IgM-κ型M蛋白对尿酸检测的干扰及解决方案*

欧阳伟庆，李嘉燕，隋 洪，梁越媚

东莞康华医院检验科，广东东莞 523000

M蛋白即单克隆免疫球蛋白(Ig)，由浆细胞或B淋巴细胞单克隆恶性增殖所产生，其本质是一种Ig或Ig的片段[1]，多见于多发性骨髓瘤、华氏巨球蛋白血症、恶性淋巴瘤等疾病。近年来，国内外已有多篇研究报道M蛋白对临床生化项目检测的干扰，涉及不同的方法和不同的检测项目[2]。但到目前为止，M蛋白的干扰还未能引起实验人员的足够重视，也缺少方便、可靠的方法排除M蛋白的干扰，往往导致错误结果的发出，给临床诊治带来干扰。因此，笔者通过最近发现的1例IgM-κ型M蛋白血症干扰尿酸酶法尿酸检测结果的案例，尝试寻找一种能够方便、可靠地排除M蛋白干扰的方案，现报道如下。

1 临床资料

患者，男性，71岁。患者因“发现凝血因子缺乏1年余”于2021年3月11日在外院诊治，完善骨髓穿刺等检查后诊断为华氏巨球蛋白血症/淋巴浆细胞淋巴瘤，于3月18-22日行化疗(具体用药及用量不详)，病情稳定后出院。出院后患者未返院复查及规律化疗。10天前患者出现间断腹泻，每周有2～3 d腹泻，每日解3～4次水样便，自行口服思密达等药物可缓解。为进一步治疗，患者于2021年8月20日来本院就诊，以“诊断华氏巨球蛋白血症/淋巴浆细胞淋巴瘤5个月，腹泻10 d”为主诉入院。专科检查：神志清醒，巩膜无黄染，全身皮肤黏膜无出血点及瘀斑，浅表淋巴结未触及肿大；胸骨无压痛，双肺呼吸音清，未闻及干、湿啰音；心律齐，心率71次/分，各瓣膜区未闻及病理性杂音；腹平软，无压痛及反跳痛，肝脾肋下未扪及，肠鸣音正常；生理反射存在，病理征阴性。

入院诊断：华氏巨球蛋白血症/淋巴浆细胞淋巴瘤。

诊治经过：入院后完善相关检查(三大常规、血型、盐水交叉配型、肝功能、肾功能、电解质、心肌酶、凝血4项、β2-微球蛋白、血脂4项、体液免疫5项、乙型肝炎标志物、血清固定电泳、血清蛋白电泳、血及尿游离轻链、尿本周蛋白、大便涂片、大便培养等)，患者拒绝复查骨髓穿刺，拒绝治疗原发病，要求仅止泻、抗炎对症支持治疗。经治疗，患者大便正常，于2021年8月22日自动出院。

2 实验室检查

2021年8月21日实验室检查结果，血型：ABO血型O型，Rh(+)；血常规：白细胞计数2.10×109/L，血红蛋白99 g/L，血小板计数154×109/L，中性粒细胞计数0.77×109/L；大便常规正常，潜血试验(+)；生化指标：清蛋白30.6 g/L，总胆固醇1.62 mmol/L，总胆汁酸10.22 μmol/L，总蛋白63.3 g/L，血清β2-微球蛋白7.13 mg/L；凝血功能：活化部分凝血活酶时间125.10 s，凝血酶原时间26.10 s，纤维蛋白原3.28 g/L；体液免疫指标：补体C4<0.064 2 g/L，IgA 6.14 g/L，IgM 20.2 g/L，血清游离κ轻链为1 307.85 mg/L；尿本周蛋白定性(-)；狼疮抗凝物初筛试验125.60 s，狼疮抗凝物确认试验116.20 s；乙型肝炎标志物：乙型肝炎e抗体(+)，乙型肝炎表面抗原(+)，乙型肝炎核心抗体(+)，乙型肝炎病毒DNA<50 IU/mL。

在进行血清原倍标本检测时，首次检测血清尿酸为-94 μmol/L，尿酸反应曲线见图1，笔者进行了复查，结果为6 μmol/L。本科室使用西门子ADVIA 2400和配套的尿酸酶法尿酸试剂检测血清尿酸，该检测系统的性能验证中尿酸的可报告范围为10倍。笔者查看了其他检查结果，发现血清IgM 20.2 g/L，结合患者病情，考虑目前尿酸检测结果可能与M蛋白干扰有关。为排除干扰，笔者进行了验证。患者血清(原倍)标本清晰透明，分别将原倍标本采用下列方式进行处理：去离子水稀释5、10倍，得到的标本明显混浊；去离子水稀释5、10倍，以3 500 r/min离心10 min，标本上清液清晰透明，底部分离出白色固体；生理盐水稀释5、10倍后标本清晰透明。检测6种处理方式获得的标本(离心的去离子水稀释标本检测上清液)，所有检测结果见表1。结果显示，经去离子水稀释并离心后的血清标本尿酸检测结果明显高于原倍(t=13.960，P=0.046)、去离子水稀释(t=13.028，P=0.049)、生理盐水稀释(t=14.853，P=0.043)标本的尿酸检测结果。

注：A为原倍标本尿酸反应曲线(-94 μmol/L)；B为对照的正常尿酸反应曲线(232 μmol/L)。

表1 患者尿酸检测结果汇总表(μmol/L)

3 讨 论

在临床生化检验中，往往有各种各样的因素会影响检验结果的准确性。因此，重视各项影响因素，使检验结果的准确性得到保障是检验工作者的职责[4-5]。血尿酸作为传统的生化项目，与痛风、心血管疾病、代谢综合征、肾脏疾病等密切相关[6-9]。准确的血尿酸结果对于临床诊治具有重要的参考价值。目前实验室常用的检测方法为尿酸酶-过氧化物酶偶联反应、磷钨酸还原法等。

近年来，高水平M蛋白干扰尿酸酶法尿酸结果的问题时有报道，李江等[10]、赵兴波等[11]曾发表IgG和IgA型高M蛋白血症干扰临床生化项目的病例报道，开始引起人们对M蛋白干扰因素的注意。沈敏娜等[12]、谢春霞等[13]报道采用生理盐水稀释标本能排除M蛋白对生化项目检测的干扰，但是笔者的检测结果与其不一致，可能原因如下：首先，谢春霞等[13]报道的病例中患者的IgM仅为5.56 g/L，而本病例中患者血清IgM为20.2 g/L，生理盐水稀释只能在一定程度上减轻相对低水平M蛋白的干扰，而并不能真正地消除M蛋白的干扰；其次，稀释处理标本的时候应该考虑项目的可报告范围，本实验室使用的检测系统尿酸可报告范围仅为10倍，对于高达一定水平的M蛋白，10倍稀释并不能减轻其干扰。事实上，BERTH等[14]早年报道M蛋白对临床生化项目检测的干扰源于M蛋白与试剂内某些抗人抗体反应，产生沉淀，引起浊度增加。也有研究表明，分析前，M蛋白增多引起的高黏滞综合征及与其体内某些物质的特异结合(如形成巨酶)可以干扰实验分析，影响检测结果；分析中，M蛋白在特定条件下产生沉淀可以干扰比色和浊度分析，或与分析体系中的组分特异或非特异性结合引起假性结果[15]。无论如何，想要排除M蛋白的干扰，最可靠的方法是想办法去除血清中高水平的M蛋白，而不仅仅是通过生理盐水稀释减轻干扰，因为这种方法仅仅适用于较低水平M蛋白的干扰。

本研究结果表明，采用去离子水稀释高水平IgM-κ型M蛋白血清的同时能够析出血清中的M蛋白，从而使标本变浑浊，IgG和IgA型M蛋白也有类似报道[10-11]。对稀释后标本充分混匀后，进行3 500 r/min离心10 min能够把絮状物与血清分离，取上清液进行血尿酸检测即可得到正常的反应曲线，此方法方便、可靠，为日常工作中排除M蛋白对酶法尿酸检测提供了有效的解决方案。