PCR检验法和细菌培养法在阴道细菌检验中的效果对比

罗晓夏

(北大医疗鲁中医院 山东 淄博 255400)

前言:

正常情况下，女性的阴道内存在一定的细菌，这些细菌相互作用、相互制约，处于一个相对稳定的动态平衡状态[1]。但是，在阴道组织受到一定外界细菌入侵的时候，便会出现一定的平衡失调问题，导致各种细菌性阴道疾病的出现，甚至引发腹部感染和盆腔感染等严重后果。为此，临床上针对此类患者，需要及时的进行必要的诊断，积极进行阴道细菌检验，并结合检验结果实施针对性的治疗，以改善预后。目前，临床上在进行阴道细菌检验的时候，可以选用的检验方法有多种不同的类型[2]。不同检验方法存在一定的差异，为获得更为理想的检验效果，有必要对不同类型检验方法的临床效果进行对比分析。此次研究选择100例在本院接受阴道分泌物标本采集，并行阴道细菌检验的患者资料进行观察和分析，观察并比较阴道细菌检验中PCR检验法和细菌培养法的检验效果。现将研究详情整理报道如下。

1 一般资料与方法

1.1一般资料

选择100例2020年10月-2021年10月期间在本院就诊的患者进行观察，所有患者均接受阴道分泌物标本采集，并行阴道细菌检验的患者资料进行观察和分析。入组患者中年龄最小者20岁，最大者55岁，平均年龄为(35.25±1.15)岁。通过临床及检验后确诊，100例患者中涉及到肠球菌、加特纳菌、棒状杆菌分别有40例、37例、23例。入院后对所有患者均采集阴道分泌物标本送检，分别应用PCR检验法和细菌培养法进行阴道细菌检验。

1.2纳入标准与排除标准

1.2.1纳入标准

(1)育龄期女性；(2)可收集到完整临床资料的患者；(3)存在阴道炎症、私处异味、私处瘙痒、白带增多等症状的患者；(4)入组前已经经工作人员解释说明，了解本次研究方案的具体内容，并签署同意书表示愿意配合研究的患者。

1.2.2排除标准

(1)处于妊娠期的女性；(2)处于哺乳期的女性；(3)处于生理期的女性；(4)三天内存在性生活史者；(5)1 个月内存在阴道局部用药史者。

1.3检验方法

1.3.1标本采集

采集所有患者的阴道分泌物，具体方法为，将医用无菌棉签插入到患者的阴道后穹隆位置，对棉签进行轻柔的旋转，蘸取适量阴道分泌物后，将棉签放置于2ml 无菌生理盐水中进行储存，送往医院检验科进行阴道细菌检验。

1.3.2检验用品与设备

检验过程中需要使用阴道琼脂培养基以及二氧化碳恒温箱等用品和设备，相应的用品、设备与提供厂家情况如表1所示：

表1 检验相关用品、设备与提供厂家情况汇总

1.3.3细菌培养法检验

将采集所得的患者阴道分泌液标本接种在阴道琼脂培养基中，并将其转移到二氧化碳恒温箱中进行培养，连续培养时间为2天。观察培养情况，如果培养基形成菌落后，对菌落进行筛选，选择其中呈灰色、半透明状、光滑的菌群，对其利用生化仪实施生化鉴定。统计其中阳性的细菌数，统计阳性率。

1.3.4PCR 检验法检验

对含有患者阴道分泌液的生理盐水实施离心处理，离心速度设置为每分钟12000r，离心时间为15分钟。离心处理完毕后，对上清液予以清除，收集沉淀物。将适量碱性裂解液添加到沉淀物中，并对其实施水浴处理。水浴处理过程中温度保持为55℃，水浴时间控制在15分钟。水浴操作完毕，再次进行离心处理，离心速度设置为每分钟12000r，离心时间为10分钟。离心处理完毕后，采集适量上清液，制作DNA 模板。利用荧光PCR 仪进行循环处理，获得检验结果。

1.4观察指标

比较不同检验方法下的细菌阳性检出率，并比较不同检验方法在不同细菌类型方面的检出效果。其中，细菌培养法的阳性检出判断标准为：培养基中长出典型菌落，并经生化仪鉴定为相应的细菌类型。PCR 检验法的阳性检出判断标准为：经检验观察到存在1mm 以内的条带宽度，条带边缘整齐，无药斑和引物二聚体的背景。统计不同检验方法下的细菌检出阳性总例数，计算出总的阳性检出率。并对不同类型细菌的阳性检出情况进行统计，比较相应的检出率。

1.5统计学处理

完整收集不同检验方法下的引导细菌阳性检出情况，计算出总阳性检出率，以及不同类型细菌的检出情况，相应的检出率均以百分比形式表示，均导入到SPSS 19.0 统计学软件实施统计学处理,数据组间差异的统计学比较检验均采用X2检验，检验后证实数据之间的差异存在统计学意义的标准均为P小于0.05。

2 结果

2.1不同检验方法在阴道细菌检验中的效果比较分析

统计并比较两组细菌阳性检出率，可得观察组 高于对比组，且检验后证实差异有统计学意义，(P<0.05)。统计结果见表2：

表2 不同检验方法在阴道细菌检验中的阳性检出率统计比较

2.2不同检验方法在阴道细菌分布情况方面的检验效果对比分析

比较不同检验方法在阴道细菌分布情况方面的检验效果，可得观察组的肠球菌检出率高于对比组，但组间比较数据差异，无统计学意义，(P>0.05)，统计并比较两组棒状杆菌与加特纳菌检出情况，可得观察组检出率均高于对比组，且经检验差异存在统计学意义，(均P<0.05)。统计结果见表3：

表3 不同检验方法在阴道细菌分布情况方面的检验效果对比分析(例，%)

3 讨论

女性的阴道中存在一定数量和不同类型的细菌，在常规情况下，这些细菌在女性阴道中会处于一个相对稳定和平衡的状态，对女性的健康无影响[3-4]。但是，受到一定因素的影响，女性阴道中的细菌会出现菌群失衡的情况，导致一定阴道炎疾病的出现。阴道疾病的出现会导致阴道炎症、私处异味、私处瘙痒、白带增多等症状等多种症状的出现，影响到女性的身体健康状况，也带给患者极大的心理痛苦[5]。因此，针对存在一定症状的患者，应及时对其实施必要的阴道细菌检验，并根据检验结果制定针对性的治疗方案，以尽快解决女性的身心痛苦。

阴道分泌物检查是评价女性泌尿生殖道健康水平的重要指标，阴道细菌检验中，通过采集患者的阴道分泌物进行检查，可以较为直观的掌握患者阴道内炎症的感染情况，对其阴道内菌体失调情况等进行分析，进而制定合理的治疗方案[6-7]。在进行阴道细菌检验的时候，可以选择采用不同的检验方法[8]。目前PCR 检验法、细菌培养法是应用较多的检验方法，但关于不同检验方法的临床应用效果，以往的对照研究还不够丰富。为此，此次研究选择对上述两种检验方法的应用效果进行对比分析。经本组对比研究发现，统计并比较两组细菌阳性检出率，可得观察组的阳性检出率为91.00%(91/100)，高于对比组的75.00%(75/100)，且检验后证实差异有统计学意义。通过比较不同检验方法在阴道细菌分布情况方面的检验效果发现，观察组的肠球菌检出率为36.00%(36/100)，高于对比组的35.00%(35/100)，组间比较数据差异无统计学意义，统计并比较两组棒状杆菌与加特纳菌检出情况，可得观察组的检出率分别为21.00%(21/100)和34.00%(34/100)，均高于对比组的12.00%(12/100)和28.00%(28/100)，且经检验差异存在统计学意义。以往王太林等学者的研究指出[9]，与细菌培养法相比较，在阴道细菌检测中应用PCR检验法可以获得更高的阳性检出率。此次研究与其研究结果基本一致。通过上述结果可以发现，在阴道细菌检验中，应用PCR检验法进行检验可以获得更为理想的检验效果，整体检验效果优于细菌培养法。其中应用的细菌培养法是一种较为常见的检验方法，以往在临床检验中得到了十分广泛的应用。但是，细菌培养法进行细菌检验的过程中，整个检验的步骤较为复杂，繁琐，操作时间较长，对检验时的外界环境条件的要求也相对较高。因此，整个检验的效率偏低，且极易受到外界环境的影响，出现检出率偏低等问题。为了获得精确的检验结果，有时还需要多次进行细菌培养检验，消耗的时间较多。PCR 检验法是一种新型的检验方法，简便、快速、敏感性高，特异性强。具备PCR 的敏感性、DNA 杂交特异性等优势，该方法可以应用一定的荧光定量检测技术来获得检验结果，因此阳性检出率相对较高[10]。

综上所述，阴道细菌检验中可以应用不同的检验方法。通过本次研究发现，应用PCR检验法可以获得较为理想的检验效果，细菌阳性检出率较高，且对不同类型细菌的检查效果更为理。整体检验效果优于细菌培养法，故值得临床广泛应用及推广。