用液相色谱—质谱联用法测灭多威、多菌灵及嘧霉胺等20种农药残留

2022-06-13杨琳琳

农业开发与装备 2022年5期

关键词：离心管提取液乙腈

杨琳琳

（鞍山市检验检测认证中心，辽宁鞍山 114000）

1 试剂及样品前处理的原理

1.1 原理

试样用色谱纯乙腈提取，提取液经过分散固相萃取净化处理过后，用Waters TQD检测，外标法（标准曲线）定量。

1.2 药品

水：在实验中水为GB/T 6682规定的一级水。乙腈：色谱纯。甲酸：色谱纯。提取盐包内含4 g无水硫酸镁、1 g氯化钠、1 g柠檬酸三钠二水合物、0.5 g柠檬酸二钠倍半水合物。含除水剂和净化材料的塑料离心管：提取液使用无水硫酸镁150 mg/ml、PSA 25 mg/ml和GCB 2.5 g/ml。陶瓷均质子：2 cm（长）×1 cm（外径）。有机相微孔滤膜：13 mm×0.22 μm。

2 仪器和设备

液相色谱—三重四极杆质谱联用仪：配有电喷雾离子源（ESI）Waters TQD。分析天平：感量0.1 mg和0.01 g。

3 试样制备

3.1 试样制备

食用菌、热带和亚热带水果（皮可食）随机取样1 kg，水生蔬菜、茎菜类蔬菜豆类蔬菜、核果类水果热带和亚热带水果（皮不可食）随机取样2 kg，瓜类蔬菜和水果取4～6个个体（取样量不少于1 kg），其他蔬菜和水果随机取样3 kg。取后的样品将其切碎，充分混匀，用四分法取一部分或全部用组织捣碎机匀浆后，放入样品储存瓶中。

3.2 样品的储存

将样品按照测试和备用分开存放，于-18℃冰柜中保存。

4 分析步骤

称取10 g（精确至0.01 g）试样（蔬菜、水果、食用菌）于50 ml塑料离心管中，加入10 ml乙腈及1颗陶瓷均质子，剧烈振荡1 min，加入4 g无水硫酸镁、1 g氯化钠、1 g柠檬酸钠二水合物、0.5 g柠檬酸二钠盐倍半水合物，剧烈振荡1 min后4 200 r/min离心5 min。定量吸取上清液至内含除水剂和净化材料的塑料离心管中（提取液使用无水硫酸镁150 mg/ml、PSA 25 mg/ml）；对于颜色较深的试样，离心管中另加入GCB（提取液使用2.5 mg/ml），涡旋混匀1 min。4 200 r/min离心 5 min，吸取上清液过微孔滤膜。

5 测定

5.1 标准曲线绘制

取空白试样按样品处理方法制备空白基质溶液，然后准确量取适量20种农药混标溶液，用空白基质溶液稀释配制成浓度为20μg/L、40μg/L、60μg/L、100μg/L、150μg/L、200μg/L的系列基质匹配标准溶液，供Waters TQD测定。分别以20种农药的定量离子质量色谱峰面积为纵坐标，对应的基质匹配标液浓度为横坐标，绘制标曲。

5.2 液相色谱—串联质谱参考条件

5.2.1 液相色谱参考条件。色谱柱：C182.1×50 mm，1.7 μm。流速：0.4 mL/min。流动相：A为0.1%甲酸水溶液，C为乙腈溶液。进样量：2 µL。流动相梯度洗脱程序（图1）。

图1 流动相梯度洗脱程序

5.2.2 质谱参考条件。Waters TQD的离子源：电喷雾离子源（ESI）。Waters TQD的扫描方式：正离子扫描。Waters TQD的质谱扫描方式：多反应监测扫描（MRM）。Waters TQD的离子源温度：150℃。参考监测离子参数情况（表1）。

表1 监测离子参数

6 定性及定量

6.1 保留时间

被测样品中目标农药色谱峰的RT与相应标准色谱峰的RT相比较，相对误差应在±2.5%之内。

6.2 离子丰度比

在相同实验条件下进行样品测定时，如果检出的色谱峰的保留时间与标准样品相一致，并且在扣除背景后的样品质谱图中，目标化合物选择的子离子均出现，而且同一检测批次，对同一化合物，样品中目标化合物的离子丰度比与质量浓度相当的基质标准溶液相比，其允许偏差不超过规定的范围（表1），则可判断样品中存在目标农药[1]。