通便灵胶囊中松果菊苷的含量测定及质量情况分析

谢秉湘，朱环，张丽萍，李志梅

温州市食品药品检验科学研究院，浙江 温州 325000

通便灵胶囊是由番泻叶、当归、肉苁蓉组成的中药成方制剂，具有泻热导滞，润肠通便的功效，用于热结便秘，长期卧床便秘，一时性腹胀便秘，老年习惯性便秘［1］。该品种属于甲类非处方药，临床应用较广。但其检测指标单一，大部分标准只包含性状、鉴别和检查项目，个别标准包含了番泻苷、大黄酸或阿魏酸的含量测定。近年来，为提高通便灵胶囊的质量标准，出现了许多质量控制方面的研究论文，已有多位研究者建立了紫外、高效液相色谱法（HPLC）等含量测定方法［2-6］，以及更为深入的指纹图谱和模式分析方法［7-8］。肉苁蓉具有补肾阳、益精血、润肠通便的功效［9］，是该制剂的重要组成部分，但鲜有对肉苁蓉的成分进行控制的研究方法，无法全面评价该制剂质量。本研究依据《卫生部中药成方制剂》第七册及其他法定标准对市场上收集到的45 批样品进行了全项目检验，并采用HPLC 法测定该制剂中肉苁蓉有效成分松果菊苷的含量，为市售通便灵胶囊的质量评价提供依据。

1 材料

1.1 实验样品

通便灵胶囊来源见表1，共45 批次，来自15个药品生产厂家。

表1 45个批次的通便灵胶囊来源

1.2 实验试剂

大黄酸（批号110757-201607，纯度99.3%），阿魏酸（批号110773-201915，纯度99.4%），松果菊苷（批号111670-201907，纯度91.8%）。对照品均购自中国食品药品检定研究院，甲醇为色谱纯，水为超纯水，其余试剂为分析纯。

1.3 实验仪器

Agilent 1260 高效液相色谱仪-G1314F 紫外检测器（安捷伦科技有限公司）；XS205DU 十万分之一电子分析天平（瑞士梅特勒-托利多仪器有限公司）；DHG-9091A 电热恒温干燥箱（上海一恒科学仪器有限公司）；ZB-1E 智能崩解仪（天津市天大天发科技有限公司）。

2 方法与结果

2.1 市售通便灵胶囊质量考察

45 批次样品按标准检验（此次研究共涉及5 个检验标准）全部合格，具体数据见表2。

表2 样品标准检验结果汇总表

2.2 松果菊苷的含量测定

2.2.1 色谱条件和方法 参考本课题组前期实验方法［8］，使用太玮科技JADE-PAK ODS 色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），以甲醇为流动相A，以0.1%甲酸溶液为流动相B，按表3 梯度洗脱；流速1.0 mL/min；柱温30 ℃；检测波长为340 nm；进样量20 μL。

表3 流动相梯度洗脱表

2.2.2 对照品溶液的制备 取松果菊苷对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每1 mL 含14.337 μg 的溶液，作为对照品溶液。

2.2.3 供试品溶液的制备 取样品内容物2.0 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50 mL，密塞，称定重量，超声处理30 min，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。

2.2.4 线性关系考察 精密称取松果菊苷对照品适量，加50%甲醇制成质量浓度为286.742 μg/mL 的对照品储备溶液，分别用50%甲醇稀释至浓度为储备溶液的1%，2.5%，5%，10%，25%，50%，100%。吸取稀释液各20 μL，进样，记录色谱图，以质量浓度为横坐标（X，μg/mL），峰面积为纵坐标（Y）绘制标准曲线，得到回归方程、线性范围及相关系数，见表4，结果表明线性关系良好。

表4 松果菊苷回归方程

2.2.5 精密度试验 精密称取同一批样品内容物2.0 g，按“2.2.3”项下方法制备供试品溶液，并按“2.2.1”项下色谱条件，连续重复进样6 次，测定峰面积。松果菊苷的峰面积RSD 为1.0%，表明仪器精密度良好。典型高效液相色谱图，见图1。

图1 高效液相色谱图：A.对照品溶液；B.样品溶液

2.2.6 重复性试验 取同一批样品内容物6 份，各2.0 g，精密称定，按“2.2.3”项下方法制备供试品溶液，并按“2.2.1”项下色谱条件进样，测定峰面积并计算含量。结果松果菊苷的含量RSD 为1.2%，表明实验方法重复性良好。

2.2.7 稳定性试验 精密称取同一批样品内容物2.0 g，按“2.2.3”项下方法制备供试品溶液，并按“2.2.1”项下色谱条件分别于0，2，4，8，12 h 进样，测定峰面积。结果松果菊苷峰面积RSD 为1.0%，表明通便灵胶囊供试品溶液在12 h 内稳定。

2.2.8 回收率试验 取同一批样品内容物（温州海鹤药业有限公司，批号：20191001）6 份，各1.0 g，精密称定，精密加入松果菊苷对照品溶液（浓度为230.72 μg/mL）2.0 mL，按“2.2.3”项下方法制备供试品溶液，计算加样回收率。结果，通便灵胶囊中松果菊苷的平均回收率为102.1%，RSD 为0.8%。

2.3 样品含量测定

取45 批次样品，按照“2.2.3”项下方法制备供试品溶液，依法测定，含量测定结果见表5，各厂家之间的比对见图2。

表5 45批次样品中松果菊苷含量测定结果（mg/g）

图2 不同厂家松果菊苷含量比较图

3 分析

3.1 限度拟定

因现行标准中缺乏肉苁蓉的质量控制项目，为全面评价通便灵胶囊的质量现状，本研究抽取了15家生产厂家45 批次样品用以拟定松果菊苷的含量限度。在通便灵胶囊处方中，肉苁蓉用量为150 g制成1 000 粒，采用上述松果菊苷含量测定方法对45 批次样品进行检测，结果松果菊苷平均质量分数为2.006 9 mg/g。考虑到肉苁蓉在处方中用量较少，且煎煮后入药，故本次限度按转移率70%计算，暂定通便灵胶囊中松果菊苷的限度为1.405 mg/g。

3.2 质量情况分析

按本研究拟定的限度，45 批次样品中，松果菊苷含量低于拟定限度的共有17 个批次，所占百分比为37.78%，共涉及9 家生产厂家。并且同一生产企业含量的波动较大，如厂家H，最高位3.468 5 mg/g，最低仅为0.945 2 mg/g，相差3.7 倍。此外企业间的含量差距最高达十倍以上（厂家I 和L），肉苁蓉作为贵重药材投料，更应该精准把握，而本研究数据显示这些企业在原材料把控，投料方面和生产工艺方面可能存在问题。

用现有的法定标准检验45 批样品均为合格，而通过松果菊苷含量测定发现各厂家之间样品存在巨大差异，这可能会导致通便灵胶囊药效的不稳定性；这跟通便灵胶囊检验标准过于简单不无关系。为了确保药品质量以及减少各厂家产品间的差异，建议在标准中增加松果菊苷的含量测定。