痰液性状和保存条件对结核菌培养阳性率的影响

于 杰

(吉林省吉林市龙潭区结核病防治所 吉林 吉林 132000)

近年来随着结核病治疗投入不断强化，使结核病发病率呈现下降趋势，但是在数量上依然具有较高的发病率，而早期对结核病实施诊断较为重要，能利于结核病患者后期治疗，目前临床对于结核病一般以结核菌培养作为诊断的“金标准”[1]，该种诊断方式的诊断准确性较高，能够为后续的诊断和治疗工作提供重要的参考依据；通过对患者开展结核菌培养，能够明确诊断患者的病情，尤其对于通过涂片检查，结果提示阴性患者的肺结核患者来说，通过开展结核菌分离培养试验，能够明确疾病，并且能够满足患者诊断需求，为疾病的治疗和诊断均提供重要信息，还能够利于早期发现疾病、早期清除传染源。但在临床实际工作中，多数患者的检验结果仍呈现阴性，而研究认为，主要和患者的痰液性状、保存条件等方面存在一定关联[2-3]。本文探究痰液性状和保存条件对结核菌培养阳性率的影响，见下文。

1 资料与方法

1.1基线资料

将痰液检验患者400例作为此次研究的主要对象，抽取患者痰液样本400份，根据不同性状分为黏液痰、干酪痰、唾液、血性痰四种性状，每个性状100份，采用不同的温度进行保存，例如-18摄氏度、4摄氏度、25摄氏度、30摄氏度，研究均在2020年1月至2020年12月期间完成。纳入标准：所有患者签署知情同意书；(2)临床资料完整。排除标准：临床资料不完整。

黏液痰患者中男性60例、女性40例，年龄21～60岁，平均值(40.52±2.56)岁；干酪痰患者中男性61例、女性39例，年龄21～61岁，平均值(40.82±2.71)岁；唾液患者中男性62例、女性38例，年龄21～62岁，平均值(40.75±2.01)岁；血性痰患者中男性63例、女性37例，年龄21～63岁，平均值(40.96±2.45)岁。以上四组在上述基线资料的比较中，差异无统计学意义，(P>0.05)。

1.2方法

患者的痰液性状一共包括四种，即①黏液痰、②干酪痰、③唾液、④血性痰，每种性状各100份样本，而患者的保存条件也包括四种，即分为-18摄氏度、4摄氏度、25摄氏度、30摄氏度四种，保存时间分别为0d、3d、7d、14d、21d，对上述痰液样本的细菌涂片结果进行分析和比较，以明确痰液性状和保存条件对于标本的影响。

痰结核菌培养方法：痰结核菌分离培养采用氢氧化钠碱进实验进行，浓度为4%，样本的培养需在接种酸性罗氏培养基之前，于37℃温度下孵育，时间为8周，再得出相关结果。而对于不同保存条件的标本，其实验方法包括：不同样本需要在不同环境下进行培养，再选择痰结核菌进行分离培养实验，从而得出结果。

1.3观察指标

分析不同性状痰液阳性培养率、不同温度不同时间下的阳性培养率。

1.4统计学方法

2 结果

2.1阳性培养率的对比

在黏液痰40例阳性标本、干酪痰84例阳性标本、唾液7例阳性标本、血性痰24例阳性标本，其中以干酪痰所占比较高，和其他三组比较，具有显著差异(P<0.05)。如表1:

表1 阳性培养率的对比(n；%)

2.2不同温度不同时间下的阳性培养率的对比

在零下18摄氏度的温度下保存，不同时间段受检者的不同性质痰液(黏液痰、干酪痰、唾液、血性痰)的阳性培养率进行比较，差异无统计学意义(P>0.05)；而在4℃的温度下，治疗后14天、21天的阳性培养率和其他温度下的结果比较，差异有统计学意义(P<0.05)；在25摄氏度的温度下保存，治疗后第7天、第14天、第21天的阳性培养率和其他温度相比，差异有统计学意义(P<0.05)；在30℃的温度下保存，不同时间段的阳性培养率相比，差异有统计学意义(P<0.05)。如表2：

表2 比较不同温度不同时间下的阳性培养率(n；%)

3 讨论

近年来，我国空气质量整体上呈现污染情况，而空气污染和环境变化，均可增加发病风险，肺结核作为一种因环境改变而导致的常见病，研究认为，对于该类疾病进行早期诊断十分必要，能够早期作出诊断，从而明确治疗[4]。目前临床对于肺结核的诊断方式较多，其中对患者的结核菌进行培养十分重要，能够明确诊断。其中痰液标本的检查效果较好，其检出率与涂片检查相比较高，在对患者采取结核菌培养实验过程中，需积极处理患者的痰液标本，并按照流程进行各项操作，选择适宜的痰液性状和保存条件，避免不同保存时间和患者的痰液性状对检查结果造成影响[5-6]。部分学者在研究过程中，在进行结核菌培养时，选择不同性状的痰液，能够对后续治疗以及后续检测结果造成一定影响，而相关研究表明，在不同性状的痰液中，干酪痰的阳性培养率相比其他性质痰液更高，其中唾液的阳性率最低。

痰液性状对结核菌培养阳性率的影响对结核菌分离培养实验来十分重要，而研究发现，痰液样本质量对培养结果准确性具有影响[7]，在进行研究过程中，痰液样本的数量为400份，结果提示干酪痰的阳性率最高、唾液的阳性率最低，故此应以干酪痰作为首选的实验标本，从而显著提高痰液培养阳性检出率。而在进行痰液取样过程中，需要对相关规范严格遵守，预防培养失败情况发生。研究发现，不同条件下对于痰液标本进行保存，其对于阳性率能够造成较大的影响，而在不同温度下进行样本培养，能够获得不同的检验结果[8]。影响因素如下：(1)温度固定时对比：如果温度在-18摄氏度左右，当样本保存时间不同，容易影响标本检测的阳性率，两者之间结构物显著差异，若温度在4摄氏度、25摄氏度及30摄氏度时，温度作为固定值实施对比，不同保存时间的结果显示，在保存时间为0天、3天以及7天的样本中，其不同温度的阳性率进行比较发现，无显著差异之外，21d和28d时，并且随着保存温度的升高，使得患者样本的阳性率也随之下降，而在28d，30摄氏度的样本阳性率也显著降低[9]；(2)保存时间为固定值的对比：固定量作为时间，对不同温度下对于样本的保存阳性率的比较，结果提示，若标本的保存时间相同，随着保存温度不断增加，患者阳性率呈现下降趋势，尤其是在28天和21天时。本研究结果显示，黏液痰40例阳性标本、干酪痰84例阳性标本、唾液7例阳性标本、血性痰24例阳性标本，其中以干酪痰所占比较高，和其他三组比较，具有显著差异(P<0.05)。在零下18摄氏度的温度下保存，不同时间段受检者的不同性质痰液(黏液痰、干酪痰、唾液、血性痰)的阳性培养率进行比较，差异无统计学意义(P>0.05)；而在4℃的温度下，治疗后14天、21天的阳性培养率和其他温度下的结果比较，差异有统计学意义(P<0.05)；在25摄氏度的温度下保存，治疗后第7天、第14天、第21天的阳性培养率和其他温度相比，差异有统计学意义(P<0.05)；在30℃的温度下保存，不同时间段的阳性培养率相比，差异有统计学意义(P<0.05)，由上述可见，其中干酪痰的培养阳性率和其他性质的痰液进行比较，差异有统计学意义，是由于研究过程中，在低温环境下，患者的痰液性状能良好进行保存，能够避免因外界环境因素的影响使得结果呈阳性，而在痰液标本实施培养过程中，需要及时进行培养，预防由于长时间而导致的异常[10]。在-18摄氏度保存温度下，各个痰液标本检出情况无显著差异，说明，在不同时间段内，其结核菌的阳性结果存在差异性，而保存温度越高，则表示结核菌的阳性率存在的差异越明显，因此在选择过程中，需要选择低温进行保存，早期实施结核菌阳性培养，在进行培养过程中需要以干酪痰为主,尽量避免选择唾液；同时，痰液标本需要保持在-18摄氏度的温度下，从而提高培养结果准确率，为患者后期治疗提供有利依据，改善预后。

综上所述，结核菌的阳性培养过程中应当优先选择干酪痰，同时痰液标本尽可能保存在-18摄氏度的低温环境下，对于标本需要早期进行培养。