血清可溶性CD146水平对HFmrEF老年群体的诊断价值

王晨彤，邹晨晨，张 洁，秦晓磊，辛建华，卢 林

(1.牡丹江医学院；2.牡丹江医学院附属红旗医院，黑龙江 牡丹江 157011)

射血分数中间值心力衰竭(heart failure with mid-range ejection fraction,HFmrEF)是指左心室射血分数(LVEF)数值在40～49%范围的心力衰竭。HFmrEF在老年慢性心衰中约占30.5%[1]。目前心血管疾病生物标志物的检测已被用于获取病理和生理信息，以改善慢性心力衰竭的预后和早期诊断。近年来，国内外研究发现，CD146在机体内分布广泛，包括所有的血管内皮细胞、平滑肌细胞、活化的T淋巴细胞等。可溶性CD146(sCD146)在正常的浓度范围内发挥维持正常的血管结构、血管稳态等重要的生理功能[2]。目前，关于血清sCD146在HFmrEF不同年龄人群中的表达差异及对老年病情的评估价值，报道很少。本研究通过比较sCD146在老年HFmrEF与非老年患者HFmrEF、健康老年中的浓度水平，旨在分析血清sCD146与NT-proBNP、心功能分级的相关性。从而探讨血清sCD146在老年HFmrEF患者作为辅助诊断、病情评估中的应用价值。

1 对象与方法

1.1 研究对象选取2020年9月至2021年10月间于牡丹江医学院附属红旗医院老年病科和心血管内科就诊的HFmrEF患者，筛选出超声心动图左心室射血分数值在40%～49%的老年HFmrEF组(年龄≥60岁)患者34例、非老年HFmrEF组(年龄<60岁)患者34例、健康老年组(年龄≥60岁)31例。老年HFmrEF组和非老年HFmrEF组纳入标准：(1)符合2016欧洲心脏病学会(ESC)急慢性心力衰竭指南和2018中国心力衰竭诊断和治疗指南诊断标准；(2)具备心力衰竭的症状体征：如端坐呼吸、活动耐量降低、颈静脉怒张、液体潴留、外周水肿；(3)左室射血分数LVEF为40%～49%；(4)超声心动图显示心脏结构和(或)功能异常，心脏舒张功能异常和(或)左心房扩大和(或)左心室肥厚。排除标准：(1)NYHA I级的患者；(2)先天性心脏病、严重心脏瓣膜病、严重心律失常、缩窄性心包炎、限制性心肌病、急性心肌梗死(三个月内)；(3)合并严重感染、创伤；(4)重度肝损害(Child-Pugh分级C级)，胆汁性肝硬化和胆汁淤积；(5)肌酐>221 μmol/L(2.5 mg/dL)或肾小球滤过率(e GFR)<30 mL/(min·1.73 m2)；(6)严重贫血、出血、严重慢性阻塞性肺病、严重支气管哮喘、风湿免疫病、及恶性肿瘤。该研究经牡丹江医学院附属红旗医院伦理委员会批准并与患者签署知情同意书。

1.2 一般实验室检测患者入院24 h内，空腹抽取肘静脉血3 mL，用塑料离心管以3000 r/min的速度离心15 min，分离血清，由牡丹江市红旗医院检验科测定总胆红素、同型半胱氨酸、肌酐、胆固醇、低密度脂蛋白、血浆白蛋白。

1.3 血清sCD146、NT-proBNP测定血清sCD146测定：所有纳入对象在入院24 h内抽取空腹肘静脉血于EDTA 紫头采血管中，静置2 h或4 ℃过夜，在离心机里4 ℃条件下以 3000 r/min 离心5 min，取上层血浆。使用上海笃马生物科技有限公司人可溶性CD146 ELISA检测试剂盒。使用美国 Molecular Devices公司生产的酶标仪测定吸光度，检测波长450 nm，所有样本均采取复孔检测，最后根据标准校正曲线计算血清样本sCD146水平。血清NT-proBNP测定：患者入院24 h内于安静状态中采用经乙二胺四乙酸二钾(EDTA-2K)抗凝的标准采血管(EDTA-2K 3.6 mg/支)采外周静脉血3 mL，使用Triage BNP仪，采用双抗体夹心荧光免疫测定法，严格按照操作说明书进行操作。

1.4 超声心动图所有患者常规超声心动图检查均由牡丹江医学院附属红旗医院超声科2名副主任级别以上医师进行，观察并记录左心室室间隔厚度、左室舒张末期前后径、左室收缩末期前后径、左室后壁厚度、左室舒张末期容积、每搏输出量数值。

1.5 统计学方法应用SPSS 25.0软件包对所有获得的数据进行分析，服从正态分布的计量资料数据用“均数±标准差”表示，组间比较采用方差分析；不服从正态分布的计量资料以中位数和四分位间距M(Q)表示，组间比较采用秩和检验；计数资料采用频数和百分比[n(%)]表示，组间用卡方检验进行；应用Pearson分析变量间的相关性。通过绘制受试者工作曲线(ROC)得到sCD146临界值及其敏感性和特异性。其中，灵敏度=真阳性人数/(真阳性人数+假阴性人数)×100%；特异度=真阴性人数/(真阴性人数+假阳性人数))×100%；约登指数=灵敏度+特异度-1。以P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 三组间相关指标及超声心动图指标的比较老年HFmrEF组34例，男性18例，女16例，平均(69.47±3.94)岁；非老年HFmrEF组34例，男性17例，女性17例，平均(55.03±3.18)岁；健康老年组31例，男性14例，女性17例，平均(68.94±6.69)岁。老年HFmrEF组与老年健康组年龄及性别无统计学意义(P>0.05)。三组收缩压、舒张压、血浆白蛋白、胆固醇、低密度脂蛋白无统计学意义，而心率、总胆红素、同型半胱氨酸、肌酐有显著差异(P<0.05)，具有统计学意义(见表1)。其中，在心率、总胆红素、肌酐中，健康老年组分别与老年HFmrEF组和非老年HFmrEF组存在显著差异(P<0.05)，而老年HFmrEF组与非老年HFmrEF组无显著差异(P>0.05)；在同型半胱氨酸中，老年HFmrEF组与非老年HFmrEF存在显著差异(P<0.05)，健康老年组也分别与老年HFmrEF组和非老年HFmrEF组存在显著差异(P<0.05)。三组患者的超声心动图报告结果中，左心室室间隔厚度、左室舒张末期前后径、左室收缩末期前后径、左室舒张末期容积中有显著差异(P<0.05)，而在左室后壁厚度、每搏输出量中无统计学意义(P>0.05)。其中，在左心室室间隔厚度、左室舒张末期前后径、左室收缩末期前后径、左室舒张末期容积中，健康老年组分别与老年HFmrEF组和非老年HFmrEF组存在显著差异(P<0.05)，而老年HFmrEF组与非老年HFmrEF组无差异(P>0.05)(见表2)。

表1 三组血压、心率及血生化指标比较

表2 三组超声心动图相关资料

2.2 三组NT-pro BNP、sCD146水平的比较NT-proBNP老年HFmrEF组与非老年HFmrEF组的NT-proBNP水平明显高于健康老年组，存在显著差异(P<0.05)，而老年HFmrEF组与非老年HFmrEF组也存在差异性，无统计学意义(P<0.05)。sCD146：老年HFmrEF组明显高于非老年HFmrEF组、健康老年组(P<0.05)，且老年HFmrEF组与非老年HFmrEF组存在差异，有统计学意义(P<0.05)(见表3)。

表3 三组NT-proBNP、sCD146水平

2.3 sCD146与NT-pro BNP、心功能分级相关性在老年HFmrEF组、非老年HFmrEF组中，随着sCD146升高，NT-pro BNP增大，心功能分级越高，呈正相关；且老年HFmrEF组比非老年HFmrEF组相关性大(见表4、表5)。

表4 老年HFmrEF组sCD146与NT-pro BNP的相关性分析

表5 非老年HFmrEF组sCD146与NT-pro BNP的相关性分析

2.4 sCD146水平对老年HFmrEF的诊断价值采用ROC曲线分析探讨sCD146对老年HFmrEF的诊断价值，蓝色线代表sCD146，红色线为参考线。在灵敏度及特异度最高时得到的截点值为68.459 ng/mL，灵敏度、特异度分别为：85.3%，93.5%。诊断老年HFmrEF曲线下面积为94.5%(见图1，表6)。

图1 受试者工作特征曲线

表6 sCD146诊断老年HFmrEF的ROC曲线分析

3 讨论

中国是全球慢性心力衰竭患病率最高的国家之一，心力衰竭是各类心血管疾病发展的终末阶段。2016年欧洲急性及慢性心衰指南[3]及2018年中国心衰诊断和治疗指南[4]根据左心室射血分数(LVEF)，将心衰患者分为射血分数减低的心衰(HFrEF，LVEF<40%)、射血分数中间值的心衰(HFmrEF，40%≤LVEF<50%)和射血分数保留的心衰(HFpEF，LVEF≥50%)。有研究表明，与非老年组心力衰竭患者相比，普通老年组、高龄老年组心力衰竭患者的再入院率、死亡率、合并症的发病率及风险更高，预后更差[5]。研究显示HFmrEF临床特征介于HFrEF和HFpEF之间，其病理生理并不明确。但HFmr EF与HFpEF病因相似，是由慢性疾病如高血压、糖尿病、肾脏病等引起的心力衰竭，且HFmrEF患者有更高的共病发病率[6]。HFmrEF患者的预后更接近于HFpEF，其中期生存期优于HFrEF[7]。所以，如果在早期可以及时诊断、干预HFmrEF，使其不进展为HFrEF，老年人生活质量可以进一步得到保障，同时也会对社会减轻严重负担。

本研究结果表明，静息心率增快与心力衰竭有关，这与苗博[9]等人的研究结果一致。有学者提出，急慢性心力衰竭会引起肝脏不同程度的损伤，本实验研究结果与吴丹[10]的研究具有相似性。血清同型半胱氨酸水平升高是心力衰竭的危险因素，与其严重程度紧密相关[11]，与本研究结果一致。慢性心力衰竭患者进展到一定程度时会导致水钠潴留，造成肾功能不全，靳雪艳[12]的研究中也阐述了这一问题。对心力衰竭病人而言，其左室舒张功能的恶化是进行性的，左心室顺应性呈逐渐下降趋势[13]。本实验也证实了这一点，HFmrEF组患者与健康老年人超声心动图指标相比，具有显著性差异。且HFmrEF组患者比健康老年组在左心室室间隔厚度、左室舒张末期前后径、左室舒张末期容积中数值增大，这与Marai I[14]研究结果相似。

1987年，CD146在黑色素细胞表面首次被发现，它是一种跨膜糖蛋白，免疫球蛋白[15]。也是内皮细胞间连接的一部分，负责维持组织结构[16]。实际上，已有学者证实sCD146是内皮损伤的标志，并解释了其血清浓度与疾病进展之间的正相关。CD146作为一种充血的新型血液生物标志物，在许多实验和临床研究中已显示出CD146可反映血管内积液[17]。sCD146从静脉血管的舒张反应中释放出来，可能反映了慢性HF患者的全身充血[18]。sCD146在心力衰竭中的作用机制可能和内皮细胞机械性破坏、静脉扩张或压力增加有关[19]。既往Gayat等[20]研究发现sCD146诊断心源性急性呼吸困难的能力与NT-proBNP相近，同时sCD146可在NT-proBNP诊断的“灰色区域”发挥判断疾病进展程度的功能，可作为急性失代偿性心衰的诊断标志物来监测疾病进程。本实验研究中，老年HFmrEF组sCD146的水平明显高于非老年HFmrEF组、健康老年组，且与NT-proBNP、心功能分级且呈正相关，sCD146浓度越高，心衰程度越重，且sCD146在老年HFmrEF组中相关性更大。在ROC曲线中，提示血清sCD146可以作为反映心力衰竭严重程度的生物标志物。

综上所述，血清sCD146在老年人HFmrEF的辅助诊断方面具有积极的临床意义，本研究仅探讨了血清中的sCD146水平，联合NT-proBNP、超声心动图相关指标，并与其他生物标志物结合分析可能对HFmrEF的诊断更有意义。老年群体在HFmrEF中占比较大，病情常呈进行性加重，定期检测血清sCD146水平对病情监测与评估具有较高的临床价值。