹患者病情，指导临床开展诊疗措施，对避免严重或长期后遗神经痛意义重大。目前临床缺乏早期有效诊断带状疱疹患者病情严重程度、预测后遗神经痛持续时间的客观生化指标，关于带状疱疹患者病情严重程度目前多依据神经疼痛、皮损状况等进行评估[3]，具有一定主观性；并且目前国内尚未见与带状疱疹患者后遗神经痛持续时间相关的报道，因此探寻客观、安全、高效的生物学标志物成为目前研究的重点。

近期研究显示，细胞免疫紊乱、免疫异常抑制与带状疱疹及带状疱疹后遗神经痛相关[4-5]，Treg/Th17 细胞失衡可能参与带状疱疹及带状疱疹后遗神经痛的发病[6-7]。Treg 细胞是发挥免疫负调节功能的主要T 淋巴细胞亚群，Th17 细胞是介导人体炎症反应的主要T 细胞亚群。笔者认为Treg/Th17 细胞失衡可能与带状疱疹患者病情严重程度及后遗神经痛持续时间有关，但国内尚未见相关报道。目前国内多侧重报道细胞因子与带状疱疹后遗神经痛发生的关系[8-9]。明确Treg/Th17 细胞失衡与带状疱疹患者病情严重程度及后遗神经痛持续时间的关系，可提升临床诊断带状疱疹患者病情的准确性，尽早开展对症或预防性治疗方案，避免严重或长期后遗神经痛，改善患者预后。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2019年8月—2020年8月南通市第二人民医院收治的126 例带状疱疹患者为研究对象。其中，男性69 例，女性57 例；年龄35～80 岁，平均（60.25±8.98）岁。本研究经医院医学伦理委员会批准，患者及家属均自愿签署知情同意书。

1.2 纳入、排除及剔除标准

1.2.1 纳入标准①符合《带状疱疹中国专家共识》[10]带状疱疹诊断标准；②入院时处于急性期，发病时间≤7 d；③年龄＞18 岁。

1.2.2 排除标准①近3 个月内行抗病毒治疗；②长期使用糖皮质激素、免疫抑制剂、免疫增强剂等药物；③伴有精神性疾病、认知功能障碍；④心、肝、肾等重要脏器功能障碍；⑤伴有严重免疫缺陷、传染性疾病、血液系统疾病恶性肿瘤等疾病；⑥妊娠、哺乳期女性；⑦近期有急性感染。

1.2.3 剔除标准①依从性差；②家属要求终止或退出；③自然失访。

1.3 方法

1.3.1 资料收集收集所有患者基本资料及治疗前生物化学指标，包括性别、年龄、体质量指数（body mass index,BMI）、基础疾病、病程、白细胞（white blood cell,WBC）、血小板（Platelets,PLT）、中性粒细胞比、白蛋白（Albumin,ALb）、血红蛋白（Hemoglobin,Hb），血清谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT）、谷草转氨酶（aspartate aminotransferase,AST）、总胆红素、超敏C反应蛋白（high sensitivity C-reactive protein,hs-CRP）、白细胞介素6（Interleukin-22,IL-22）、IL-17、IL-37，血浆S100β 蛋白、神经元特异性烯醇化酶（neuron specific enolase,NSE）、免疫球蛋白（IgG、IgM、IgA），外周血Treg（CD4+CD25+Foxp3+）、Th17（CD4+IL-17+）。

1.3.2 外周血Treg、Th17 测定方法所有患者治疗前抽取静脉血3 mL，采用流式细胞仪（美国贝克曼库尔特公司FACSCalibur 型）、碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶法试剂盒（美国Sigma 公司）检测外周血Treg、Th17 细胞百分比，计算Treg/Th17 比值。

1.3.3 病情严重程度判断方法采用Linker-5 级评分法[11]，根据患者入院时水疱数目、簇数、水疱变化、红斑面积、疼痛等症状进行病情严重程度评分。每个项目0～4分，满分20 分；总分＜6分为轻度，6～12 分为中度，＞12 分为重度。

1.3.4 后遗神经痛持续时间判断方法自患者入院治疗首日起，以门诊、电话随访等方式随访12 个月，统计所有患者后遗神经痛持续时间（自本院诊断为带状疱疹疼痛开始的日期至未使用任何止痛药物且疼痛消失的日期）。

1.4 统计学方法

数据分析采用SPSS 18.0 统计软件。计量资料以均数±标准差（±s）表示，比较采用t检验或方差分析，进一步两两比较用LSD-t检验；计数资料以构成比或率（%）表示，比较用χ2检验；相关分析用Pearson 法；绘制ROC 曲线；影响因素的分析用多因素Logistic 回归模型。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同病情严重程度带状疱疹患者Treg、Th17比较

126 例带状疱疹患者中，轻度21 例（16.67%），中度73 例（57.94%），重度32 例（25.40%）。

轻、中、重度组患者Treg、Th17、Treg/Th17 比较，经方差分析，差异有统计学意义（F=75.978、78.360和118.871，均P=0.000）。进一步两两比较结果：轻度组Treg、Treg/Th17 均高于中、重度组（P＜0.05），Th17 低于中、重度组（P＜0.05）；中度组Treg、Treg/Th17 高于重度组（P＜0.05），Th17 低于重度组（P＜0.05）。见表1。

表1 不同严重程度带状疱疹患者Treg、Th17比较 （±s）

表1 不同严重程度带状疱疹患者Treg、Th17比较 （±s）

注：①与轻度组比较，P＜0.05；②与中度组比较，P＜0.05。

组别轻度组中度组重度组F 值P 值Treg/Th17 11.02±2.14 7.69±1.23 5.15±0.92 118.871 0.000 n 21 73 32 Treg/%5.03±0.92 3.91±0.61①2.89±0.36①②75.978 0.000 Th17/%0.32±0.05 0.45±0.08①0.61±0.11①②78.360 0.000

2.2 轻中度组与重度组患者临床资料比较

轻中度组与重度组患者性别、年龄、BMI、基础疾病（高血压、糖尿病、高脂血症）、病程、WBC、PLT、中性粒细胞百分比、ALb、Hb、ALT、AST、总胆红素、IL-37、IL-22、NSE、IgG、IgA、IgM 比较，经t或χ2检验，差异均无统计学意义（P＞0.05）。

轻中度组与重度组患者IL-17、S100β、hs-CRP、Treg、Th17、Treg/Th17 比较，差异有统计学意义（P＜0.05），重度组IL-17、S100β、hs-CRP、Th17高于轻中度组（P＜0.05），Treg、Treg/Th17低于轻中度组。见表2。

表2 轻中度组与重度组患者临床资料比较

2.3 影响带状疱疹患者病情严重程度的多因素Logistic回归分析

以带状疱疹患者病情严重程度为因变量（轻中度=0，重度=1），hs-CRP、IL-17、S100β、Th17、Treg、Treg/Th17 为自变量（自变量赋值为连续变量），进行多因素Logistic 回归分析，结果显示：Th17 [=3.916（95%CI：1.611，9.516）]、Treg/Th17[=4.289（95%CI：1.765，10.423）]是影响带状疱疹患者病情严重程度的独立因素（P＜0.05）。见表3。

表3 影响带状疱疹患者病情严重程度的Logistic回归分析参数

2.4 Treg/Th17 对带状疱疹患者病情严重程度的诊断价值

ROC 曲线结果显示，Treg/Th17 诊断带状疱疹患者重度病情最佳截断值为6.85，其敏感性为75.00%（95% CI：0.112，0.277）、特异性为81.91%（95% CI：0.121，0.438）、曲线下面积（area under curve,AUC）为0.775（95%CI：0.678，0.872）。见图1。

图1 Treg/Th17诊断带状疱疹患者重度病情的ROC曲线

2.5 不同病情严重程度带状疱疹患者后遗神经痛持续时间

截止随访结束，126 例带状疱疹患者中有2 例轻度患者失访，剩余124 例患者后遗神经痛持续时间为1～13 个月，平均（3.54±0.62）个月。

轻、中、重度组患者后遗神经痛持续时间分别为（1.97±0.25）个月、（2.11±0.29）个月、（7.72±1.26）个月，经方差分析，差异有统计学意义（F=827.012，P=0.000）。进一步两两比较结果：重度组后遗神经痛持续时间长于轻、中度组（P＜0.05），轻、中度组后遗神经痛持续时间比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。

2.6 带状疱疹患者Treg/Th17 与后遗神经痛持续时间的相关性

124 例带状疱疹患者Treg/Th17 为（7.54±1.01），后遗神经痛持续时间为（3.54±0.62）个月，经Pearson相关性分析，带状疱疹患者Treg/Th17 与后遗神经痛持续时间呈负相关（r=-0.716，P=0.000）。

3 讨论

带状疱疹是由颅神经或背根神经节中潜伏的水痘带状疱疹病毒激活，病毒沿感觉神经传播到皮节引起的皮肤病，常出现在年龄较大、免疫抑制或免疫缺陷人群中。目前对带状疱疹病毒的免疫反应细节尚不清楚，但各种细胞因子可能参与了免疫反应。国内外研究显示，带状疱疹患者重新激活的神经节中有大量浸润性CD4+T 细胞和溶解性CD8+T 细胞，带状疱疹病毒能够感染未成熟及成熟的树突状细胞[12-13]。

本研究结果提示带状疱疹患者Treg/Th17 与病情严重程度有关。多因素Logistic 回归分析结果显示，Th17、Treg/Th17 是影响带状疱疹患者病情严重程度的独立因素，再次印证了带状疱疹患者Treg/Th17 与病情严重程度有关，提示Treg/Th17 可作为带状疱疹患者病情严重程度的指标。Treg 细胞可免疫抑制CD4+T 细胞亚群活性，通过抑制T 细胞及抗原呈递细胞功能，上调抑制性免疫细胞表面分子表达，下调活化T 细胞相关基因表达，具有免疫调节、维持免疫耐受的重要作用，对预防自身免疫性疾病的发生意义重大。Th17 细胞可通过产生IL-17 等炎症细胞因子，介导人体中性粒细胞活化过程，促进炎症反应，参与多种自身免疫性疾病的发生。Treg、Th17 细胞功能拮抗及Treg/Th17维持动态平衡对人体免疫防御、免疫稳定维护具有重要价值，人体发生带状疱疹病毒感染及带状疱疹病毒感染引起的破坏性炎症浸润时，免疫系统激活，产生IL-17 等因子，促进Th17 细胞增殖、分化，诱导炎症反应，并抑制Treg 细胞生成，Treg/Th17 平衡向Th17 细胞移动，过度抑制宿主抗带状疱疹病毒免疫反应，促进带状疱疹病毒的持久性和疾病进展。ROC 曲线结果显示，Treg/Th17 诊断带状疱疹患者重度病情的敏感性、特异性、AUC分别为75.00%、81.91%、0.775，提示Treg/Th17 诊断带状疱疹患者病情严重程度效能良好。

陈晓彤等[14]研究显示，老年带状疱疹后遗神经痛患者Th17/Treg 平衡失调，与带状疱疹后遗神经痛的发病机制有关。GERADA 等[15]的研究也显示，T 淋巴细胞参与带状疱疹及后遗神经痛的发病。本研究结果提示，带状疱疹患者后遗神经痛持续时间与病情严重程度有关，而带状疱疹患者病情严重程度又与Treg/Th17 有关，推测可能带状疱疹患者Treg/Th17 与后遗神经痛持续时间有关。Pearson相关性分析结果表明，带状疱疹患者Treg/Th17 与后遗神经痛持续时间呈负相关，提示带状疱疹患者Treg/Th17 可作为评估其后遗神经痛持续时间的指标。Treg/Th17 降低的患者病情相对较重，患者体内由于Treg（CD4+CD25+Foxp3+）降低、Th17（CD4+IL-17+）升高，免疫抑制功能增强，引起特异性细胞免疫，抗病毒免疫反应减弱，后遗神经痛持续时间长，但目前关于带状疱疹患者后遗神经痛时T 淋巴细胞亚群间如何相互作用尚不清楚，可作为下一步研究重点。

综上所述，带状疱疹患者Treg/Th17 与病情严重程度及后遗神经痛持续时间有关，Treg/Th17 诊断带状疱疹患者病情严重程度效能良好，可作为评估后遗神经痛持续时间的指标。临床上需对Treg/Th17 过低者进行严格监测，通过早期强化治疗避免病情进展及后遗神经痛持续时间过长。