非酒精性脂肪性肝病严重程度与氧化应激、SAA、CRP和脑动脉硬化的相关性研究*

脂肪肝分为酒精性脂肪性肝病和非酒精性脂肪性肝病，NAFLD是指脂肪细胞在肝脏处积聚而发展为脂肪肝、脂肪性肝炎、肝硬化和肝纤维化甚至到癌变的过程

。目前NAFLD患者已经超过乙型肝炎患者，成为了我国第一大肝病。NAFLD与2型糖尿病、血脂异常、高血压和代谢类疾病的高发密切相关，且与心脑血管疾病的危险升高具有一定的相关性

。氧化应激是由于刺激而引起的氧化和抗氧化失衡的一系列反应状态

。肝细胞氧化应激、线粒体功能障碍、丙二醛(MDA)等过氧化物增多，可以导致肝细胞出现炎症、坏死甚至是纤维化

。同时氧化应激能够激活信号通路，介导血管壁发生一系列变化，影响了血管的正常结构和功能，从而促使动脉粥样硬化的发生和发展

。血清淀粉样蛋白A(SAA)和C-反应蛋白(CRP)是肝脏合成的急性反应蛋白，大量炎症因子的分泌能够启动肝细胞中的SAA 和CRP分泌，可以反应局部炎症的程度

。但目前仍未出现过NAFLD病情严重程度与氧化应激、SAA、CRP水平、脑动脉硬化相关性的报道。所以本研究观察不同程度NAFLD患者血清中的氧化应激，并分析氧化应激、SAA、CRP表达与脑动脉硬化的关系，旨在为脑动脉硬化的预防以及治疗提供参考。

1 资料和方法

1.1 研究对象 选取2018年1月到2020年1月消化内科诊断为NAFLD的患者227例，其中轻度NAFLD患者116例，中度NAFLD患者74例，重度NAFLD患者37例，并选49例为健康对照组，年龄为(50.88±8.94)岁。

现阶段在泰煤家园改造中居民参与有效性不高：主要表现为一是居民参与主体缺乏组织性；二是居民参与领域信息不对称；三是居民参与方式较为被动。

1.2 纳入标准 ①经CT检测确认为NAFLD患者(即符合规定CT诊断脂肪肝的依据为肝脏密度普遍降低，肝/脾CT值之比小于1.0)，并依据《2017年美国肝病学会非酒精性脂肪性肝病诊疗指导》标准

及《非酒精性脂肪性肝病防治指南(2018更新版)》标准

，符合规定CT检测：肝/脾CT比值小于1.0但大于0.7者为轻度，<0.7但大于0.5者为中度，0.5者为重度NAFLD。

1.3 排除标准 ①男性摄入酒精量每周≥140 g，女性摄入酒精量每周≥70 g；②病毒性和酒精性肝炎以及自身免疫性肝病等；③严重的心脏、肺部疾病、肾功能不全患者；④恶性肿瘤、代谢类疾病和精神疾病患者。本研究已通过我院伦理委员会伦理审查及批准，患者以及家属签字确认同意。

（二）营业总成本。1—8月，国有企业营业总成本355739.5亿元，增长9.7%，其中销售费用、管理费用和财务费用分别增长7.1%、9.6%和14%。中央企业205109.8亿元，增长9.9%，其中销售费用、管理费用和财务费用分别增长6.5%、9.2%和9.3%。地方国有企业150629.7亿元，增长9.3%，其中销售费用、管理费用和财务费用分别增长7.9%、10%和18.2%。

1.4.2 血样采集 所有对象入院1 d后无高脂饮食，空腹10 h以上，清晨抽血静脉血10 ml，检测糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹血糖(FBG)、TG、TC、LDL-C、HDL-C、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)，采用迈瑞BS-280全自动生化分析仪测定TG、TC、LDL-C、HDL-C、ALT、AST、GGT。

2.4 脂肪肝严重程度和脑动脉硬化的相关危险因素分析 见表4。健康对照组、轻度、中度、重度NAFLD组患者脑动脉硬化的发生率分别为0%、0%、9.46%和24.32%；在多变量logistic回归分析中发现，不同程度脂肪肝患者的BMI、脂质代谢指标(TG、TC、HDL-C、ALT、AST)、氧化应激相关指标(MDA、NO、SOD、GPx、GSH)、炎性因子(SAA、CRP、INF-a、IL-6、MCP-1和PAI-1)是脑动脉硬化发生的危险因素，具有相关性(

<0.05)，不同程度NAFLD患者的氧化应激GGT、CAT、GST与脑动脉硬化无相关性(

>0.05)。

1.4 研究方法

1.4.3 氧化应激标记物检测 血液样本经过离心处理，离心率为3 000r/min，离心时间20 min，分离出血浆，化学比色法检测丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性，采用α-萘氨显色法检测血浆中一氧化氮(NO)的含量，采用过氧化氢与乙酸-重铬酸钾反应显色比色法检测过氧化氢酶(CAT)活性，用改良Hafeman氏比色法检测谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性，用DTNB显色法检测谷胱甘肽(GSH)活性，用谷胱甘肽-氯二硝基苯显色法谷胱甘肽S转移酶(GST)活性， 所有试剂盒均有由南京建成生物工程研究所提供。

维修决策的优化目标是使全周期期望维修费率最低。本节计算全周期期望维修费率，并寻求使其最低的最优参数m*和N*。

1.4.4 炎症因子检测 血液样本经过离心处理，离心率为2 000 r/min，离心时间30 min，取血清，使用免疫定时散色比浊法测定SAA，采用ELISA法肿瘤坏死因子(INF-a)、白介素-6(IL-6)、纤溶酶原激活抑制物-1(PAI-1)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)水平，采用散射比浊法检测CRP。试剂盒均由北京福瑞生物工程公司提供，按照试剂盒说明书进行严格操作。

2 结果

2.2 血清中氧化应激标记物的表达 见表2。轻度、中度、重度NAFLD组患者的MDA、NO的水平较健康对照组显著升高(

<0.05)，且三组NAFLD患者之间比较具有显著性差异(

<0.05)，而轻度、中度、重度NAFLD患者的SOD、CAT、GPx、GSH、GST水平较健康对照组明显降低(

<0.05)，且三组NAFLD患者之间比较具有显著性差异。

改革开放40年，印刷产业引进先进的技术、设备、管理，得以跨越式发展，这正是我们常说的“后发优势”。当打开国门，看到工业化国家的自然环境，要求我们现实发展中的环境要对标今天的现代化国家，这就是“后发劣势”。

2.1 一般资料 见表1。四组患者年龄、ALT、AST比较无显著性差异(

>0.05)，轻、中度NAFLD组患者BMI、高血压、糖尿病、高脂血症、TG、TC、LDL-C、FBG、HbA1c、GGT、SBP、DBP与健康对照组比较有著性差异(

<0.05)，均高于健康对照组患者，轻、中、重度NAFLD三组患者的年龄、高血压、糖尿病、高脂血症、TC、LDL-C、FBG、HbA1c、SBP、DBP比较无显著性差异(

>0.05)，中度NAFLD患者的BMI、TG、HDL-C、ALT、AST、GGT水平高于轻度NAFLD组患者(

<0.05)，重度NAFLD组患者高于中度NAFLD,三组之间具有显著性差异(

<0.05)。

肝脏代谢障碍有很多原因，脂质代谢就是其中一种，脂质代谢动态失衡会促使脂肪在肝内堆积，当肝的质量超过肝内脂肪含量的5%以上时，称为脂肪肝。NAFLD一般是指没有过量饮酒史的脂肪肝，它的发病原因比较复杂，比如糖尿病、肥胖、多囊卵巢病和高血脂症等

，糖尿病、肥胖、高血脂症是NAFLD患者疾病发展的危险因素，同时也是脑动脉硬化形成的诱发因素，所以脂肪肝和脑动脉硬化存在一定的相关性

。

1.4.1 病史采集 以调查问卷的方式对患者的病史资料进行采集，病史资料包括年龄、高血压、糖尿病、高脂血症，体脂数(BMI)、收缩压(SBP)和舒张压(DBP)入院时由医生计算和测量。

3 讨论

2.3 血清中炎症因子的表达 见表3。轻度、中度、重度NAFLD组患者SAA、CRP、INF-a、IL-6、MCP-1和PAI-1水平较健康对照组显著升高(

<0.05)，且三组NAFLD患者之间比较水平明显升高(

<0.05)。

至于佛经、煨桑等等细节，更是《江格尔》及其他蒙古史诗中习见的情节，虽属佛教文化内容，但若只凭这些细节判定佛教思想为该史诗的贯穿线索，显然难以成立。

脂质代谢紊乱在NAFLD疾病中比较常见。相关研究表明，脂质代谢出现紊乱的患者大约有将近一半的患者伴有脂肪肝

。本研究对患者的一般资料进行对比分析发现，三组患者的BMI、TG、HDL-C、ALT、AST、GGT水平中度NAFLD高于轻度NAFLD，重度NAFLD高于中度NAFLD，随着NAFLD疾病程度的发展，BMI、TG、HDL-C、ALT、AST、GGT指标就越恶劣。相关文献报道，严重的高TG血症患者脂肪肝的发病率是普通人的5～6倍

。饮食和脂肪的不断增加，肝脏摄取的脂肪酸就不断的增加，线粒体β中脂肪酸的氧化降低，导致极低密度脂蛋白的分泌降低，致使TG转运障碍，从而出现高TG血症

。高TG血症会触发其他脂蛋白代谢异常，比如LDL颗粒改变 ，低HDL-C血症等。多项研究表明，HDL-C是脑血管疾病的危险因素，HDL-C水平每升高1 mg/dl，心脑血管疾病的风险就会降低2%左右

，且LDL颗粒改变也是脑动脉硬化的必然条件。

肝脏是活性氧(ROS)的主要场所，也是ROS攻击的主要靶器官，当机体受到损害时，ROS增多产生氧化应激，导致线粒体和内质网损伤

，从而对肝脏造成一定的损害。当脂质代谢混乱时，脂肪堆积过剩，给ROS毒性和脂质氧化提供了基石

。ROS大量生成，脂质过氧作用增强，肝脏脂质过氧化水平升高。血浆中的抗氧化能力降低，从而氧化和抗氧化失衡，导致血管新生与内皮损伤, 动脉斑块的形成受到了影响。本研究结果表明，轻度、中度、重度NAFLD患者的MDA、NO的水平显著升高，SOD、GPx、GSH水平明显降低。SOD、GPx、GSH是抗氧化酶系统抵抗自由自的第一道防线，通过有毒反应物代谢有效清除自由基，一般是把有害的物质转化为水或者双原子氧，SOD、GPx、GSH水平表达降低表明机体受损，抵抗自由基，把有害物质转变为无害物质

。MDA是氧化应激的生物标志物，能够反映氧化损伤的程度。随着MDA水平的升高，脂肪肝的氧化损伤能力越强。相关研究报道，NO水平与脑卒中的发生具有一定的联系，NO在动脉粥样硬化中起着一定的作用

。NO是一种新型的细胞信使因子，可以促进血管的扩张，增加血流量。轻度、中度、重度NAFLD患者NO的水平增加会刺激内皮细胞的产生，刺激机体产生大量的内皮素，内皮素具有收缩血管的作用，所以导致血液粘稠度不断的增加，诱发脑动脉硬化，加重了大脑的损伤。所以说明NAFLD患者的应激氧化应激标记物可能是脑动脉硬化的诱因。

细胞因子在NAFLD 中越来越受到研究者们的关注，从肝细胞脂肪变到肝炎、再到肝纤维化和肝硬化的发展，细胞因子起着重要的作用，细胞因子包括的炎性因子有PAI-1、MCP-1、IL-6、INF-α，INF-α属于前期的炎症因子，可以拮抗脂联素，诱导NO合成和氧化应激反应并加剧动脉硬化，CRP形成的主要刺激因子为IL-6，在炎症反应中起着主要的作用。相关研究报道，随着IL-6水平的升高，CRP也逐渐升高，CRP能够促进动脉硬化的形成

。MCP-1可导致NO合成超氧化物歧化酶，加剧动脉硬化的状态。PAI-1能够阻止纤维蛋白溶解，在不稳定粥样斑块的形成中起着主要作用，本研究结果表明，轻度、中度、重度NAFLD患者SAA、CRP、INF-α、IL-6、MCP-1和PAI-1水平明显升高，不同程度脂肪肝患者的INF-α、IL-6、MCP-1和PAI-1是脑动脉硬化发生的危险因素，具有相关性，与上述论证具有一致性。

综合上述，不同程度脂肪肝患者的炎症因子INF-α、IL-6、MCP-1和PAI-1是脑动脉硬化发生的危险因素，具有相关性，不同程度脂肪肝患者的氧化应激MDA、NO、SOD、GPx、GSH活性与脑动脉硬化也具有一定的相关性。所以当患者诊断为NAFLD 时，应当对肝脏疾病进行积极的治疗，对其脑动脉硬化的相关危险性进行合理性的评估，降低脑动脉硬化绝对的风险发生。

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