月月青化学成分研究

张盼 封云倩 刘红云 罗国勇

摘要 [目的]阐明民族药月月青的化学成分。[方法]通过利用Sephadex LH-20、MCI gel、硅胶等多种柱色谱方法以及制备薄层法对月月青地上部分进行分离纯化，根据波谱数据并结合文献比对解析化学结构。[结果]从月月青中分离得到8个化合物，分别鉴定为植醇、丹皮酚、聚戊烯醇、1-十二醇、黑麦草内酯、单棕榈酸甘油酯、大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷。[结论]所有化合物均为首次从该植物中分离得到。

关键词 月月青;分离纯化;化学成分;波谱技术

中图分类号 R284.1  文献标识码 A  文章编号 0517-6611（2022）07-0173-03

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2022.07.040

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Study on the Chemical Constituents of Itea ilicifolia

ZHANG Pan， FENG Yun-qian， LIU Hong-yun et al

（College of Pharmacy， Guizhou University of Traditional Chinese Medicine， Guiyang， Guizhou 550025）

Abstract [Objective]To study the chemical constituents of Itea ilicifolia. [Method]Sephadex LH-20， MCI gel， silica gel column chromatography methods coupled with preparative thin-layer method were used to separate and purify compounds from the aerial part of Itea ilicifolia， and the chemical structure was elucidated based on spectral data and comparison with literature data. [Result]8 compounds were finally obtained and identified as phytol， paeonol， polyprenol ， 1-dodecanol， loliolide， glyceryl monopalmitate， physclon-8-O-β-D-glucopyranoside， emodin-8-O-β-D-glucopyranoside， respectively. [Conclusion] All compounds are identified from this plant for the first time.

Key words Itea ilicifolia;Separation and purification;Chemical constituents;Spectroscopic technique

月月青，别名为长穗狗骨、牛尾巴菜等，是虎耳草科鼠刺属植物冬青叶鼠刺（Itea ilicifolia Oliv.），其性平，具清热止咳、滋补肝肾等功效，在民间常用于劳虚咳嗽、咽喉干痛、目赤、跌打损伤、扭伤等疾病的治疗[1]。月月青具有岩生、旱生、喜钙及喜光的生态适应性，为喀斯特地貌的典型优势树种，广泛分布在湖北西部、陕西南部、贵州以及四川部分等地

区，资源丰富[2-3]。目前，关于月月青化学成分的研究较少，从中鉴定的化学成分类型主要包括黄酮类、木脂素类和烷醇类等[4-6]。其中，3-甲酰基-2-芳基苯并呋喃类成分iteafuranal A表现出显著的抗氧化[5]和抗肝癌活性[7]。为进一步明确月月青的化学组成，并为后续活性先导结构的发现奠定基础，笔者对月月青枝叶部分的乙醇提取物开展化学成分研究。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1

仪器。Bruker Avance Neo 400M 核磁共振波谱仪（德国Bruker公司，TMS为内标）;N-1300D 旋转蒸发仪（东京理化器械株式会社）;ME204102电子天平（上海梅特勒-托利多仪器有限公司）;ZF-1三用紫外分析仪（郑州良表仪器设备有限公司）;HDG -9240A电热鼓风干燥箱（上海一恒科学仪器有限公司）;DK-98-Ⅱ电子调温万用电炉（天津天泰仪器有限公司）。

1.1.2

试剂。Sephadex LH 20 凝胶（GE Healthcare Bio Sciences AB 公司）;MCI树脂（日本三菱化学株式会社）;柱层析硅胶和GF254薄层层析硅胶（青岛海洋化工有限公司）;10%硫酸乙醇显色剂;所有溶剂均为工业级，使用前均经过蒸馏处理。

1.1.3 试材。

试验药材于2019 年11月采自贵州省务川仡佬族苗族自治县红丝乡土内村。植物标本由贵州中医药大学药学院王志威副教授鉴定为虎耳草科冬青叶鼠刺（Itea ilicifolia Oliv.），标本现收藏于贵州中医药大学苗医药重点实验室。

1.2 方法

取干燥的月月青枝叶粗粉25.0 kg，常温下以20 L 95% EtOH浸提3次，每次7 d。过滤，合并3次提取液，减压回收乙醇得到總浸膏2.0 kg。总浸膏分散于2 L水中，依次以石油醚（3 L×3）、乙酸乙酯（3 L×3）、正丁醇（3 L×3）进行萃取，减压条件下分别回收溶剂得石油醚部位（P，17.0 g）、乙酸乙酯部位（E，900.0 g）、正丁醇部位（B，200.0 g）。

乙酸乙酯部位经硅胶柱层析，以石油醚/乙酸乙酯进行梯度洗脱（1∶0→0∶1），得到8个亚组分E1～E8。组分E1（5.4 g）经反复硅胶柱层析得化合物1（12.0 mg）和化合物2（7.0 mg）。组分E2（9.2 g）先后经硅胶柱色谱、凝胶柱色谱（二氯甲烷/甲醇1∶1）以及制备薄层色谱得化合物3（18.0 mg）和4（10.9 mg）。组分E5（7.0 g）经MCI柱色谱，得7个亚组分E5A～E5G。其中，组分E5B溶液放置一定时间后析出白色固体，即化合物5（9.5 mg）。E5C（677.1 mg）经反复硅胶柱层析后，薄层制备得化合物6（4.3 mg）。组分E7（3.9 g）以二氯甲烷/甲醇（15∶1）经硅胶柱色谱后得到11个亚组分E7D1～E7D11，其中，组分E7D6溶液放置后析出黄色颗粒物，即化合物7（5.0 mg）。组分E7D9溶液经放置后析出黄色片状物，即化合物8（19.5 mg）。

2 结果与分析

从月月青中分主得到8个化合物，其结构如图1所示。所有化合物均为首次从该植物中分离得到。

2.1 化合物1

黄色油状物;1H NMR（ MHz，CDCl 3）δ 5.40（1H，tq，J=7.0，1.3 Hz，H-2），4.15（2H，d，J=6.9 Hz，H-1），1.99（2H，dt，J=8.6，5.6 Hz，H-4），1.66（3H，d，J=1.4 Hz，H-20），1.52（1H，dt，J=13.3，6.7 Hz，H-15），0.86（6H，J=6.6 Hz，H-16/17），0.85（3H，d，J=6.6 Hz，H-18），0.84（3H，d，J=6.5 Hz，H-19）;13C NMR（151 MHz，CDCl 3）δ 140.47（C-3），123.16（C-2），59.55（C-1），40.01（C-4），39.49（C-14），37.55（C-10），37.48（C-8），37.41（C-12），36.78（C-6），3293（C-7），32.82（C-11），28.12（C-15），25.26（C-5），2494（C-13），24.61（C-9），22.87，22.77（C-16，C-17），1989，19.86（C-18，C-19），16.32（C-20）。以上数据与文献[8]报道的数据基本一致，故将该化合物鉴定为植醇。

2.2 化合物2

粉色油状物;1H NMR（600 MHz，CDCl 3）δ 12.75（1H，s，2-OH），7.63（1H，d，J=8.9 Hz，H-6），6.44（1H，dd，J=8.8，2.5 Hz，H-5），6.42（1H，d，J=2.5 Hz，H-3），3.84（3H，s，4-OCH 3），2.56（3H，s，—COCH 3）;13C NMR（151 MHz，CDCl 3）δ 202.73（—COCH 3），166.28（C-2），16544（C-4），132.44（C-6），114.06（C-1），107.81（C-5），100.98（C-3），55.72（4-OMe），26.37（—COCH 3）。以上数据与文献[9]报道的数据基本一致，故将该化合物鉴定为丹皮酚。

2.3 化合物3

白色油状物;1H NMR（600 MHz，CDCl 3）δ 544（1H，td，J=7.2，1.6 Hz，CH），5.15-5.08（11H，m，CH），4.09（2H，d，J=7.1 Hz，CH 2OH），2.10～1.97（40H，m），1.74（3H，d，J=1.2 Hz），1.68（21H，d，J=3.1 Hz），1.60（12H，t，J=3.8 Hz）;13C NMR（151 MHz，CDCl 3）δ 140.04，136.23，135.52，135.43，135.39，135.35，135.12，135.04，13140，125.17，125.14，125.08，125.03，124.67，124.60，12455，124.41，124.38，124.28，59.17，39.91，39.88，32.38，32.36，32.33，32.14，26.92，26.83，26.79，26.55，26.52，2646，25.84，23.61，23.58，23.51，17.83，16.14。以上數据与文献[10]报道的数据基本一致，故将该化合物鉴定为聚戊烯醇。

2.4 化合物4

白色粉末状固体;1H NMR（600 MHz，CDCl 3）δ 3.64（2H，t，J=6.6 Hz，H-1），1.56（2H，m，H-2），125（18H，s，H-3～H-11），0.88（3H，t，J=7.0 Hz，H-12）;13C NMR（151 MHz，CDCl 3）δ 63.49（C-1），33.19（C-2），32.30（C-3），30.07～29.81（C-5～C-9），29.73（C-4），26.11（C-10），23.06（C-11），14.48（C-12）。以上数据与文献[11]报道的数据基本一致，故将该化合物鉴定为1-十二醇。

2.5 化合物5

白色晶体;1H NMR（600 MHz，MeOH-d 4）δ 5.75（1H，s，H-7），4.22（1H，p，J=3.4 Hz，H-3），2.42（1H，dt，J=13.5，2.7 Hz，H-4β），1.99（1H，dt，J=14.4，2.7 Hz，H-2β），1.76（3H，s，H-11），1.75（1H，overlap，H-4α），1.53（1H，dd，J=14.4，3.7 Hz，H-2α），1.47（3H，s，H-9），1.28（3H，s，H-10）;13C NMR（151 MHz，MeOH-d 4）δ 185.70（C-6），174.45（C-8），113.33（C-7），88.97（C-5），67.25（C-3），47.97（C-2），46.43（C-4），37.19（C-1），31.01（C-10），2743（C-11），26.96（C-9）。以上数据与文献[12]报道的数据基本一致，故将该化合物鉴定为黑麦草内酯。

2.6 化合物6

白色粉末;1H NMR（600 MHz，CDCl 3）δ 4.21（1H，dd，J=11.6，4.5 Hz，H-1a），4.15（1H，dd，J=11.7，6.2 Hz，H-1b），3.93（1H，ddd，J=10.3，6.0，4.3 Hz，H-2），370（1H，dd，J=11.4，4.0 Hz，H-3a），3.60（1H，dd，J=11.5，5.7 Hz，H-3b），2.35（2H，t，J=7.6 Hz，H-2′），1.65～1.61（2H，m，H-15′），1.34～1.26（24H，m，H-3′～H-14′），0.88（3H，t，J=7.0 Hz，H-16′）;13C NMR（151 MHz，CDCl 3）δ 17451（C-1′），70.43（C-2），65.32（C-1），63.48（C-3），3431（C-2′），32.08（C-3′），29.85～29.28（C-4′～C-13′），25.07（C-14′），22.84（C-15′），14.27（C-16′）。以上数据与文献[13]报道的数据基本一致，故将该化合物鉴定為单棕榈酸甘油酯。

2.7 化合物7

黄色颗粒物;1H NMR（600 MHz，DMSO-d 6）δ 13.08（1H，s，1-OH），7.49（1H，d，J=1.0 Hz，H-4），7.36（1H，d，J=2.5 Hz，H-5），7.18（2H，m，H-217），5.17（1H，d，J=7.7 Hz，H-1′），5.13（1H，d，J=5.3 Hz，—OH），5.12（1H，d，J=4.9 Hz，—OH），5.11（1H，d，J=5.2 Hz，—OH），4.68（1H，t，J=5.7 Hz，6′-OH），3.96（3H，s，6-OCH 3），3.76～3.71（1H，m，H-6′a），3.50～3.42（3H，m，H-2′/3′/6′b），3.33（overlap，H-4′），3.18（1H，td，J=8.7，5.3 Hz，H-5′），2.41（3H，s，3-CH 3）;13C NMR（151 MHz，DMSO-d 6）δ 186.49（C-9），181.94（C-10），164.74（C-6），161.72（C-8），160.71（C-1），147.15（C-3），136.37（C-10α），132.09（C-4α），124.27（C-2），119.39（C-4），114.49（C-9α），114.46（C-8α），10734（C-7），106.50（C-5），100.62（C-1′），77.45（C-5′），76.61（C-3′），73.25（C-2′），69.79（C-4′），60.78（C-6′），56.10（6-OCH 3），21.42（3-CH 3）。以上数据与文献[14]报道的数据基本一致，故将该化合物鉴定为大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷。

2.8 化合物8

黄色片状物;1H NMR（600 MHz，DMSO-d 6）δ 13.16（1H，s，1-OH），11.25（1H，s，6-OH），7.45（1H，brs，H-4），7.27（1H，d，J=2.4 Hz，H-5），7.15（1H，s，H-2），6.99（1H，d，J=2.4 Hz，H-7），5.11（1H，d，J=5.3 Hz，—OH），508（1H，d，J=5.3 Hz，—OH），5.07（1H，d，J=4.6 Hz，—OH），5.05（1H，d，J=7.6 Hz，H-1′），4.61（1H，t，J=5.8 Hz，6′-OH），371（1H，ddd，J=11.9，5.3，2.1 Hz，H-6′a），354～3.47（1H，m，H-6′b），3.45～3.36（2H，m，H-2′/3′），3.33（overlap，H-4′），3.23（1H，dd，J=9.3，5.2 Hz，H-5′），2.39（3H，s，3-CH 3）;13C NMR（151 MHz，DMSO-d 6）δ 186.74（C-9），182.42（C-10），164.44（C-6），162.01（C-8），161.36（C-1），147.21（C-3），136.79（C-10a），132.38（C-4a），124.48（C-2），11955（C-4），114.75（C-8a），113.62（C-9a），10859（C-5/7），101.04（C-1′），77.58（C-3′），7669（C-5′），73.55（C-2′），69.73（C-4′），60.85（C-6′），21.69（3-CH 3）。以上数据与文献[15]报道的数据基本一致，故将该化合物鉴定为大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷。

3 结论与讨论

对月月青的枝叶部分开展化学成分研究，从中共分离鉴定8个化合物，包括醇类3个（植醇、聚戊烯醇、1-十二醇）、酚类3个（丹皮酚、大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷）、倍半萜1个（黑麦草内酯）和脂肪酸酯1个（单棕榈酸甘油酯）。所有化合物均为首次从月月青中分离得到，进一步明确和拓展月月青的化学成分组成。此外，通过文献调研发现，聚戊烯醇能增强认知能力，可用于脑部位的疾病[16];大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷可以诱导宫颈癌细胞凋亡[17];植物醇、丹皮酚和黑麦草内酯均表现出抗炎潜力[18-20]。该研究的发现有助于阐明月月青民间用途的科学内涵，为该药用资源的高效合理利用奠定坚实基础。

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