皮炎湿疹患者微生物感染情况与骨桥蛋白表达的相关性

李丽娜

【摘要】 目的：探究皮炎濕疹患者微生物感染情况，并就其与骨桥蛋白（OPN）表达情况的相关性进行分析。方法：选择2019年5月-2021年6月于盘锦辽油宝石花医院接受治疗的100例皮炎湿疹患者为研究组，另选同期于盘锦辽油宝石花医院接受体格检查的50例健康个体为对照组。分别对研究组患者皮损部位、非皮损部位及对照组正常皮肤样本进行细菌、真菌培养，实施菌种鉴定及菌落计数分析，并就两组个体血清OPN表达情况进行对比，分析细菌真菌感染与皮炎湿疹患者OPN表达情况的相关性。结果：对照组皮肤样本金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、马拉色菌感染率均低于研究组皮损样本，表皮葡萄球菌低于研究组非皮损样本，差异均有统计学意义（P<0.05）。皮损样本细菌真菌密度、金黄色葡萄球菌密度、OPN水平均高于非皮损样本（P<0.05），急性渗出型皮损细菌真菌密度、金黄色葡萄球菌密度及OPN水平均高于慢性斑块型皮损（P<0.05）。研究组100例患者中，后期发生继发感染18例，未继发感染82例，研究组继发感染和未继发感染患者细菌、金黄色葡萄球菌及马拉色菌检出率均高于对照组（P<0.05），且继发感染患者细菌、金黄色葡萄球菌检出率均高于未继发感染患者（P<0.05）。研究组细菌真菌定植密度与其血清OPN表达水平呈明显正相关（r=0.749 1，P=0.000 3）。结论：微生物定植与皮炎湿疹的发生和发展关系密切，患者血清OPN水平会明显升高，可以考虑将其应用于皮炎湿疹诊疗鉴别中。

【关键词】 皮炎湿疹 微生物感染 骨桥蛋白 相关性

Correlation between Microbial Infection and Osteopontin Expression in Patients with Dermatitis and Eczema/LI Li’na. //Medical Innovation of China， 2022， 19（13）： -161

[Abstract] Objective： To explore the microbial infection in patients with dermatitis and eczema， and to analyze its correlation with the expression of osteopontin （OPN）. Method： A total of 100 patients with dermatitis and eczema who received treatment in Panjin Liaoyou Baoshihua Hospital from May 2019 to June 2021 were selected as the research group， and 50 healthy individuals who received physical examinations in Panjin Liaoyou Baoshihua Hospital during the same period were selected as the control group. Bacteria and fungi were cultured on skin lesions， non-skin lesions， and normal skin samples of the control group. The identification of bacteria and the analysis of colony count were carried out. The serum OPN expression of two groups were compared， and the correlation between bacterial and fungal infection and OPN expression in patients with dermatitis and eczema was analyzed. Result： The infection rate of Staphylococcus aureus， Staphylococcus epidermidis and Malassezia infection in the skin samples of the control group were lower than those in the skin lesion samples of the study group， Staphylococcus epidermidis was lower than that in the non-lesion samples of the study group， and the differences were statistically significant （P<0.05）. The bacterial and fungal density， Staphylococcus aureus density and OPN level of skin lesion samples were higher than those of non-lesion samples （P<0.05）. The bacterial and fungal density， Staphylococcus aureus density and OPN level of acute exudative skin lesions were higher than those of chronic plaque-type skin lesions （P<0.05）. Among 100 patients in the study group， 18 cases developed secondary infections in the later period， 82 cases did not develop secondary infections. The detection rates of bacteria， Staphylococcus aureus and Malassezia in the study group were significantly higher than those in the control group （P<0.05）， and the detection rates of Staphylococcus aureus and bacteria in patients with secondary infection were significantly higher than those in patients without secondary infection （P<0.05）. There was a significant positive correlation between the colonization density of bacteria and fungi and the expression level of serum OPN in the study group （r=0.749 1， P=0.000 3）. Conclusion： Microbial colonization is closely related to the occurrence and development of dermatitis and eczema， the level of serum OPN in patients will be significantly increased， it can be considered for the diagnosis and treatment of dermatitis and eczema.

[Key words] Dermatitis and eczema Microbial infection Osteopontin Correlation

First-author’s address： Panjin Liaoyou Baoshihua Hospital， Liaoning Province， Panjin 124010， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2022.13.038

皮炎湿疹类皮肤疾病是皮肤科的常见病和多发病[1]。其临床表现主要包括瘙痒、红斑、丘疹、水疱、脱屑、肥厚等，一般皮疹会并发渗出或融合倾向，临床上常将出现上述症状且无法做出明确诊断者先拟诊断为皮炎湿疹[2-3]。皮炎湿疹具有治疗难度大、易反复等特点，其发病原因较为复杂，目前发病机制尚未明确，多数研究认为其是在多种内外因素综合影响下导致的皮肤炎症反应性皮肤病[4]。皮炎湿疹当前尚缺乏特效治疗手段，但该症迁延不愈的特性导致急速治疗后患者易出现皮肤萎缩、色素沉着、感染加重等现象，因而临床上建议治疗上应强调对因治疗[5]。近些年大量针对皮炎湿疹类皮肤病的病因学研究发现，机体免疫功能紊乱是该症的发病基础，而微生物定植是诱发或加重机体免疫机能紊乱的重要原因之一，虽然皮炎湿疹患者出现发热、淋巴结肿大等系统感染症状较少，但患者常因瘙痒抓挠导致其皮肤屏障被破坏，进而增加了微生物尤其是部分细菌、真菌和病毒的感染率[6]。已有的研究报道指出，细菌感染尤其是金黄色葡萄球菌感染同特异性皮炎的发病密切相关，金黄色葡萄球菌会分泌多种超抗原特性的外毒素进而加重皮炎症状[7]，也有研究指出马拉色菌也同该症有一定关联[8]。骨桥蛋白（OPN）是一种广泛存在于细胞外基质中的糖基化蛋白，该蛋白被证实具有增强肠道保护屏障、保护全身免疫的作用，近些年也有研究指出OPN具有细胞因子的功能特点，在皮肤科疾病的发生发展中也起到了重要作用[9]。本研究拟就皮炎湿疹患者微生物感染情况进行分析研究，并就微生物定植情况与患者血清OPN蛋白表达相关性进行分析，以期为改善此类患者预后提供临床参考。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2019年5月-2021年6月于盘锦辽油宝石花医院接受治疗的100例皮炎湿疹患者为研究组，另选同期于盘锦辽油宝石花医院接受体格检查的50例健康个体为对照组。纳入标准：（1）研究组经临床诊断确诊，符合皮炎湿疹相关诊断标准[10]，对照组为健康个体;（2）意识清晰，能配合调研;（3）年龄≥18岁。排除标准：（1）合并精神疾病;（2）合并全身免疫系统疾;（3）近3个月服用皮质醇类药物治疗;（4）酒精或药物依赖;（5）合并严重肝肾功能障碍;（6）妊娠或哺乳期女性;（7）伴发其他系统严重疾病;（8）近期服用免疫抑制剂。本研究已经医院伦理学委员会批准，患者及家属均知情同意并签署知情同意书。

1.2 方法 研究组皮损部位和非皮损部位（皮肤对称部位或距离皮损至少5 cm处正常部位）及对照组前臂屈侧处，使用消毒后的镂空圆形不干胶粘贴靶部位皮肤处，在镂空处使用无菌棉签反复擦拭（横向、纵向和斜向各10次），而后将棉签投入稀释液中反复震荡80次，取10 μL接种于羊血平皿培养基中，于35 ℃有氧环境下培养24～48 h，对分离出来的细菌菌落及菌落数进行记录。另取部分稀释液离心处理后除去上清液，沉淀物置于沙堡培养基与马拉色菌培养基中，37 ℃条件下培养30 d，观察分离的真菌菌种。采集不同部位皮肤样本后，使用乙醇和二甲苯脱水，甲醛溶液固定后石蜡包埋切片，切片处理脱蜡后使用过氧化氢处理10 min，使用酶联免疫吸附法（ELISA）对样本中OPN表达水平进行检测，应用试剂盒均购自北京博奥森生物技术有限公司，操作严格按照试剂盒说明书进行，指标连续检测3次取平均值作为最终结果。

1.3 观察指标 比较两组皮肤样本细菌真菌构成种类、研究组皮肤样本细菌真菌定植量及OPN表达情况、不同皮炎湿疹类型患者细菌真菌检出情况及研究组细菌真菌定植密度与OPN表达情况相关性。

1.4 统计学处理 采用SPSS 22.0软件对所得数据进行统计分析，符合正态分布的计量资料用（x±s）表示，多组间比较采用方差分析，两组间比较采用独立样本t检验;计数资料以率（%）表示，比较采用字2检验;相关性分析使用Pearson相关系数。以P<0.05為差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组一般资料比较 两组一般资料比较，差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性，见表1。

2.2 两组皮肤样本细菌真菌构成种类比较 对照组皮肤样本金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、马拉色菌感染率均低于研究组皮损样本，表皮葡萄球菌低于研究组非皮损样本，差异均有统计学意义（P<0.05）。见表2。

2.3 研究组皮肤样本细菌真菌定植量与OPN表达水平比较 皮损样本细菌真菌密度、金黄色葡萄球菌密度、OPN水平均高于非皮损样本（P<0.05），急性渗出型皮损细菌真菌密度、金黄色葡萄球菌密度及OPN水平均高于慢性斑块型皮损（P<0.05），见表3。

2.4 不同皮炎湿疹类型患者细菌真菌检出情况比较 研究组100例患者中，后期发生继发感染18例，未继发感染82例。研究组继发感染和未继发感染患者细菌、金黄色葡萄球菌及马拉色菌检出率均高于对照组（P<0.05），且继发感染患者细菌、金黄色葡萄球菌检出率均高于未继发感染患者（P<0.05）。见表4。

2.5 研究组患者细菌真菌定植密度与OPN表达情况相关性分析 研究组细菌真菌定植密度与OPN水平呈明显正相关（r=0.749 1，P=0.000 3）。

3 讨论

皮炎湿疹目前已成为临床上较为常见的皮肤科疾病之一[11-12]，该症具有治疗难度大、易反复、临床症状明显等特征，数据显示近些年皮炎湿疹的发病率呈现逐渐递增趋势，已对个体正常生活和工作造成了明显影响，皮炎湿疹目前已成为重要的公共卫生疾病[13]。当前对皮炎湿疹发病机制的研究进展不大，临床上普遍认为皮炎湿疹是在生物因素、心理因素、社会因素等多种因素综合作用下造成的，三种因素可相互作用、相互影响[14]。目前有报道指出，部分皮肤病患者机体免疫功能会出现紊乱，而免疫紊乱、皮损等原因又为病原菌感染和定植制造了机会，进一步加重机体免疫功能失衡[15]，因而从调节机体微生物菌群定植方面入手可能将有助于加快皮炎湿疹患者康复，降低其复发率。

本研究通过设立对照分组的方式，就皮炎湿疹患者微生物感染情况及微生物定植与OPN表达的相关性进行了分析，结果显示，在微生物定植种类方面，对照组皮肤样本金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、马拉色菌感染率均显著低于研究组皮损样本，表皮葡萄球菌低于研究组非皮损样本，差异均有统计学意义（P<0.05），同时将研究组患者按照皮损部位与非皮损部位区分后二次分析显示，急性渗出型皮损细菌真菌密度、金黄色葡萄球菌密度均高于慢性斑块型皮损（P<0.05）。陆茂等[16]通过对28例特应性皮炎（AD）患者以及23例健康对照组个体开展分析发现，AD患者的皮损区域马拉色菌拷贝数明显高于非皮损区域，AD患者的马拉色菌整体拷贝数也高于对照组个体，但该学者的研究结果指出马拉色菌的拷贝数与其湿疹面积、严重度指数均无明显相关性。刘婷等[17]则通过比较发现，皮炎湿疹皮损患者的病情与细菌感染、马拉色菌及金葡菌的分布密切相关，且皮损的严重程度与炎症因子、免疫水平、病原菌密度均有密切的关系，可以考虑将其作为皮炎湿疹患者临床诊断及预后评估的参考指标。本文作者分析认为，正常情况下人体表面金黄色葡萄球菌检出密度较低，结果提示皮损样本细菌真菌密度、金黄色葡萄球菌密度均显著高于非皮损样本（P<0.05），而且将研究组患者按照病情区分后再次比较显示，急性渗出型皮损细菌真菌密度、金黄色葡萄球菌密度均高于慢性斑块型皮损（P<0.05）。这提示细菌真菌、金黄色葡萄球菌的过度定植可能加重了皮炎湿疹的病理进程，导致患者病情急性进展。

OPN是一种由破骨细胞、巨噬细胞、淋巴细胞、上皮细胞和血管平滑肌细胞等多种细胞分泌的蛋白质，在矿化组织的细胞外基质与炎症组织的细胞外液中均有表达[18]。OPN在骨骼内含量较为丰富，能与一系列的细胞表面受体相结合，其作用主要为介导信号转导过程，进而促进细胞黏附和聚集，临床上常将OPN作为判断炎症反应严重程度的实验室指标[19-20]。本研究结果显示，研究组继发感染和未继发感染患者细菌、金黄色葡萄球菌及马拉色菌检出率均显著高于对照组，且继发感染患者细菌、金黄色葡萄球菌检出率均明显高于未继发感染患者，差异均有统计学意义（P<0.05）。Pearson相关系数相关性分析也显示细菌真菌定植密度与OPN水平呈正相关（P<0.05）。本文作者分析认为，该结果一方面印证了其他学者关于OPN与皮肤疾病相关的结果，另一方面也提示OPN参与了皮炎湿疹发生发展进程。以往临床上对皮炎湿疹的鉴别诊断多依赖医者查体，而该结果为皮炎湿疹的鉴别诊断提供了实验室支撑。

综上所述，微生物定植与皮炎湿疹的发生和发展关系密切，患者血清OPN水平会明显升高，可以考虑将其应用于皮炎湿疹诊疗鉴别中。

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（收稿日期：2021-09-14） （本文编辑：程旭然）