高危型人乳头瘤病毒联合薄层液基细胞学对宫颈癌及癌前病变患者诊断效能的影响

赵 卫，刘萌萌

洛阳市疾病预防控制中心门诊部，河南 洛阳 471023

宫颈癌是临床妇科多发恶性肿瘤疾病，严重威胁女性生命健康，需及时采取可靠诊疗措施［1-2］。由于宫颈癌前病变进展至宫颈癌需较长时间，而早期宫颈癌具有可治愈性，因此及早确诊、及时治疗具有重要意义［3-4］。高危型人乳头瘤病毒（HR-HPV）检测是临床诊断宫颈癌常用的诊断方式，具有良好灵敏性，但单独应用时极易出现假阳性率高现象，导致特异度相对较低。近年来，薄层液基细胞学（TCT）逐因具有可重复性、非创伤性特点逐渐受到临床关注，但在宫颈早期病变诊断中漏诊可能性较大。为此，研究尝试探讨HR-HPV联合TCT对宫颈癌及癌前病变诊断效能的影响，现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2016 年2 月—2018 年11 月洛阳市疾病预防控制中心166 例疑似宫颈癌患者作为研究对象。纳入标准：均存在宫颈炎症状，均未处于月经期，均无子宫颈锥切或子宫切除病史，均无盆腔放疗史，既往无宫颈癌及癌前病变病史，患者均知情并签订知情同意书。排除标准：存在其他生殖系统恶性肿瘤疾病，处于月经期。研究对象年龄28～64 岁，平均年龄（41.05±4.73）岁，孕次0～6 次，平均孕次（3.02±0.54）次，产次0～4 次，平均产次（2.14±0.27）次，其中伴有宫颈糜烂118 例。研究经洛阳市疾病预防控制中心医学伦理委员会审批通过。

1.2 方法

正在月经期女性应该在月经结束后72 h接受检查，检查前24 h 禁止性生活，不在月经期的女性均需于检查前72 h 禁止性生活、阴道内用药、阴道冲洗。均经由常规4点取材活检，行病理组织学检查，于阴道镜下活检，分别对0、3、6、9 点等病变处取样后采用中性福尔马林（10%）将病理组织标本固定后送至病理科进行检查。（1）HR-HPV 检查方法：采用窥阴器暴露宫颈，将宫颈与宫颈周围黏液擦拭干净，于宫颈外口处采用专用采样刷（由美国Digene公司提供）采集标本，逆时针旋转（3周），并停留10 s，于存有1 mL保存液的标本保存管内放置分泌物标本，密封，保存于2～8 ℃条件下。采用聚合酶链式反应（PCR）荧光法、实时定量PCR 仪检测HR-HPV，共13 种（68、59、58、56、52、51、45、39、35、33、31、18、16）。（2）TCT 检查方法：于宫颈口、宫颈管内采用TCT 专用毛刷（由美国Digene 公司提供）采集脱落细胞，完成后立即将脱落细胞样本放置于有细胞保存液的TCT 专用取样瓶中，进行漂洗，并摇晃均匀，确认密封好后，送检。采用全自动细胞制片机（美国赛迪公司）进行制片，保存完好上皮覆盖率在10%以上为满意涂片，之后采取巴氏染色，进行镜检。

1.3 诊断标准

（1）HR-HPV 诊断标准［5］：RLU/CO 比值≥1.0 判定为阳性。（2）TCT 诊断标准［6］：采用TBS 分级系统对薄层细胞进行分级。①细胞学显示正常。②细胞学显示良性改变。③细胞学显示异常改变，分为非典型性鳞状细胞、低度鳞状上皮内病变［轻度不典型增生病变（CINⅠ）及HPV 感染所致的细胞改变］、高度鳞状上皮内病变［中度CIN（CINⅡ）、重度CIN（CINⅢ）］、鳞癌（SCC）。非典型性鳞状细胞及以上判定为阳性。（4）任一结果呈阳性则判定为联合诊断阳性。（5）CINⅠ及以上判定为病理活检阳性。

1.4 观察指标

（1）病理结果。（2）HR-HPV、TCT 检查结果。（3）HR-HPV、TCT 诊断效能。（4）对比不同CIN 分级与宫颈癌患者HR-HPV、TCT阳性率。

1.5 统计学方法

采用SPSS 25.0 软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用t 检验。计数资料以例数和百分比（%）表示，组间比较采用χ2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 病理结果

病理结果证实，在所有166 例疑似宫颈癌及癌前病变患者中，炎症74 例，宫颈癌及癌前病变患者92 例，包括CINⅠ级16 例，CINⅡ级20 例，CINⅢ级24 例以及宫颈癌32例。

2.2 HR-HPV、TCT检查结果

HR-HPV 检查阳性94 例，阴性72 例，其中误诊18例，漏诊16 例。TCT 检查阳性86 例，阴性80 例，其中误诊17 例，漏诊23 例。两者联合检查108 例阳性，58 例阴性，其中误诊18例，漏诊2例，见表1。

表1 HR-HPV、TCT检查结果 例

2.3 HR-HPV、TCT诊断效能情况

HR-HPV 联 合TCT 诊 断 准 确 率87.95% （95%CI 为0.758～0.903） 高 于 两 者 单 项 检 查79.52% （95%CI 为0.681～0.867）、75.90%（95%CI 为0.662～0.831），敏感度97.83%（95%CI 为0.736～0.890）高于两者单项检查，诊断敏感度82.61%（95%CI为0.736～0.890）、75.00%（95%CI 为0.653～0.827），差 异 有 统 计 学 意 义（P＜0.05）。HR-HPV 联合TCT 诊断特异度75.68%（95%CI 为0.648～0.840） 与 两 者 单 项 检 查75.68% （95% CI 为0.648～0.840）、77.03%（95%CI 为0.663～0.851）相比，差异无统计学意义（P＞0.05），见表2。

表2 HR-HPV、TCT诊断效能情况 例（%）

2.4 不同CIN 分级与宫颈癌患者HR-HPV、TCT 阳性率情况

宫颈癌患者HR-HPV、TCT 阳性率100.00%、96.97%高于CINⅢ级（74.07%、66.67%）、CINⅡ级（72.22%、61.11%）、CINⅠ级患者（71.43%、57.14%），不同CIN 分级患者HR-HPV、TCT 阳性率，差异无统计学意义（P＞0.05），见表3。

表3 不同CIN分级与宫颈癌患者HR-HPV、TCT阳性率情况 例（%）

3 讨论

相关资料表明，宫颈癌发病率位居发女性妇科肿瘤疾病的第二位，且近年来呈现不断升高趋势，发病人群则呈现年轻化趋势，防治形势较为严峻［7-8］。临床实践显示，宫颈病变进展至宫颈癌通常需10年左右，若及时确诊宫颈癌及癌前病变，给予科学性治疗，患者5 年生存率高达90%，且宫颈癌是目前唯一经医学干预可降低发病与死亡风险的恶性肿瘤疾病［9-10］。因此，及早筛查、确诊对实现早预防、早治疗具有关键性作用。但宫颈癌及癌前病变无特异性临床症状，临床表现与月经异常、阴道感染相似，极易出现误漏诊现象。故积极探索较为可靠的诊断方式至关重要。

宫颈癌前病变及宫颈癌发生的关键环节为HPV生殖道持续感染，因此临床多采取HR-HPV诊断宫颈癌，主要是通过第二代杂交捕获法进行检查，具有较好敏感性［6］。但90%左右HPV 感染者可于2 年内自然消退，HR-HPV 检测结果呈现阳性仅可反映存在HPV感染，而长期持续感染才可能引发宫颈癌，从而导致假阳性风险增加，降低诊断特异度，影响诊断效能，不适宜单独应用［7］。TCT 检测方法是一种新型宫颈癌病变筛查、诊断方法，主要采用TCT 专用毛刷于宫颈口、宫颈管内采集脱落细胞，取出标本后立即装入细胞保存液的TCT 专用取样瓶中，可最大限度保留标本，通过程序化处理保存液中细胞，可有效分离炎性细胞、血液与上皮细胞，成功获取存在诊断意义的上皮细胞［8］。同时，与常规巴氏染色操作相比，TCT 检测可显著减少重复操作频次，还可明显提高薄片细胞富集率及清晰度，有助于减少漏诊现象［9］。但有文献指出，TCT 检测仅可收集宫颈表层细胞，难以采集宫颈深层细胞，可能因取材、制片质量因素导致诊断偏差，还极易导致过度诊断现象发生，从而影响诊断价值［10］。本研究结果显示，HR-HPV 联合TCT 诊断准确率87.95%、敏感度97.83%高于两者单项检查，可见HR-HPV联合TCT可显著提高诊断准确率、敏感度。本研究还显示，两者联合诊断特异度与单项检查无差异，提示HR-HPV联合TCT不影响诊断特异度。

此外，本研究通过对比发现，宫颈癌患者HR-HPV、TCT 阳性率高于CINⅢ级、CINⅡ级、CINⅠ级患者，说明HR-HPV 与TCT 能有效鉴别宫颈癌与癌前病变，能进一步为临床诊治提供可靠信息。但本研究数据还表明，不同CIN 分级患者HR-HPV、TCT 阳性率差异无统计学意义，可能受本研究样本量限制干扰，今后需扩大样本量做进一步分析与探讨，以更加明确HR-HPV 与TCT 在不同CIN 分级中的检测价值。

综上可知，HR-HPV 联合TCT 应用于宫颈癌及癌前病变患者中诊断价值较高，有助于为临床提供参考依据，且能有效鉴别宫颈癌与癌前病变，值得临床推广。