匹多莫德联合氨溴特罗对支原体肺炎患儿血清KL-6、GM-CSF、炎症因子水平及免疫功能的干预作用

解婷婷，卢 芳，梁 峰，田学华，左园园

河南省直第三人民医院：1.门诊调剂室：2.检验科，河南郑州 450006

支原体肺炎(MP)为儿科多发呼吸系统疾病，在学龄儿童中具有较高发病率，若患儿未得到及时、有效的干预，随病情进展可影响生长发育，甚至可造成死亡[1-2]。阿奇霉素为临床治疗MP的常用药物，但随着抗菌药物的滥用，其治疗效果明显下降[3-4]。氨溴特罗也是MP重要治疗药物，其能有效扩张支气管，促使痰液排出，在疾病治疗中发挥了重要作用[5]。近年来相关研究发现，MP不仅与炎性反应密切相关，而且与免疫功能有关，存在免疫抑制、免疫蓄积、免疫调节、免疫逃避等现象，而常规抗菌药物等虽能抑制局部炎性反应，但无法纠正免疫功能紊乱，故易造成病情反复，迁延不愈[6]。因此，调节患儿免疫功能逐渐成为MP治疗新的研究方向。匹多莫德为新型免疫调节剂，可促进巨噬细胞及中性粒细胞活化、增殖，提升其趋化性，调节抗炎及促炎因子分泌，且具备抗病毒及抗感染功效[7]。基于此，本研究探讨匹多莫德辅助氨溴特罗在MP治疗中的应用价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2018年3月至2019年10月本院收治的123例MP患儿进行前瞻性研究，依据随机数字表法分为对照A组、对照B组和联合组，每组41例。纳入标准：(1)符合《儿童肺炎支原体肺炎诊治专家共识(2015年版)》[9]中MP诊断标准；(2)X线片检查可见肺部阴影；(3)年龄3～12岁；(4)伴有不同程度发热、咳嗽；(5)肺炎支原体DNA检测结果呈阳性。排出标准：(1)纳入研究前使用过大环内酯类药物、免疫调节剂的患儿；(2)立克次氏体、衣原体感染患儿；(3)合并肝、肾等脏器器质性病变患儿；(4)过敏体质及对研究药物有过敏史的患儿；(5)合并免疫系统、血液系统病变的患儿。3组年龄、性别构成、发病时间、发热时间、病变部位、体质量比较，差异均无统计学意义(P>0.05)，具有可比性，见表1。本研究经医院伦理委员会审核通过(伦理号：765499)，患儿家属知晓本研究并签署知情同意书。

表1 3组一般资料比较

组别n发热时间(x±s,d)病变部位[n(%)]单侧双侧体质量(x±s,kg)对照A组414.34±1.1133(80.49)8(19.51)21.95±3.91对照B组414.29±1.2031(75.61)10(24.39)22.56±4.03联合组414.64±1.1530(73.17)11(26.83)22.35±4.19F/χ21.1030.6320.241P0.3350.7290.787

1.2方法

1.2.1治疗方案 患儿入院后均给予祛痰、镇咳、退热等常规治疗，并静脉滴注注射用阿奇霉素(西安利君制药有限责任公司，国药准字H20020269，每瓶0.5 g)10 mg/kg，每日1次，连用5 d。5 d后改为口服阿奇霉素分散片(西安利君制药有限责任公司，国药准字H20054225，每片0.25 g)，首次口服剂量为10 mg/kg，随后改为1 mg/kg，每日1次，共服用5 d。在此基础上：(1)对照A组给予氨溴特罗口服溶液(北京韩美药品有限公司，国药准字H20040317，每瓶120 mL)治疗，>5岁者每次15 mL，口服，每日2次；3～5岁者每次10 mL，口服，每日2次。(2)对照B组给予匹多莫德胶囊(南京海辰药业股份有限公司，国药准字H20090359，每粒400 mg)治疗，每次400 mg，口服，每日2次。(3)联合组给予氨溴特罗口服溶液及匹多莫德胶囊治疗，用量、用法同对照A组、对照B组。3组均治疗10 d。

1.2.2检测指标 分别于治疗前、治疗10 d后采集患儿空腹静脉血4 mL，以3 500 r/min离心10 min，取上清液保存待测。采用美国Bio-Rad公司Bio-RAD550型酶标仪及配套试剂盒，以酶联免疫吸附试验测定血清Ⅱ型肺泡表面抗原-6(KL-6)、粒细胞巨噬细胞刺激因子(GM-CSF)、炎症因子[干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平；采用免疫速率散射比浊法测定免疫球蛋白(Ig)G、IgE、IgA水平；采用美国BD公司流式细胞仪测定CD3+T细胞、CD4+T细胞比例及CD4+/CD8+比值。

1.3观察指标 (1)治疗10 d后统计3组临床疗效。疗效判断标准[10]：咳嗽等症状消失，体温恢复正常，经X线片检查肺部阴影消失为显效；咳嗽等症状缓解，体温恢复正常，经X线片检查提示肺部阴影明显吸收，但尚未消失为有效；未达到上述标准为无效。总有效率=(显效例数+有效例数)/总例数×100%。(2)统计3组治疗前、治疗10 d后血清KL-6、GM-CSF、IFN-γ、IL-6、TNF-α、IgG、IgE、IgA水平，CD3+T细胞、CD4+T细胞比例，CD4+/CD8+比值及不良反应。

2 结 果

2.13组临床疗效比较 联合组总有效率为92.68%，高于对照A组的73.17%和对照B组的73.17%(P<0.05)。见表2。

表2 3组临床疗效比较[n(%)]

2.23组血清KL-6、GM-CSF水平比较 治疗前3组血清KL-6、GM-CSF水平比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗10 d后3组血清KL-6、GM-CSF水平较治疗前均降低(P<0.05)，且联合组均低于对照A组、对照B组(P<0.05)。见表3。

表3 3组血清KL-6、GM-CSF水平比较

2.33组血清IFN-γ、IL-6、TNF-α水平比较 治疗前3组血清IFN-γ、IL-6、TNF-α水平比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗10 d后3组血清IFN-γ、IL-6、TNF-α水平较治疗前均降低(P<0.05)，且联合组均低于对照A组、对照B组(P<0.05)。见表4。

表4 3组血清IFN-γ、IL-6、TNF-α水平比较

2.43组IgG、IgE、IgA水平比较 治疗前3组IgG、IgE、IgA水平比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗10 d后3组IgG、IgA水平较治疗前均增高(P<0.05)，IgE水平较治疗前均降低(P<0.05)；且联合组、对照B组IgG、IgA水平均高于对照A组(P<0.05)，IgE水平均低于对照A组(P<0.05)。见表5。

表5 3组IgG、IgE、IgA水平比较

2.53组CD3+T细胞、CD4+T细胞比例及CD4+/CD8+比值比较 治疗前3组CD3+T细胞、CD4+T细胞比例及CD4+/CD8+比值比较，差异均无统计学意义(P>0.05)；治疗10 d后3组CD3+T细胞、CD4+T细胞比例及CD4+/CD8+比值较治疗前增高(P<0.05)，且联合组、对照B组高于对照A组(P<0.05)。见表6。

表6 3组CD3+T细胞、CD4+T细胞比例及CD4+/CD8+比值比较

2.63组不良反应发生情况比较 3组不良反应发生率比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表7。

表7 3组不良反应发生情况比较

3 讨 论

当前，临床多采取抗菌药物治疗MP，并辅以镇静、补液、雾化、吸氧、退热等对症处理措施。其中抗菌药物主要包括四环素类、喹诺酮类及大环内酯类，但均存在一定弊端，如喹诺酮类药物可对18岁以下患者骨骼发育造成不良影响，不适用于小儿患者；而四环素类药物可造成牙釉质发育不良、牙齿黄染等；大环内酯类药物在MP中应用广泛，但整体效果不佳[9]。

氨溴特罗也是临床治疗MP的重要药物，其属复方制剂，成分包括盐酸克伦特罗及盐酸氨溴索。其中盐酸氨溴索是黏液溶解剂，可促进呼吸道黏膜浆液腺分泌，降低痰液黏度，增加肺表面活性物质分泌量，增进支气管纤毛运动，便于痰液咳出；而盐酸克伦特罗属选择性β受体激动剂，不仅能溶解黏液、增加纤毛运动，并可松弛平滑肌[10]；同时，氨溴特罗能有效抑制炎症因子生成，缓解气道炎性反应，药物中盐酸克伦特罗及氨溴索成分可产生协同作用，共同发挥定喘、镇咳、祛痰作用，缓解呼吸道症状。郑文莉等[11]研究结果表明，MP患儿在肝素基础上采取氨溴特罗治疗后，临床症状得到明显缓解。此外，匹多莫德在MP中也较常用，是一种人工合成免疫刺激调节剂，可刺激非特异性自然免疫、细胞免疫、体液免疫产生效应，如激活单核细胞、自然杀伤(NK)细胞、中性粒细胞功能等，且匹多莫德还可促使淋巴细胞亚群增殖，提升淋巴细胞亚群比例与绝对值，增加抗炎因子分泌量，故能不同程度降低炎症因子水平[12]。冯乃超等[13]研究结果显示，MP患儿在常规治疗基础上加用匹多莫德后，患儿免疫功能得到显著改善。本研究采用匹多莫德联合氨溴特罗治疗MP患儿，结果显示，联合组总有效率为92.68%，高于对照A组的73.17%和对照B组的73.17%(P<0.05)，且IFN-γ、IL-6、TNF-α水平降低幅度也更为明显(P<0.05)。IFN-γ、IL-6、TNF-α均为临床评估炎性反应的常用指标，故上述结果表明氨溴特罗及匹多莫德联合用药在调节MP患儿机体炎性反应程度方面更具明显优势，进而提高疾病治疗效果。主要原因在于盐酸氨溴索联合匹多莫德可有效调节巨噬细胞功能，促进表面活性物质于肺表面细胞内合成，加速黏性分泌物溶解，并可扩张支气管，从而提高治疗效果。

免疫功能状态与MP的发生、发展也具有密切关联。机体正常免疫应答主要依靠免疫细胞间相互协调及制约，构成适度免疫应答，而T淋巴细胞亚群为评估机体免疫功能状态的敏感性指标。其中：CD3+T细胞比例可直接体现参与免疫应答的免疫活性细胞数目；CD4+T细胞属辅助性T细胞，能促进B淋巴细胞分泌抗体，以此调节体液免疫；而CD4+/CD8+比值则能间接反映机体免疫功能状态，其比值较高则表明自身免疫功能处于较好状态，比值紊乱则会导致免疫功能异常[14]。IgG、IgE、IgA则为体液免疫代表性指标，IgA为机体黏膜局部抗感染免疫主要抗体，可防御呼吸道及消化道感染；IgG则具备抗病毒、抗毒素、抗菌等功能；IgE水平增高可导致MP患儿病情进展，引起哮喘样症状。此外，GM-CSF为粒细胞激活因子，可激活中性粒细胞或巨噬细胞等，并能加剧肺泡组织炎症损伤程度；KL-6则主要表达于支气管腺浆液细胞、呼吸性细支气管上皮细胞、Ⅱ型肺泡细胞，其表达水平可特异性反映肺损伤程度及肺泡炎症损伤情况，能为临床评估MP预后提供客观依据[15]。本研究中，治疗10 d后3组T淋巴细胞亚群指标及体液免疫指标、GM-CSF、KL-6水平均较治疗前改善(P<0.05)，而且联合组及对照B组的免疫指标均优于对照A组(P<0.05)，联合组GM-CSF、KL-6水平均优于对照A组及对照B组(P<0.05)。以上结果表明氨溴特罗及匹多莫德均可改善MP患儿免疫功能，减轻炎症损伤，但匹多莫德联合氨溴特罗的治疗效果更佳，主要原因：氨溴特罗可抑制中性粒细胞生成过氧化氢，减少溶酶体生成，减轻气道高反应，从而缓解炎性反应；匹多莫德可促进非特异性及特异性免疫反应，活化NK细胞，加速有丝分裂所致淋巴细胞增殖，增高CD4+/CD8+比值，产生免疫调节功效。本研究结果还显示，3组不良反应发生情况比较，差异无统计学意义(P>0.05)，表明匹多莫德联合氨溴特罗不会增加不良反应发生风险，具有安全性。

综上所述，采用匹多莫德联合氨溴特罗治疗MP，可有效减轻患儿体内炎性反应程度，调节免疫功能，改善GM-CSF、KL-6水平，提高疾病治疗效果，且安全性具有保障。