新疆昌吉地区不同民族Rh阴性献血者表型及基因频率分布调查

付 辉，姚秀丽

新疆维吾尔自治区昌吉州中心血站检验科，新疆昌吉 831100

Rh血型是人类的一种遗传性状，其重要性在临床上仅次于ABO血型系统，不同地域、不同民族Rh血型分布存在多态性和复杂性。昌吉地区位于天山北麓，是一个回族自治州，居住民族主要为汉族(72.2%)、回族(10.8%)、哈萨克族(10.3%)、维吾尔族(4.9%)，无偿献血者主要人员也是这4个民族。本文对昌吉地区2012-2020年确认为RhD阴性的无偿献血者按民族、Rh血型分布进行回顾性分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1标本来源 2012年1月至2020年12月昌吉州中心血站的初次无偿献血者85 174人份血液，其中汉族、回族、维吾尔族、哈萨克族4个民族献血者血液83 861人份。

1.2仪器与试剂 Metic-200全自动血型分析仪(深圳爱康)；KA-2200型离心机(日本久保田)；单克隆IgM和IgG抗-D混合试剂[IMMUCOR宜美康(加拿大)生物制品有限公司]；IgG抗-D试剂(北京金豪制药股份有限公司)、IgG抗-D试剂、直接抗人球蛋白试剂、抗-C、抗-c、抗-E、抗-e标准血清、抗体筛选细胞、抗体鉴定细胞(上海血液生物医药公司)、凝聚胺试剂(珠海贝索生物技术有限公司)。

1.3方法

1.3.1Rh阴性初筛试验 使用IMMUCOR宜美康单克隆IgM和IgG抗D混合试剂在全自动血型分析仪上进行RhD初筛检测。

1.3.2Rh阴性确认试验 使用IMMUCOR宜美康单克隆IgM和IgG抗D混合试剂、北京金豪制药股份有限公司IgG抗-D试剂、上海血液生物医药公司IgG抗-D试剂，3种不同抗-D试剂，对初筛阴性者的受检红细胞进行间接抗人球蛋白试验(IAT)，同时做阴、阳性对照，观察试验结果，如果均为阴性则判定为Rh阴性，排除D变异性。

1.3.3Rh血清学表型鉴定 分别用抗-C、抗-c、抗-E、抗-e标准血清对Rh阴性标本进行生理盐水试管法血清学分型。

1.4统计学处理 采用SPSS17.0软件进行数据分析，基因频率计算方法采用文献[1]中Hardy-Weinberg遗传平衡检验方法进行吻合度检验，通过基因单倍型计算出各个表型的理论值，并对观察值与理论值进行χ2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1Rh阴性检出率 4个民族初次献血者83 861人份血液中，确认RhD阴性献血者血液904人份，其中汉族、回族、维吾尔族、哈萨克族RhD阴性检出率分别为0.65%、1.47%、4.39%、3.27%；4个民族间RhD阴性检出率比较，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 昌吉地区RhD阴性献血者各民族阴性分布

2.2Rh阴性血型表型分布 汉族人群的Rh阴性表型基因频率由高到低依次为dccee(58.14%)、dCcee(30.32%)、dccEe(6.11%)、dCCee(3.85%)、dccEE(0.90%)、dCcEe(0.45%)、dCCEe(0.23%)，回族人群的Rh阴性表型频率由高到低依次为dccee(71.29%)、dCcee(22.77%)、dccEe(3.96%)、dCCee(0.99%)，维吾尔族人群的Rh阴性表型基因频率由高到低依次为dccee(87.96%)、dCcee(10.19%)、dccEe(1.39%)、dCcEe(0.46%)，哈萨克族人群的Rh阴性表型频率由高到低依次为dccee(87.59%)、dCcee(11.72%)、dccEe(0.69%)。4个民族Rh阴性表型分布比较，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 新疆昌吉地区主要民族Rh阴性血型表型分布及基因频率[n(%)]

2.3Rh阴性献血人群单倍型基因频率 昌吉地区4个民族Rh阴性献血人群单倍型基因频率见表3。维吾尔族dce(93.788 6%)、哈萨克族dce(93.587 5%)单倍型基因频率接近，回族单倍型基因频率dce(84.431 7%)介于维吾尔族、哈萨克族和汉族之间。经Hardy-Weinberg吻合度检验，汉族人群观察值与理论值差异有统计学意义(P<0.05)，回族、维吾尔族、哈萨克族人群观察值与理论值差异无统计学意义(P>0.05)，回族、维吾尔族、哈萨克族调查数据符合Hardy-Weinberg遗传平衡。

2.4昌吉地区与其他地区Rh阴性单倍型基因频率分布比较 昌吉地区汉族单倍型基因频率与国内宁夏、南昌地区相近，昌吉地区与其他地区Rh阴性单倍型基因频率分布比较见表4。

表3 Rh阴性献血人群单倍型基因频率(%)

表4 昌吉地区与其他地区或民族Rh阴性单倍型基因频率分布比较(%)

3 讨 论

Rh阴性检出率及表型分布在人种间存在明显差异，昌吉地区是多民族融合聚居，总阴性检出率为1.08%，明显高于重庆地区(0.466%)[3]和洛阳地区(0.46%)[4]。因而本次调查也体现出昌吉地区民族Rh阴性血型分布特点。本次调查结果显示，维吾尔族和哈萨克族人群RhD阴性检出率远高于汉族、回族，汉族人群阴性检出率(0.65%)与文献[5]报道的汉族人群阴性检出率(0.74%)除去D变异型(0.14%)后的阴性检出率接近，高于文献[6]报道的新疆北部地区(0.24%)；回族人群阴性检出率(1.47%)高于文献[5]报道的回族人群阴性检出率(0.53%)除去D变异型(0.05%)后的阴性检出率及宁夏地区阴性检出率(0.54%)[1]。本次调查回族人群RhD阴性检出率高于汉族(P<0.05)。考虑原因可能是：(1)昌吉地区是回族自治州，回族人口数量比例占全州人口第二位。(2)与本次调查研究对象选择的周期较长、地域广有关，昌吉地区多次荣获全国无偿献血先进城市，采血车定期走乡镇、下农村，去广大农牧区采集血液，代表了一定区域性。本次调查维吾尔族人群RhD阴性检出率(4.39%)低于文献[5]报道维吾尔族人群阴性检出率(5.92%)除去D变异型(0.37%)后的阴性检出率，与新疆维吾尔自治区博乐地区(4.78%)[7]，以及文献[8]报道调查的新疆维吾尔自治区北部地区维吾尔族人群的RhD阴性检出率(3.90%～5.17%)接近。哈萨克族人群阴性检出率(3.27%)高于文献[2]报道的新疆维吾尔自治区北部地区(2.97%)、文献[5]报道的哈萨克族人群阴性检出率(1.74%)除去D变异型(0.25%)后的阴性检出率，与新疆维吾尔自治区博乐地区阴性检出率(3.6%)[7]接近。文献[8]报道新疆维吾尔自治区北部地区哈萨克族人群的RhD阴性检出率为2.95%～4.70%。

在Rh阴性表型方面，本次调查4个民族中占比最高的分型均为dccee型，这与既往报道的我国昆明地区[9]、潍坊地区[10]情况基本相符，其中维吾尔族(87.96%)与哈萨克族(87.59%)近似，高于文献[5]报道的84.37%及72.92%，与乌鲁木齐地区[11]维吾尔族(86.11%)相近。其次是dCcee型，汉族最高(30.32%)，回族为22.77%，与文献[1]报道宁夏回族自治区的汉族(28.80%)、回族(23.77%)相近。

在Rh阴性献血人群单倍型基因频率方面，本研究结果显示，昌吉地区各民族Rh阴性单倍型频率特点及与其他地区比较，昌吉地区汉族人群Rh阴性单倍型频率与宁夏回族自治区、南昌地区[1,12]Rh阴性献血者单倍型基因频率比较，差异无统计学意义(P>0.05)，体现出我国汉族人群Rh阴性分布特点。在本调查中，汉族Rh阴性无偿献血者人群中，观察值与理论值差异有统计学意义，Hardy-Weinberg吻合度不好，分析原因可能是由于外来人员增多、迁移等，昌吉地区掺入外来基因，使原来群体的基因频率有所改变。昌吉地区回族献血者观察值与理论值调查数据符合Hardy-Weinberg平衡，吻合度良好。昌吉地区回族人群Rh阴性单倍型频率与文献[1]报道的宁夏回族自治区回族近似，介于汉族与维吾尔族、哈萨克族之间，有本民族基因频率分布特点。昌吉地区维吾尔族、哈萨克族献血者观察值与理论值调查数据符合Hardy-Weinberg平衡，吻合度良好。维吾尔族、哈萨克族人群Rh阴性单倍型频率相似程度较高，与其他地区及人群比较，存在明显区别，与德国、高加索白种人[2]较为相似，但基因组合体频率不同。昌吉地区哈萨克族人群Rh阴性单倍型频率与新疆维吾尔自治区北部地区哈萨克族[2]单倍型频率比较，差异无统计学意义(P>0.05)。本次调查结果显示，昌吉地区汉族Rh阴性C和E抗原频率明显高于维吾尔族、哈萨克族、回族(P<0.05)。

综上所述，昌吉地区Rh阴性无偿献血者中，汉族、回族、维吾尔族、哈萨克族阴性检出率、Rh分型及单倍型基因频率有本民族、地域性特征。