桂西地区代谢综合征人群亚甲基四氢叶酸还原酶基因的分布特点

邓富鸿，梁庆祝，李晓蕾，陈凤华，韦必晓，陈秀林，谷梅金，李 雪

（百色市人民医院，广西 百色 533000）

代谢综合征（MS）是指人体的蛋白质、脂肪、糖等物质出现代谢紊乱的一组复杂症候群。Lu等[1]报道，我国MS 的发病率为33.9% ，我国目前约有4.5 亿人患有MS。MS 是碳水化合物、脂肪、蛋白质等多种代谢紊乱在同一个体的集合，其重要组成部分为腹型肥胖、糖调节受损（或糖尿病）、血脂异常及高血压。MS 是复杂的遗传因素、环境因素相互作用的结果。MTHFR 是同型半胱氨酸（Hcy）和叶酸代谢过程中的关键酶，编码MTHFR 的基因，存在多种突变，其中最常见的突变为C677T 基因多态性（MTHFR 677 位点CC 型为野生型，CT 型为杂合型，TT 型为纯合型）。MTHFR 基因C677T 突变可导致酶的活性及耐热性下降，影响DNA 甲基化和核酸的稳定性[2]。酶活性的降低可干扰Hcy 的甲基化途径，使血浆Hcy 的水平升高，引起高Hcy 血症，诱发脂肪等组织出现胰岛素抵抗[3-4]。孙红等[5]研究表明，MTHFR 基因C677T 突变是中国南方人MS 的主要预测因子。MTHFR 基因C677T 点突变，其频率分布受人种、地域等因素的影响较大[6]，其多态性在国内外的研究中尚存在争议。目前，对于桂西地区MS 人群MTHFR 基因多态性分布的研究报道较少。本研究旨在探讨桂西地区MS 人群MTHFR 基因的分布特点。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取桂西地区的680 例MS 患者（其中壮族362 人、汉族318 人）和1038 例健康人（其中壮族683 人、汉族355 人）作为研究对象，其年龄为21 ～83 岁。将其中680 例MS 患者设为MS 组，将其中1038 例健康人设为对照组。所有研究对象均为在本地区居住5 年以上的三代纯正壮族人和三代纯正汉族人。MS 的诊断标准，沿用2017 年中华医学会糖尿病学分会制定的《中国2 型糖尿病防治指南建议》的诊断标准：1）腹型肥胖：腰围，男性＞90 cm，女性＞85 cm。2）高血糖：空腹血糖＞6.1 mmol/L，或糖负荷后2 h 血糖＞7.8 mmol/L 和（或）已确诊患糖尿病并接受治疗者。3）高血压：血压＞130 mmHg（收缩压）/85 mmHg（舒张压） （l mmHg=0.133 kPa）或已确诊患高血压并接受治疗者。4）空腹血清高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）＜1.04 mmol/L。5）空腹血清甘油三酯＞1.70 mmol/L。符合以上3 项或3 项以上标准即可诊断为MS[7]。对照组健康人的纳入标准是：其年龄、性别、工作、生活环境等背景特征与MS组患者相匹配；为在我院体检中心进行体检的健康成年人。其排除标准是：存在可导致核酸代谢亢进的因素（如甲状腺功能亢进症、血液系统疾病或肝功能异常）；患有恶性肿瘤且正在接受化疗或放疗；合并有继发性糖尿病或继发性高血压。

1.2 方法

1.2.1 临床资料的收集 收集两组研究对象的性别、年龄、姓名、民族等信息，详细询问其既往史、家族史、有无异族通婚史、近期有无服药情况等，测量其清晨空腹状态下的血压、体重、腰围、身高。

1.2.2 生化指标检测 采用日立7600-020E 全自动生化分析仪检测两组研究对象清晨空腹状态下血清甘油三酯、HDL-C、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、总胆固醇和空腹血糖的水平。

1.2.3 MTHFR 基因C677T 多态性的检测 采集两组研究对象在空腹状态下的静脉血，采用PCRRFLP 法检测MTHFR 基因C677T 位点的基因型。检测所用的试剂盒为人全血DNA 试剂盒（编号：YZB/ 国2671-2015 ；生产厂家：深圳泰乐德医疗有限公司）。具体的检测操作由我院检验科完成。扩增反应完毕后，通过所收集的荧光信号，对检测结果逐一进行分析，将Y 轴设定为FAM 信号（代表基因型T），将X 轴设定为VIC 信号（代表基因型C）。在基因分型图上，靠近原点处样品为NTC，靠近X 轴样品为CC 基因型，对角线位置样品为CT 基因型，靠近Y 轴样品为TT 基因型。

1.3 观察指标

比较两组研究对象的各项临床指标（包括年龄、腹围、收缩压、舒张压）和生化指标（包括血清肌酐、空腹血糖、血清总胆固醇、血清甘油三酯、血清LDL-C、血清HDL-C 和血清Hcy）。比较两组研究对象MTHFR 基因型及等位基因的分布情况。

1.4 统计学方法

运用Hardy-Weinberg 平衡法检验样本的群体代表性，采用基因计数法计算各组基因型、等位基因频率。用SPSS 17.0 软件处理本研究中的数据，非正态分布的计量资料用中位数（四分位数间距）表示，正态分布的计量资料用均数± 标准差（±s）表示，各组间计量资料的比较均采用t检验；计数资料用% 表示，用χ² 检验，P＜0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组研究对象各项临床指标、生化指标的比较

MS 组患者血清肌酐的平均水平为（87.13±43.83）μmol/L，对照组健康人血清肌酐的平均水平为（84.84±14.55）μmol/L，二者相比差异无统计学意义（P＞0.05）。MS 组患者的年龄、腹围、舒张压、收缩压、血清总胆固醇、甘油三酯、LDL-C、HDL-C、Hcy 及空腹血糖的水平与对照组健康人相比，差异均有统计学意义（P＜0.05）。详见表1。

表1 两组研究对象各项临床指标、生化指标的比较（±s）

表1 两组研究对象各项临床指标、生化指标的比较（±s）

项目 MS 组（n=680） 对照组（n=1038） t 值 P 值年龄（岁） 45.40±12.20 38.87±11.67 -11.1 ＜0.01腹围（cm） 93.80±2.97 83.90±2.97 -67.7 ＜0.01血清肌酐（μmol/L） 87.13±43.83 84.84±14.55 -1.32 0.19收缩压（mmHg） 138.42±17.62 118.28±8.92 -27.6 ＜0.01舒张压（mmHg） 89.03±35.71 75.58±7.40 -9.68 ＜0.01空腹血糖（mmol/L） 6.36±2.42 5.11±0.41 -13.3 ＜0.01血清总胆固醇（mmol/L） 5.44±1.19 4.88±0.91 -10.4 ＜0.01血清甘油三酯（mmol/L） 3.18±2.48 1.08±0.32 -22.0 ＜0.01血清LDL-C（mmol/L） 3.15±2.82 2.85±0.81 -3.31 ＜0.01血清HDL-C（mmol/L） 1.25±0.76 1.49±0.38 8.55 ＜0.01血清Hcy（μmol/） 14.63±5.32 12.60±2.97 -9.07 ＜0.01

2.2 两组研究对象MTHFR 基因型及等位基因分布情况的比较

在MS 组 患 者 中，MTHFR 基 因C677T 位 点为CC 基因型的患者有381 例（占56.0%），为CT 基因型的患者有253 例（占37.2%），为TT 基因型的患者有46 例（占6.8%）；在对照组健康人中，MTHFR 基因C677T 位点为CC 基因型的患者有739 例（占71.2%），为CT 基因型的患者有254 例（占24.5%），为TT 基因型的患者有45 例（占4.3%）。两组研究对象MTHFR 基因C677T 位点基因型和等位基因的分布相比，差异有统计学意义（χ2=41.65，P＜0.05；χ2=39.67，P＜0.05）。详见表2。

表2 两组研究对象MTHFR 基因型及等位基因分布情况的比较[ 例（%）]

3 讨论

MS 是一种多基因遗传性疾病，其发生发展与遗传因素、环境因素关系密切。在引起MS 的危险因素中，高血压、肥胖、脂代谢紊乱、糖代谢紊乱及胰岛素抵抗等因素均存在大量的基因多态性，这些基因多态性在MS 中发挥着至关重要的作用。孙红等[5]研究显示，舒张压、收缩压、腰臀比、腰围、甘油三酯、LDL-C、血尿酸、空腹血糖在非MS 组和MS 组患者间有统计学差异（P＜0.05）。唐伟等[8]研究显示，非MS 组与MS 组两组患者间的C677T 位点基因型、等位基因频率相比差异有统计学意义（P＜0.05）。Golledge 等[9]对土耳其MS 患者（n=78）和正常对照组人群（n=100）进行研究发现，在MS 组患者中，MTHFR 基因C677T 的突变频率较正常对照组人群高。本研究表明，MS 组患者的年龄、腹围、收缩压、舒张压、血清总胆固醇、甘油三酯、HDL-C、LDL-C、Hcy 和空腹血糖的水平与对照组健康人相比，差异均有统计学意义（P＜0.05）。两组研究对象MTHFR基因C677T 位点基因型、等位基因的分布比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。随着基因组学和个体化医学的发展，一些研究者发现基因不仅决定个体的遗传特征，基因缺陷也可遗传，能导致一个家族或种族对某种疾病出现易感性。桂西地区的常住居民以壮族、汉族人群为主，相同的生活习性、生活环境，民族间长期文化与思想的融合，使得壮、汉两民族间具有相似的饮食结构。对该地区居民进行MTHFR 基因检测有助于了解携带MS 易感基因人群的分布情况，从而对MS 易感人群实施有针对性的干预，降低MS 的发病率，也为MS 的治疗提供坚实的理论基础，并开创出新的思路。

综上所述， 桂西地区MS 人群多携带有MTHFR 基因C677T 位点的CT/TT 基因型。