2016年至2020年南昌地区无偿献血人群梅毒螺旋体抗体筛查情况分析

樊璐

（江西省血液中心，江西 南昌 330052）

近年来我国梅毒报告发病率居高不下， 整体快速增长，全国梅毒流行趋势日益严峻[1]。 梅毒螺旋体(Treponema pallidum,TP)可经输血传播，国内部分地区报道无偿献血人群中梅毒感染率逐年递增[2-3]。 TP 感染标志物为梅毒螺旋体特异性抗体(抗-TP)， 抗-TP 阳性是南昌地区血液报废的主要原因之一。 为了解本地区献血群体梅毒流行态势，制定适宜的献血者招募和血液检测策略， 现对2016年至2020年南昌地区无偿献血人群抗-TP筛查情况分析如下。

1 对象与方法

1.1 对象 2016年1月1日至2020年12月31日南昌地区无偿献血者血液标本343 607 人份。献血者年龄18～60 岁，男性214 887 人、女性128 720人，献血前体检结果均符合国家《献血者健康检查要求》(GB18467-2011)[4]。

1.2 方法 设备：STAR 全自动样本处理系统(瑞士Hamilton 公司)；XANTUS 全 自 动 加 样 与 血 型 分析仪(深圳爱康公司)；FAME 24/20 全自动酶免分析系统(瑞士Hamilton 公司)。 仪器设备每年定期校准。 试剂：梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒(酶联免疫法)(ELISA)(厦门英科新创公司，简称试剂R1；北京万泰公司，简称试剂R2)。 试剂均为经国家药品监督管理局批准用于血源筛查的体外诊断试剂，具备生物制品批签发证明。

检测策略：《血站技术操作规程(2012 版)[》5]规定采用2 个不同生产厂家的ELISA 试剂检测梅毒特异性抗体；《血站技术操作规程(2019 版)》[6]规定TP 感染标志物采用2 个不同生产厂家的血清学检测试剂进行检测。 检测方法：采用双抗原夹心法原理，使用2 种抗-TP ELISA 试剂盒对血液标本平行一检、二检。 临界值(cut-offf)的计算：按试剂说明书设置。

结果判定：OD<(80%×cut-offf) 判定为无反应性，OD≥(80%×cut-offf)判定为有反应性。初次试验为反应性的标本，单种试剂检测为反应性时，使用该试剂对原标本进行双孔复试， 若双孔复试结果中任何1 孔为反应性，检测结论判为抗-TP 阳性；2种试剂检测均为反应性时， 使用2 种试剂分别对原标本进行双孔复试，任何1 孔显示反应性，则判定为抗-TP 阳性。抗-TP 阳性标本对应的血液成分制品进行隔离报废。

1.3 统计分析 运用SHINOW 9.0 启奥血站管理信息系统，回顾性调查近5年南昌地区献血人群抗-TP 检测数据及ELISA 双试剂阳性献血者人口学特征资料。 使用EXCEL 软件整理基础数据，SPSS 22.0 统计软件进行数据分析， 计数资料的比较采用χ2检验，P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 无偿献血人群抗-TP 检测结果 2016年至2020年南昌地区献血人群各年度间抗-TP 阳性率比较，差异有统计学意义( χ2=29.81，P<0.01)；ELISA双试剂阳性率高于单试剂阳性率， 两者总阳性率比较，差异有统计学意义( χ2=63.05，P<0.01)；试剂R2 单阳性率高于试剂R1， 两者总阳性率比较，差异有统计学意义( χ2=23.24，P<0.01)。 见表1。

表1 2016年至2020年南昌地区献血人群抗-TP 检测结果[例数(率/‰)]

2.2 抗-TP 检测复检率及复检符合率 血清学检测中， 复检符合率是复试有反应性标本数(repeat reactivity, RR) 与初次试验有反应性标本数(initial reactivity, IR)之比[6]。 复检率=IR/检测数量×100%，复检符合率=RR/IR×100%。2016年至2020年南昌地区献血人群各年度间抗-TP 检测复检率比较，差异有统计学意义( χ2=43.5，P<0.01)；各年度间抗-TP检测复检符合率比较， 差异有统计学意义( χ2=10.15，0.01

表2 2016年至2020年南昌地区献血人群抗-TP ELISA 检测复检率及复检符合率

2.3 2种抗-TP 试剂复检符合率比较 试剂R2 复检符合率高于试剂R1， 差异有统计学意义( χ2=20.20，P<0.01)；双试剂反应性标本的复检符合率显著高于单试剂反应性标本，差异有统计学意义( χ2=316.71，P<0.01)；见表3。

表3 2 种抗-TP ELISA 试剂复检符合率

2.4 抗-TP 双试剂阳性献血者人口学特征及合并感染情况 2016年至2020年南昌地区抗-TP ELISA 双试剂检测阳性献血者合计655 例，按照不同性别比较，阳性率差异无统计学意义( χ2=2.05，P>0.05)； 不同年龄段比较，36～55 岁献血者阳性率高于其他年龄段( χ2=456.16，P<0.01)；不同户籍比较，本市籍贯阳性率高于外地籍贯( χ2=474.21，P<0.01)；不同文化程度比较，初中及以下低学历人群阳性率高于其他学历( χ2=734.53，P<0.01)；不同职业比较，农民、工人、无固定职业的“其他”人群、职员阳性率高于其他职业( χ2=404.13，P<0.01)；不同献血次数比较，初次献血阳性率高于重复献血( χ2=338.89，P<0.01)；不同献血类别比较，捐献全血阳性率高于单采血小板( χ2=23.92，P<0.01)；不同献血方式比较， 自愿献血阳性率高于团体献血 ( χ2=188.08，P<0.01)；合并感染情况比较，抗-TP 双试剂阳性合并ALT 异常最高( χ2=12.76，0.01

表4 2016年至2020年南昌地区655例抗-TP ELISA 双试剂阳性献血者特征

3 讨论

2016-2020 年南昌地区无偿献血人群抗-TP阳性率3.06‰，低于本地区既往检测数据[7-8]，低于长春、深圳等城市[9-15]，近5年各年度间抗-TP 阳性率先升后降，总体呈现低流行态势。 这与南昌地处我国中部内陆， 人口流动性不强有关。 2019年至2020年献血人群抗-TP 阳性率比2016年至2018年有所下降，分析原因是2019年新版《血站技术操作规程》施行后，本地区血站强化献血前告知及健康征询流程， 提示献血者仔细阅读并理解献血前须知内容， 包括献血动机、 安全献血者的重要性、高危行为者恶意献血的责任等，从源头杜绝部分高危人群献血。本研究数据显示抗-TP 双试剂阳性率高于单试剂阳性率，与范许洲等人[16]“抗-TP一种试剂检测阳性数低于两种试剂检测均阳性数”的研究结果相同。

《血站技术操作规程(2019 版)》[6]规定在血液检测过程中应对试验性能持续进行监控， 选择能够反映试验系统变化的参数进行试验系统监控，包括血清学检测系统初、 复试反应率及两者的比例(复检符合率)。 2019年至2020年抗-TP 复检率低于2016年至2018年，与本地区抗-TP 阳性率下降趋势一致。近5年南昌地区献血人群抗-TP 复检符合率84.38%，高于京津冀地区[17]，2018年至2020年抗-TP 复检符合率高于2016年至2017年。 较高的复检符合率表明南昌地区血液筛查实验室质量管理体系有效运行，血液检测人员培训充分，仪器设备运行维护良好，ELISA 试剂种类固定， 试剂质量抽检把关严格。

本研究中双试剂反应性标本的复检符合率为100%，显著高于单试剂反应性标本。 试剂R2 复检符合率高于试剂R1， 说明不同厂家抗-TP ELISA试剂的检测重复性有所差异。抗-TP 检测阳性率较高的试剂R2，其复检符合率也更高，表明灵敏度高的ELISA 试剂，重复性相对更好。 曾雪珍等[10]研究发现使用2 种不同厂家试剂进行献血者抗-TP 筛查具有科学性，可降低梅毒经输血传播风险。 李雪梅等[18]报道单试剂检测存在漏检的可能， 采用ELISA 试剂联合检测能防止抗-TP 漏检。 陈红[19]报道TP ELISA 检测单试剂或低值阳性标本存在较高的假阳性。非特异性反应引起的抗-TP 假阳性结果，导致血液报废、血源流失。 血源筛查试剂属于采供血关键物料，为最大限度避免漏检、减少假阳性， 建议运用最低检出限、 阳性/阴性参考品符合率、精密性、稳定性等指标，在质量抽检时对ELISA试剂盒开展性能验证评价，筛选灵敏度高、特异性强、重复性好的抗-TP 酶免试剂。

南昌地区抗-TP 酶免双试剂阳性献血者中，男性与女性阳性率比较， 无显著性差异；18～55 岁献血人群抗-TP 阳性率随年龄增加而升高，46～55 岁年龄段最高，36～45 岁次之； 本市籍贯阳性率高于外地籍贯；献血者抗-TP 阳性率随文化程度上升而下降，初中及以下低学历人群阳性率较高，本科及以上学历阳性率较低；农民、工人、无固定职业的“其他”人群、职员阳性率高于医务人员、士兵、学生、教师等职业；初次献血阳性率高于重复献血；捐献全血阳性率高于单采血小板； 自愿献血阳性率高于团体献血；合并感染率依次为ALT>HBsAg>抗-HCV>抗-HIV>HBV DNA。 由性别因素引起的献血者梅毒阳性率差异在全国各地区有所不同，可能与不同地域献血人群中男性和女性比例不一致有关。南昌地区抗-TP 酶免双试剂阳性献血者年龄、文化程度、职业特征与国内部分地区[20-21]报道近似。 36～55 岁中年人群社交生活丰富，发生婚外不良性行为概率较高。 梅毒感染情况与献血者教育水平、职业特点存在相关性。 本研究中农民、工人、职业不稳定的“其他”人员多为初中及以下低学历人员， 此类人群对于性传播疾病的预防知识了解薄弱，自我保护意识差。 职员交际应酬多，性观念相对开放。 医务人员、军人、高校学生、教师、公务员群体文化程度较高，自我约束力较强，属于低危人群。 高校学生是南昌地区无偿献血主力人群。 值得关注的是，本研究发现在校大学生在抗-TP 双试剂阳性献血者中占一定比例， 本地区高校青年男性行为者(MSM)在献血人群HIV-1 感染者中居多[22]。年轻人生理上处于性活跃期，加强大学生群体的性病艾滋病防治宣教刻不容缓。 初次献血者中不排除高危行为者为检测自身是否感染TP而献血，给血液安全带来隐患。 少数抗-TP 双试剂阳性献血者存在输血相关传染病标志物合并感染，其中TP 与HIV 具有相同的性传播途径和重叠高危人群， 梅毒是艾滋病传播和感染的重要促进因素[1]。 依据人口学特征，对本市初次捐献全血的农民、工人、低学历无固定职业者、职员，应重点加强献血前告知和健康征询排查。

为防控抗-TP 经输血传播，减少抗-TP 阳性导致的血液报废，建议本地区采供血机构：（1）增加献血前TP 金标法快速筛查，从采血源头排除梅毒感染者。 （2）血清学检测选用高灵敏度、高特异性的ELISA 试剂；引入敏感性更高，具有检测快速、操作简便、 易自动化优势的化学发光免疫分析试验(CLIA)。 （3）抗-TP 筛查阳性标本开展明胶颗粒凝集试验(TPPA)确证，掌握献血人群梅毒感染率及确证符合率。（4）加强“人、机、料、法、环、测”6 个血站实验室管理要素[23]监控。 （5）强化高危行为者甄别， 招募低危献血者， 巩固并扩大固定献血者队伍，提高团体献血数量。（6）TP 抵抗力弱，血液中的螺旋体4 ℃放置3 d 后可死亡，红细胞类血液制品应于血库冷藏储存72 h 以上发往临床。