轮状病毒抗原检测在婴幼儿腹泻诊断中的临床价值

杨毅茹

婴幼儿腹泻是临床常见病症之一，发病率仅次于呼吸道感染，多由轮状病毒（rotavirus，RV）感染而引起，是婴幼儿死亡的一个重要病因，报道显示，全球范围内每年约有90万人次婴幼儿死于RV感染，多数发生于发展中国家。RV所致肠炎又称之为秋季腹泻，具有起病急骤、进展迅速、病情严重等特点，发生率高达40%～60%[1]。一旦发生RV感染，就可对婴幼儿酸碱及水电解质平衡状态产生影响，而RV诱发婴幼儿腹泻的机制在于，RV侵犯柱状上皮细胞时，该细胞可发生一系列生理或病理变化，导致肠道吸收功能发生障碍，使得机体肠腔部位聚积大量水分，最终表现为水样腹泻[2-4]。RV属于肠病毒科下病毒类型的一种，具有双股RNA，以病毒所具备的抗原性为依据，可将RV分为A-G7组，其中A、B及C组可导致人体感染。在各组RV中A组轮状病毒是导致婴幼儿腹泻的主要病毒类型，研究[5]发现，婴幼儿腹泻中A组RV感染率高达80%，多见2岁以下幼儿。由此，及早诊治，是改善患儿预后的关键，而轮状病毒抗原检测，可为婴幼儿腹泻诊断提供可靠依据。本次选取128例婴幼儿腹泻患儿，研究婴幼儿腹泻诊断中轮状病毒抗原检测的应用价值，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2018年10月—2020年10月南平市妇幼保健院收治的128例婴幼儿腹泻患儿为研究对象，纳入标准：（1）均经临床确诊为婴幼儿腹泻；（2）患儿资料完整；（3）患儿家长知情同意；（4）获伦理委员会批准。排除标准：（1）合并精神疾病者；（2）合并血液系统疾病者；（3）合并心肝肾功能严重不全者；（4）中途退出者。入组患儿中，男70例，女58例，年龄1～6岁，平均（3.46±0.18）岁。

1.2 方法

入组者均行轮状病毒抗原检测；试剂盒选取轮状病毒抗原检测试剂盒，由万泰生物提供，采用胶体金法进行检测；以试剂盒说明书为依据，严格执行检测工作，首先旋开样本稀释管，将采便勺取出，采集患儿100 mg粪便样本，取样后将勺面抹平并置入稀释管内，振荡混匀后，折断样本稀释管上的盖帽；将检测卡平放干燥平面上，弃去前两滴液体，垂直而缓慢将2～3滴样本加入检测卡加样端中心，以胶体金免疫层析法检测A群轮状病毒；A群轮状病毒包被于硝酸纤维素膜上的检测区域，采用胶体金对A群轮状病毒单克隆抗体进行标记，若检测区可见1条红线，即为阳性；若检测区未见红线，即为阴性；加样5～10 min内判读检测结果。

1.3 观察指标

分析患儿检测结果，对比不同性别、不同年龄、不同性状粪便及不同季节患儿轮状病毒的检测阳性率。

1.4 统计学处理

数据经SPSS 19.0软件分析，计量资料用（±s）表示，计数资料用（n，%）表示，经χ2检验，P＜0.05则表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同性别患儿轮状病毒的检测阳性率对比

128例患儿经轮状病毒抗原检测后，41例阳性，检测阳性率为32.03%；其中男70例，轮状病毒抗原检测阳性为23例，阳性率为32.86%；女58例，轮状病毒抗原检测阳性为18例，阳性率为31.03%。不同性别组患儿轮状病毒抗原的检测阳性率比较，差异无统计学意义（χ2=0.048，P＞0.05）。

2.2 不同年龄患儿轮状病毒的检测阳性率对比

128例患儿中年龄1～2岁共38例，轮状病毒抗原检测阳性21例，阳性率为55.26%；年龄＞2～3岁共31例，轮状病毒抗原检测阳性7例，阳性率为22.58%；年龄＞3～4岁共22例，轮状病毒抗原检测阳性5例，阳性率为22.73%；年龄＞4～5岁共21例，轮状病毒抗原检测阳性3例，阳性率为14.29%；年龄＞5～6岁共16例，轮状病毒抗原检测阳性5例，阳性率为31.25%。不同年龄组中1～2岁组患儿轮状病毒抗原的检测阳性率最高，＞4～5岁组患儿检测阳性率最低，各组间轮状病毒抗原的检测阳性率比较，差异有统计学意义（χ2=14.609，P＜0.05），见表1。

表1 不同年龄患儿轮状病毒的检测阳性率比较

2.3 不同性状粪便患儿轮状病毒的检测阳性率对比

128例患儿的粪便标本性状包括黏液便、水样便、蛋花汤样便及其他，其中黏液便共44例，轮状病毒抗原检测阳性19例，阳性率为43.18%；水样便共26例，轮状病毒抗原检测阳性10例，阳性率为38.46%；蛋花汤样便共24例，轮状病毒抗原检测阳性7例，阳性率为29.17%；其他样便共34例，轮状病毒抗原检测阳性5例，阳性率为14.71%。不同性状粪便组患儿的轮状病毒抗原检测阳性率比较，黏液便最高，其次是水样便、蛋花汤样便。

2.4 不同季节患儿轮状病毒的检测阳性率对比

128例患儿于春夏季节发病共60例，轮状病毒抗原检测阳性13例，阳性率为21.67%；秋冬季节发病共68例，轮状病毒抗原检测阳性28例，阳性率为41.18%。与春夏季节比较，秋冬季节轮状病毒抗原检测阳性率更高，差异有统计学意义（χ2=5.573，P＜0.05）。

3 讨论

腹泻是婴幼儿多发病的一种，统计显示，在发展中国家，感染性腹泻一直是导致婴幼儿死亡的前三位因素之一，尤其是年龄≤5岁幼儿[6]。对于婴幼儿腹泻病情较轻患者，以大便次数增多为主要表现，每日大便次数＞3次，大便性状可见异常情况，多为蛋花便、黏液便、糊状便及稀水便，同时可伴有发热、恶心、食欲不振、呕吐及腹痛等症状，部分患儿可出现全身不适症状；对于病情严重患儿，常并发电解质紊乱、脱水、酸中毒及休克等，甚至危及生命。婴幼儿腹泻发病机制复杂，主要病因在于细菌感染、病毒感染、乳糖不耐受及消化不良等，而RV感染已成为婴幼儿腹泻的一个常见病因。RV是由11个双链RNA片段组合而成的一种无包膜病毒，成熟的病毒颗粒由内壳蛋白、外壳蛋白、核衣壳蛋白等组成，可分为不同血清型，至今临床已发现14个VP7血清型，其中人类感染中最为常见的是G1～G4型。RV从黏附宿主细胞开始直至进入细胞脱掉外层衣壳，可获取自我转录及复制能力，直至生成新的病毒颗粒分泌出细胞，对相邻未感染细胞产生侵犯，进而引起一系列临床症状。RV是导致婴幼儿腹泻的主要病原体之一，几乎每个年龄≤5岁儿童均经历过至少1次RV感染[7]。以VP6衣壳蛋白抗原特异性为依据，可将RV分为7个群，以A群RV最为常见。RV可通过空气飞沫散播、人与人之间接触或接触被RV污染的玩具、通过粪-口途径等与婴幼儿群体中快速传播，感染后患儿多表现为呕吐、腹泻等症状，部分可出现肠道外感染并发症[8]。资料显示，我国腹泻儿童中约有60%由RV感染而引起，常导致腹泻爆发性流行[9]。在发病季节分布方面，随着时间、地域不同而存在一定差异，我国婴幼儿腹泻多发生于秋冬季节。既往研究[10]证实，RV感染所致婴幼儿腹泻，是我国低龄儿童死亡的最直接病因之一。虽然RV感染所致腹泻具有自限性特点，病程通常在7 d左右，患儿病情痊愈后后遗症发生率极低，但针对严重RV感染患儿，若无法得到及时、有效治疗，就可能引起严重并发症，如心脏损害等，进而提高病死率[11]。由此，及早实施RV抗原检测，以指导临床制定合理治疗治疗方法，对患儿预后改善，意义重大。

本研究发现，128例患儿经轮状病毒抗原检测后，41例阳性，检测阳性率为32.03%，与既往报道中RV感染率30.82%基本符合；其中男70例，轮状病毒抗原检测阳性为23例，阳性率为32.86%；女58例，轮状病毒抗原检测阳性为18例，阳性率为31.03%；不同性别组患儿轮状病毒抗原的检测阳性率比较，未见明显差异；提示婴幼儿腹泻多由RV感染而引起，而性别并不会对RV感染率产生影响。本研究还发现，128例患儿中1～2岁、＞2～3岁、＞3～4岁、＞4～5岁及＞5～6岁患儿轮状病毒抗原的检测阳性率分别为55.26%、22.58%、22.73%、14.29%、31.25%，各组间轮状病毒抗原的检测阳性率比较，差异显著；提示1～2岁是RV感染所致婴幼儿腹泻的高发年龄段，其余年龄段虽然患儿均有发病，但发病率相对较低。分析原因，对于年龄＜1岁幼儿来说，由于其可经由母体获取营养，其中含有大量分泌性IgA抗体及特异性IgG抗体等，可提高幼儿抗感染能力，有利于预防RV感染；而1～2岁婴幼儿多数采用混合喂养方式，使得婴幼儿所获取的IgG抗体减少，加上幼儿活动强度、范围等均增加，进而提高RV感染风险；针对年龄＞2岁婴幼儿，分析其RV检测阳性率较低的原因，可能与该年龄段婴幼儿自身的免疫系统发育逐渐完善有关，加上应有可能在成长过程中已经经历RV感染，主动免疫功能明显增强，进而降低RV感染风险[12-13]。在季节发病方面，本研究发现，与春夏季节（21.67%）比较，秋冬季节（41.18%）轮状病毒抗原检测阳性率更高，提示婴幼儿腹泻多发生于秋冬季节。分析原因，RV感染呈流行趋势可能与湿度、温度、气候及菌株变异等密切相关，而相较于春夏季节，秋冬季节的空气湿度、温度均更低，病毒传播、增殖效率均明显提高，同时秋冬季节温度较低，病毒生存于这一环境中存活时间更长，进而提高秋冬季节RV感染率。对于不同性状粪便的RV感染率，本研究发现，粪便标本性状中黏液便、水样便、蛋花汤样便及其他样便患儿轮状病毒抗原的检测阳性率分别为43.18%、38.46%、29.17%、14.71%，提示RV感染所致婴幼儿腹泻，多表现为黏液便、水样便等，而临床上开展样本检测时，一旦发现样本表现为以上样便，就需引起重视，以降低漏诊率。既往研究发现，一旦机体受到RV感染，机体肠道菌群的丰富程度就可明显降低，而导致这一情况出现的直接原因与RV致病机制有关。RV感染所引起腹泻多为渗透性腹泻，病毒进入到人体肠道后，可于小肠绒毛细胞内迅速增殖，导致细胞变性或坏死，进而降低黏膜水分，并减弱电解质回收能力，对肠黏膜吸收糖、蛋白质及脂肪等产生抑制作用，同时提高机体肠腔内渗透压，提高肠蠕动性，进而加重腹泻症状。此外，于镜检下可检测出大量脂肪球或靶细胞等，由此临床对患儿粪便样本进行镜检时，应密切关注脂肪球、白细胞是否存在，若存在就需及时为患儿开展RV抗原检测，以确定病原体类型，为后续治疗方案制定提供指导。

综上所述，轮状病毒是导致婴幼儿腹泻的一个主要病原体，临床需尽早对患儿开展轮状病毒抗原检测，以早期诊断疾病，并指导临床制定合理治疗方案。