乙肝患者HBV-DNA定量检测与血清标志物的关系研究

金 辉 李洪杰 李肖寒

(1.天津华大医学检验所 天津 300308；2.天津市海河医院检验科 天津 300350)

乙型肝炎病毒(HBV)感染作为乙肝疾病的基础病理，HBV-DNA载量与乙肝发生、发展的关系一直是临床关注的热点。目前，国内外诸多前沿文献报道已经证实，HBV-DNA载量与乙肝患者肝功能损害程度及肝纤维化程度均呈正相关，临床上通过乙肝患者HBV-DNA的定量检测，可作为判断患者肝功能及肝纤维化病理特点的重要依据[1]。而近年来，随着传染病学对乙肝疾病病理机制研究进程的不断推进，诸多前沿文献报道证实，氧化应激与炎症反应在乙肝患者肝损伤中起着关键的作用[2]，而患者HBV-DNA载量与氧化应激、炎症反应之间的关系亦成为临床研究的创新点。本研究主要探讨乙肝患者HBV-DNA载量与血清氧化应激标志物、炎症反应标志物之间的关系，以期为乙肝疾病诊疗体系的完善提供参考，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选取2020年1月-2021年12月我院收治的乙肝患者120例为研究对象。病例纳入标准：(1)符合乙肝诊断规范及相关标准；(2)所收集的病例资料符合本研究需要。排除标准：(1)肝炎病毒重叠感染者；(2)合并肝癌者；(3)合并其他部位感染性疾病者。其中，男70例，女50例；年龄23～72岁，平均年龄(58.24±4.25)岁；病程3～22年，平均病程(8.35±1.02)年。

1.2 方法

1.2.1HBV-DNA定量检测

采集本组120例患者晨起、空腹静脉血，采集量6mL，离心分离后取血清予以HBV-DNA定量检测，检测仪器采用荧光定量分析仪，检测方法采用FQ-PCR。根据检测结果，将120例患者分为低量组(HBV-DNA在0～104U/mL范围)16例，中量组(104U/mL106U/mL)26例。

1.2.2血清氧化应激标志物检测

参照1.2.1项下的方法，采集患者血液标本，离心分离后取血清予以氧化应激标志物检测，包括超氧化物歧化酶(SOD，检测方法采用化学比色法)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px，检测方法采用化学比色法)、丙二醛(MDA，检测方法采用TBA比色法)。

1.2.3血清炎症反应标志物检测

参照1.2.1项下的方法，采集患者血液标本，离心分离后取血清予以炎症反应标志物检测，包括肿瘤坏死因子-α(TNF-α，检测方法采用ELISA)、白细胞介素-10(IL-10，检测方法采用ELISA)、白细胞介素-2(IL-2，检测方法采用ELISA)。

1.3 观察指标

1.3.1HBV-DNA定量与Child-Pugh 评分的关系

根据检测结果，对比分析HBV-DNA低量组、中量组、高量组患者Child-Pugh 评分，其中Child-Pugh 评分越高，提示肝功能越差。

1.3.2HBV-DNA定量与血清氧化应激标志物的关系

根据检测结果，对比分析HBV-DNA低量组、中量组、高量组患者血清SOD、GSH-Px、MDA指标值。

1.3.3HBV-DNA定量与血清炎症反应标志物的关系

根据检测结果，对比分析HBV-DNA低量组、中量组、高量组患者血清TNF-α、IL-10、IL-2指标值。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 乙肝患者HBV-DNA定量与Child-Pugh评分的关系

在Child-Pugh 评分上，HBV-DNA低量组<中量组<高量组(P<0.05)，即随HBV-DNA载量的升高，Child-Pugh 评分随之升高，见表1。

表1 乙肝患者HBV-DNA定量与与Child-Pugh 评分的关系

2.2 HBV-DNA定量与血清氧化应激标志物的关系

在血清SOD、GSH-Px指标值上，HBV-DNA低量组>中量组>高量组(P<0.05)；在血清MDA上，HBV-DNA低量组<中量组<高量组(P<0.05)。Spearman相关性分析，乙肝患者HBV-DNA定量与血清SOD、GSH-Px呈负相关(r=-0.524、-0.665，P=0.017、0.013)，HBV-DNA定量与血清MDA呈正相关(r=0.656，P=0.009)，见表2。

表2 乙肝患者HBV-DNA定量与血清氧化应激标志物的关系

2.3 HBV-DNA定量与血清炎症反应标志物的关系

在血清TNF-α、IL-10指标值上，HBV-DNA低量组<中量组<高量组(P<0.05)；在血清IL-2上，HBV-DNA低量组>中量组>高量组(P<0.05)。Spearman相关性分析，乙肝患者HBV-DNA定量与血清TNF-α、IL-10呈正相关(r=0.786、0.713，P=0.007、0.08)，HBV-DNA定量与血清IL-2呈负相关(r=-0.562，P=0.004)，见表3。

表3 乙肝患者HBV-DNA定量与血清炎症反应标志物的关系

3 讨论

HBV-DNA定量检测作为乙肝检验医学项目的重要组成部分，近年来从最初的免疫学检测发展到今天的核酸检测，其灵敏度和精确度均得到明显提高。2021年，《中国慢乙肝防治指南》强调了HBV-DNA定量检查在实现乙肝治愈目标中的价值，其不仅是监测HBV病毒感染复制水平的客观指标，更是乙肝抗病毒治疗适应证判断及疗效评估的可靠标准[3]。近年来，随着临床医学对HBV-DNA定量检测与乙肝病理特征之间关系研究的不断深入，国内外诸多前沿文献从肝功能、肝硬化、肝纤维化等方面探讨了 HBV-DNA定量在乙肝疾病发生、发展机制中的参与作用，HBV-DNA定量与乙肝患者肝损伤程度呈正相关性已得到临床一致认可[4]。本研究中，在Child-Pugh 评分上，HBV-DNA低量组<中量组<高量组(P<0.05)，即随HBV-DNA载量的升高，Child-Pugh 评分随之升高，肝损伤程度随之加重，与文献报道一致。HBV病毒感染所造成的肝损伤机制一直是临床研究的重点。本研究主要从分析乙肝患者HBV-DNA定量与血清氧化应激标志物、炎症反应标志物的关系，探讨HBV病毒经氧化应激途径、炎症反应途径参与肝损伤的机制。研究结果显示：

SOD为抗氧化因子，GSH-Px为过氧化物分解酶，MDA为氧化应激重要的产物，Spearman相关性分析，乙肝患者HBV-DNA定量与血清SOD、GSH-Px呈负相关，HBV-DNA定量与血清MDA呈正相关，即随HBV-DNA定量的升高，机体氧化应激反应程度随之加重。据相关研究报道强调，机体氧化应激反应会诱发肝脂质过氧化，并诱导肝细胞损伤和凋亡，进而加重肝损伤。而HBV的S或者前S蛋白可通过内质网、线粒体途径引发二者发生功能障碍，并导致氧化应激刺激。因此，HBV是诱发氧化应激反应并造成肝损伤的重要介质，且随乙肝患者HBV-DNA载量的升高，其氧化应激刺激越剧烈，肝损伤越严重[5-6]。因此，临床上通过对乙肝患者HBV-DNA定量的检测，可为机体氧化应激反应程度的判断提供参考，并指导临床针对性的干预措施以抗氧化应激，减轻肝损伤程度。

TNF-α、IL-10均为重要的炎症反应介质，IL-2为炎症反应抑制因子，本研究中Spearman相关性分析显示，乙肝患者HBV-DNA定量与血清TNF-α、IL-10呈正相关，与血清IL-2呈负相关，即随HBV-DNA定量的升高，机体炎症反应程度随之加重。临床上，机体炎症反应的发生导致中性粒细胞、巨噬细胞等在肝脏组织逐步侵润和激活，容易引发过度炎症级联反应，造成肝细胞的损伤及死亡，导致患者肝功能下降[7]。而从病理、生理来讲，HBV侵入肝脏后大量复制，激活机体免疫反应，是导致大量炎症介质释放，诱发炎症反应的重要因子[8]。因此，乙肝患者随机体HBV-DNA载量的升高，炎症反应逐趋剧烈，肝损伤程度逐渐加重。因此，临床上通过对乙肝患者HBV-DNA定量的检测，可为机体炎症反应程度的判断提供参考，并通过抗炎干预以预防肝功能进行性损伤。

综上所述，随乙肝患者HBV-DNA定量的升高，机体氧化应激反应及炎症反应程度加重，造成肝功能损伤。临床上通过对乙肝患者HBV-DNA定量的检测，可用以判断机体氧化应激反应程度和炎症反应程度，进而采取针对性的抗氧化应激及抗炎干预，以减轻患者肝损伤程度，改善预后。