荧光定量PCR检测HBV-DNA与ELISA检测HBsAg对乙型肝炎诊断价值比较

李娟娟 马瑞霞 沙吾库·玛拉提别克

【摘要】目的：对比分析荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测乙型肝炎病毒-脱氧核糖核酸（HBV-DNA）、 酶联免疫吸附测定（ELISA）检测乙肝表面抗原（HBsAg）应用于临床诊断乙肝的具体价值。方法：以我院2019年10月—2021年12月期间收治的100例疑似乙肝患者作为本次研究对象，指定同一名实验室医师（具备高年资、高职称）对其实施荧光定量PCR检测HBVDNA与ELISA检测HBsAg。记录并对比100例疑似乙肝患者HBV-DNA、HBsAg检测阳性情况，计算HBV-DNA、HBsAg对乙肝诊断敏感性及特异性。结果：100例疑似乙肝患者经HBV-DNA检测阳性率为49.00%，经HBsAg检测阳性率为57.00%，数据对比差异不大（P>0.05）；进一步分析可知100例疑似乙肝患者最终确诊乙肝病情52例（52.00%），HBV-DNA检测对乙肝诊断敏感性为92.31%、特异性为97.92%，HBsAg检测对乙肝诊断敏感性为90.38%、特异性为79.17%。结论：应用HBV-DNA检测结果辅助诊断乙肝病情敏感性及特异性均较优。

【关键词】乙型肝炎；HBV-DNA；HBsAg；诊断价值

Comparison of HBV-DNA detection by fluorescence quantitative PCR and HBsAg detection by ELISA in the diagnosis of hepatitis B

LI Juanjuan， MA Ruixia， Shawuku·Malatibieke

Yili State Friendship Hospital， Yili， Xinjiang 835000， China

【Abstract】Objective： To compare and analyze the specific value of the detection of hepatitis B virus-deoxyribonucleic acid （HBV-DNA） by fluorescence quantitative polymerase chain reaction （PCR） and the detection of hepatitis B surface antigen （HBsAg） by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA） in clinical diagnosis of hepatitis B. Methods： 100 suspected hepatitis B patients admitted to our hospital from October 2019 to December 2021 were selected as the research subjects， and the same laboratory physician （with high seniority and professional title） was assigned to detect HBV-DNA by fluorescence quantitative PCR and HBsAg by ELISA.The positive rate of HBV-DNA and HBsAg in 100 suspected hepatitis B patients was recorded and compared， and the sensitivity and specificity of HBV-DNA and HBsAg for the diagnosis of hepatitis B were calculated. Results： The positive rate of HBV-DNA detection in 100 suspected hepatitis B patients was 49.00%， and the positive rate of HBsAg detection was 57.00%，there was little difference in data comparison（P>0.05）；Further analysis showed that 52 cases of 100 suspected hepatitis B patients were finally diagnosed with hepatitis B disease （52.00%），the sensitivity of HBV-DNA detection to hepatitis B was 92.31%，the specificity was 97.92% ， and the sensitivity of HBsAg detection to hepatitis B was 90.38%，the specificity was 79.17%. Conclusion：The sensitivity and specificity of HBV-DNA detection in auxiliary diagnosis of hepatitis B are excellent.

【Key Words】Hepatitis B； HBV-DNA； HBsAg； Diagnostic value

乙型肝炎（下文簡称乙肝）是临床发病率较高的传染性疾病之一，发病原因为乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）感染，发病后势必对患者生活质量及身心健康造成严重影响。早诊断、早治疗是现阶段临床处理乙肝患者的主要原则，但医学工作者对此病辅助诊断方法并未达成共识[1]。基于此，本文将以我院2019年10月—2021年12月期间收治的100例疑似乙肝患者作为本次研究对象，对比分析荧光定量聚合酶链反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）检测HBV-脱氧核糖核酸（DeoxyriboNucleic Acid，DNA）、 酶联免疫吸附测定（Enzyme Linked Immunosorbent Assay，ELISA）检测乙肝表面抗原（hepatitis B surface antigen，HBsAg）应用于临床诊断乙肝的具体价值，以利于为今后临床医生接诊疑似乙肝病例后合理取舍辅助诊断方法提供可靠参考依据，现详述如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

100例疑似乙肝患者中男58例，女42例，年龄19～76岁，平均年龄（48.92±0.27）岁。纳入标准：①因乏力、黄疸、恶心、肝区疼痛等乙肝相关症状前来就诊，需接受进一步检查辅助确诊病情；②对本次研究中涉及的荧光定量PCR检测HBV-DNA、ELISA检测HBsAg等方法具有良好耐受性；③意识清醒，临床病历资料完整；④遵循自愿、独立、记名等原则签署知情同意协议（签署时间为入组前，该协议由本院医学与伦理研究会拟定）。排除标准：①合并其他肝脏疾病；②合并其他感染性疾病；③合并恶性肿瘤疾病；④合并精神系统疾病；⑤处于妊娠期、产褥期等特殊生理时期女性；⑥意识不清；⑦病历资料不全；⑧拒绝签署知情同意协议。

1.2 方法

1.2.1 检测方法 100例疑似乙肝患者均接受荧光定量PCR检测HBV-DNA与ELISA检测HBsAg，指定同一名实验室医师（具备高年资、高职称）完成相关操作。具体如下：（1）仪器设备：安徽中科中佳HC-3018R高速冷冻离心机、杭州博日LineGene-9600Plus荧光定量PCR分析仪、上海科华乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂、帝肯洗板机、帝肯酶标仪、帝肯全自动酶免仪、英科新创酶联免疫试剂等；（2）HBV-DNA：于清晨抽取待检者空腹状态下静脉血液作为检测样本，血样在-20℃条件下保存待用，检测方法为荧光定量PCR，严格按照仪器及试剂相关说明书要求操作；（3）HBsAg：血样获取条件同HBVDNA，将4mL静脉血样分离血清后保存在4℃条件下待用，检测方法为ELISA，严格按照仪器及试剂相关说明书要求操作。

1.2.2 观察指标 （1）阳性率：记录并对比100例疑似乙肝患者HBV-DNA、HBsAg检测阳性情况；（2）敏感性及特异性：以100例疑似乙肝患者随访确诊结果为依据，计算HBV-DNA、HBsAg对乙肝诊断敏感性及特异性。

1.3 统计学方法

采用SPSS 26.0统计学软件进行数据分析。计数资料采用（%）表示，进行χ2检验，计量资料采用（χ±s）表示，进行t检验，P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 阳性率

100例疑似乙肝患者均顺利完成HBV-DNA、HBsAg检测，经分析可知HBV-DNA检测阳性率为49.00%、HBsAg检测阳性率为57.00%，数据对比无统计学意义（P>0.05），如表1。

2.2 敏感性及特异性

进一步分析100例疑似乙肝患者临床资料可知，其最终确诊乙肝52例（52.00%），计算认为HBVDNA检测对乙肝诊断敏感性为92.31%、特异性为97.92%，HBsAg检测对乙肝诊断敏感性为90.38%、特异性为79.17%，具体如表2、表3。

3 讨论

乙肝是现阶段严重威胁患者生活质量及身心健康的传染性疾病之一，如何有效提高此病正确检出率已成为广大临床医务工作者、患者本人及家属等多方人群共同关注的热点问题。既往临床工作中认为HBeAg检测结果对诊断乙肝病情具有重要的指导意义，是一种能够准确评价机体免疫耐受因子、病毒复制的指标[2]。但近年来研究认为[3]，部分肝癌患者或其他不明原因肝脏疾病患者机体内可能存在隐匿性HBV感染，若仅依据HBeAg检测结果则不能够真实判断HBV感染及复制情况，此外该指标无法及时、动态评估HBV传染危险性。另有研究认为[1]，部分乙肝患者机体内HBsAg检测结果可能呈阴性，分析原因与HBV基因突变、HBV-DNA与肝细胞染色体整合从而使血清中缺失HBV颗粒等因素有关[4]。HBV-DNA是HBV遗传物质基因，能够准确反映机体内HBV复制情况[5]。近年来越来越多的研究资料指出，HBV-DNA属于乙肝病毒的核心组成部分，因此检测该指标对明确机体HBV感染情况具有直接性、高灵敏性及特异性等优势，相较于乙肝病毒核心颗粒中可溶性蛋白质HBeAg而言，在乙肝病情活动期、非活动期等不同时期均对临床疾病诊治工作具有指导意义[6]。本文也已通过回顾性分析100例疑似乙肝患者临床资料后证实，HBV-DNA检测阳性率为49.00%，经HBsAg检测阳性率为57.00%，但HBVDNA检测对乙肝诊断敏感性、特异性均高于HBsAg检测，此结论与赵棉[7]等人研究結果相符。

综上所述，应用HBV-DNA检测结果辅助诊断乙肝病情敏感性及特异性均较优，值得在今后实际工作中参考使用。

参考文献

[1] 刘瑜.慢性乙肝合并肝硬化患者血清谷丙转氨酶、乙肝表面抗原水平与肝功能的相关性分析[J].中外女性健康研究，2018，26（11）：138，155.

[2] 龚蔷.HBV-DNA、乙肝两对半和肝功能的联合检测对慢性乙肝患者的临床意义[J].世界临床医学，2017，11（7）： 230.

[3] 周洁.乙肝血清学标志物定量和HBV DNA定量联合检测在乙肝病毒感染诊断中的应用[J].临床医药文献电子杂志，2018，5（46）：132.

[4] 温小云，方先松，邱芳.乙肝病毒标记物阳性表型血清标本乙型肝炎病毒（HBV）-DNA临床检验分析的应用价值探讨[J].当代医学，2016，22（3）：63-64.

[5] 卢雁英，李少芳，赵丽萍.乙肝病毒血清标志物与HBVDNA的检测结果分析[J].中外医学研究，2013（19）：81-82.

[6] 王海宁，李万顺，孙巨军.乙肝病毒血清标志物、外周血T淋巴细胞HBV- DNA的相关性分析[J].现代检验医学杂志，2016，31（4）：113-116.

[7] 赵棉，张力，赵亚妮. HBV DNA定量与乙肝血清学标志物定量联合检测乙肝病毒感染的效果分析 [J]. 实用临床医药杂志，2018，22（15）：37-40.