NLRP3炎性小体、GP73水平与乙肝肝硬化伴食管静脉曲张破裂的相关性

肝硬化是慢性肝病向肝癌发展的过度阶段，多数患者病程长达20～40年，在全球范围内发病率约为1%，并且肝硬化本身可并发其他疾病，严重影响患者的生活质量和生存周期

。食管静脉曲张(esophageal varices，EV)破裂是肝硬化严重的并发症之一，据统计该并发症约占肝硬化总人数的40%，病死率更是高达25%，通常临床表现为无征兆的大量呕血，或柏油样便

。目前，临床多采用内镜下组织黏合剂注射治疗，虽可快速止血，但仍不能达到患者对疗效的预期

。NOD样受体家族蛋白3(nod-like receptor protein 3，NLRP3)被证实与多种疾病的发生有关，其在肝脏损伤细胞中呈高表达，可能与肝脏细胞凋亡有关，并且与血管衰老、血管破裂密切相关

。高尔基体蛋白73(golgi protein 73，GP73)是近年来证实与肝癌、肝硬化均有密切关系的新型血清标记物，对肝细胞损伤极为敏感，并且与EV存在一定关联性

。因此，NLRP3及GP73有可能与肝硬化伴EV破裂有关，并且有可能成为预测EV破裂危险性的预测标记物。在我国因乙肝所致肝硬化的发病率居高不下，严重威胁国民健康。本研究通过比较乙肝所致肝硬化伴不同程度EV患者血浆NLRP3及GP73表达水平，深入探究NLRP3及GP73对乙肝肝硬化合并EV破裂的诊断价值。

1.4 统计学方法 采用SPSS 20.0统计软件处理数据。计量资料以x±s表示，采用配对t检验，组间同时间点比较行独立样本t检验；计数资料以百分比表示，等级比较行秩和检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取北部战区总医院2020年1月至2021年9月收治的137例乙肝所致肝硬化伴EV患者作为研究对象。137例乙肝肝硬化伴EV患者中男86例，女51例，年龄40～65岁，平均年龄(57.24±6.29)岁，肝硬化平均病程(8.33±2.08)年，Child-Pugh分级B级91例，C级46例。收集入组患者入院时性别、年龄、病程、糖尿病病史、Child-Pugh分级、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase，AST)、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase，ALT)等基本资料，根据内镜下判定入组患者是否发生EV破裂出血进行分组，分为破裂组与未破裂组。本研究通过北部战区总医院伦理委员会审核(批号ZQL20200242)。

1.2 选取标准 纳入标准：符合乙肝所致肝硬化伴EV诊断标准

；40岁≤年龄≤65岁；均为首次确诊EV；临床资料完整；患者本人及家属均知情，且签署知情同意。排除标准：患有出血性疾病者，如血管性血友病、过敏性紫癜、结缔组织病、血小板减少及共济失调毛细血管扩张症等；血管炎及血管钙化性疾病者；肝癌患者；肝脏移植治疗者；患有食道疾病者，食道黏膜充血、食道血管瘤、食道癌；患严重心血管病者；肝肾功能不全者；长期服用抗凝药物者。

1.3 样本采集及检测方法 抽取患者静脉血5 mL置于真空抗凝管中，将抗凝管反复倒转2次，让血液充分与管壁接触，静置1 h后，使用移液器抽取上层血浆并－80 ℃保存，每6个月进行集中检测。应用ELISA法检测入组患者血浆中NOD样受体家族蛋白3(NOD-like receptor protein 3，NLRP3)、高尔基体蛋白73(Golgi protein 73，GP73)水平，由我院检验科专业检验技师操作，试剂盒购自北京金桥公司，批号分别为J2004755及J2008365。

2.2 两组患者血浆NLRP3及GP73水平表达情况与未破裂组比较，破裂组患者血浆NLRP3及GP73表达水平明显升高，差异有高度统计学意义(

＜0.01)，见表2。

2.1 两组患者基线资料比较 与未破裂组比较，破裂组患者Child-Pugh分级差异有高度统计学意义(

＜0.01)；性别、年龄、病程、糖尿病病史、AST及ALT水平差异无统计学意义(

＞0.05)，见表1。

2 结果

中华人民共和国宪法中有对人格权做了一定的规定，宪法第38条规定：“中华人民共和国公民的人格尊严不受侵犯。”第39条规定：“中华人民共和国公民的住宅不受侵犯。”第40条规定：“中华人民共和国公民的通信自由和通信秘密受法律的保护。”人格权中包括隐私权，且住宅、通讯等都属于个人的隐私信息。宪法是一个国家的根本大法，宪法作为根本大法不可能细致到调整人身权中具体人格权的地步,而且我国也没有所谓的宪法法庭，它对人格权（包括隐私权）的保护属于形式保护,并不具备实质保护的条件。

2.3 血浆NLRP3及GP73水平对乙肝肝硬化伴EV破裂的诊断价值 血浆NLRP3及GP73水平对乙肝肝硬化伴EV破裂均有一定的临床诊断价值，见表3、图1。

各种慢性肝病所致的肝硬化，使肝脏纤维化严重，导致门静脉系统压力升高，支属血管血流量增加，引发胃或食管静脉曲张，其中EV破裂出血是危害肝硬化患者生命的危险因素，有报道称EV破裂出血6周病死率高达20%

。门静脉高压破裂出血患者多处于肝硬化失代偿期，易出现多种出血性并发症，尽早诊断并进行干预治疗对提高生存率、改善预后有重要意义

。为了提高早期对肝硬化患者伴EV破裂的诊断效能，本研究对137例乙肝肝硬化伴EV患者临床基线资料进行统计，对入组患者性别、年龄、病程、糖尿病病史、Child-Pugh分级、AST及ALT水平进行对比分析，结果发现乙肝肝硬化伴EV患者Child-Pugh分级存在明显差异，这与高慧茹等

研究结果相似。在本研究中，患者EV破裂与未破裂患者血清AST及ALT水平无明显差异，这可能是由于部分患者口服抗病毒及保肝药物，致使肝功能指标差异不明显。

3 讨论

2.4 肝硬化伴EV破裂多因素分析 根据临床基线资料及血浆NLRP3 及GP73 水平表达差异，Child-Pugh分级及NLRP3、GP73水平作为本研究自变量，NLRP3及GP73水平使用实测值，Child-Pugh分级B级＝0，C级＝1；是否出现EV破裂为因变量进行多因素回归分析。结果显示：Child-Pugh分级、NLRP3、GP73水平是肝硬化伴EV破裂的危险因素，见表4。

炎症小体是人体免疫系统的重要组成部分，多为多蛋白水解复合物，对病原体具有广泛识别作用，后通过信号转导诱导细胞活化，释放炎症相关因子，起到抗炎作用

。NLRP3是炎性小体家族重要的家族成员，可识别内、外源性病原体及信号通路，Lech等

通过对不同脏器组织进行检测，证实人类和鼠类肝脏中NLRP3 mRNA表达水平高于脾等其他内脏组织，而当肝脏纤维化、假小叶形成及恶变时，患者外周血及肝脏组织中NLRP3表达升高，并且灵敏度较高

。另有研究发现，血管管腔内压力过高时可促进炎症小体NLRP3表达，并且与血管内皮损伤及AngⅡ功能障碍密切相关

。GP73是高尔基体中跨膜糖蛋白，与NLRP3相反，GP73在正常人体组织中几乎不表达，而一旦疾病进展为肝硬化后，GP73蛋白表达则明显升高，其中结缔组织及肝硬化结节附近的肝细胞升高最为明显

。本研究发现破裂组血浆中NLRP3和GP73水平明显高于未破裂组，分析原因认为一方面破裂组患者Child-Pugh分级C级患者例数明显增高，说明破裂组患者肝脏储备能力更低，肝硬化更为严重，这可能是破裂组患者血浆NLRP3和GP73水平更高的原因之一，另一方面EV破裂可能由于局部血管压力升高，产生炎症反应，炎症反应促使NLRP3和GP73升高。

综上所述，急性单纯性阑尾炎患者实施中医临床护理路径干预利于缓解患者临床症状，对促进康复具有积极意义，且患者满意度较高。

为了明确血浆NLRP3及GP73水平对乙肝肝硬化伴EV破裂的诊断效应，本研究采用ROC曲线分析上述两种分子蛋白的诊断效能，结果表明，NLRP3及GP73对乙肝肝硬化伴EV破裂的AUC值分别为0.83 (95%

∶0.76，0.89)、0.77 (95%

∶0.72，0.82)，灵敏度

＝0.84、灵敏度

＝0.75，特异度

＝0.81、特异度

＝0.77，从各个角度分析，均具有一定的诊断效能，有潜力成为预测乙肝肝硬化伴EV破裂的外周血标记物。为明确血浆NLRP3及GP73水平与乙肝肝硬化伴EV破裂的关系，本团队应用Logistic回归分析模型对入组患者基线资料存在差异因素及NLRP3、GP73进行分析。结果表明，Child-Pugh分级、NLRP3、GP73水平是乙肝肝硬化伴EV破裂的危险因素，分析原因认为NLRP3、GP73本身与乙肝肝硬化严重程度相关，这可能是由于NLRP3作为炎症小体，一方面可识别局部血管炎症的发生，另一方面其可促进炎症的发生，导致血管内皮受损；GP73则可能与触发炎症反应有关，并且其高表达对细胞核及细胞结构破坏程度有关

，从而导致局部血管被破坏，可能是乙肝肝硬化伴EV破裂的独立危险因素。

墓地是老巴亲自去挑选的。在九峰山边的石门峰。四周是一波一波的山。山上的树生长得青翠茂密。他去的时候是下午，阳光从山边落下，树影晃动，那气氛像极了他的家乡。他想他认识阿里的母亲就是在这样的时候呀。一晃三十多年。一晃她已离开。就留她住在这里吧。于是老巴挑选了一块双人墓，他给自己也留了一个位置。墓地贵得令人冒汗，但老巴已然顾不得这些。选罢墓址，又选石碑，最后挑了一款最贵的骨灰坛。老巴这一次花光了家里的积蓄。他拄着拐杖跑上跑下，假肢与骨肉接连处，磨得流血。老巴觉得只有他腿上的疼一直钻到心里的时候，似乎才好受一点。

综上所述，血浆NLRP3和GP73水平与乙肝肝硬化伴EV破裂关系密切，对其进行评估有助于预测患者EV破裂出血。

[1] 宗静静，卿鑫，樊哲，等.原发性肝癌治疗进展[J].东南大学学报(医学版)，2021，40(4)：542-547.

[2] ROERECKE M，VAFAEI A，HASAN OSM，et al.Alcohol consumption and risk of liver cirrhosis：a systematic review and metaanalysis[J].Am Gastroenterol，2019，114(10)：1574-1586.

[3] ESCORSELL，GARC A-PAG N J C，BOSCH J.Esophageal stents for acute variceal bleeding：Expanding the possibilities[J].Dig Dis Sci，2018，63(2)：275-276.

[4] 马振增，燕善军，王启之，等.经内镜套扎术与组织黏合剂联合硬化剂注射术治疗肝硬化食管胃底静脉曲张的临床研究[J]. 蚌埠医学院学报，2021，46 (7)：851-853，857.

[5] 吉晓漫，徐明.NLRP3 炎性小体影响血管衰老的机制及其相关药物的研发[J].药学学报，2021，56(3)：696-702.

[7] EISSA M，AWAD S，BARAKAT S，et al.Serum Golgi protein 73 as a sensitive biomarker for early detection of hepatocellular carcinoma among Egyptian patients with hepatitis C virus-related cirrhosis[J].Med J Armed Forces India，2021，77(3)：331-336.

[8] WANG Y，WAN Y Y.Golgi protein 73，hepatocellular carcinoma and other types of cancers[J].Liver Res，2020，4(4)：161-167.

[9] 林荣攀，姜丽丽.血浆GP73 预测肝硬化显著食管静脉曲张价值研究[J]. 深圳中西医结合杂志，2020，20(24)：68-69.

[10] 中华医学会消化内镜学分会，中华医学会肝病分会，中华医学会消化内镜学分会.肝硬化门静脉高压食管胃静脉曲张出血的防治共识[C].中华医学会全国消化疾病学术会议，2008：16-26.

[11] 中华医学会外科学分会脾及门静脉高压外科学组.肝硬化门静脉高压症食管、胃底静脉曲张破裂出血诊治专家共识(2019 版)[J].中华消化外科杂志，2019，18(12)：1087-1093.

[12] JAKAB S S，GARCIA-TSAO G.Evaluation and management of esophageal and gastric varices in patients with cirrhosis[J].Clin Liver Dis，2020，24(3)：335-350.

[13] PLAZ TORRES M C，BEST L M，FREEMAN S C，et al.Secondary prevention of variceal bleeding in adults with previous oesophageal variceal bleeding due to decompensated liver cirrhosis：a network meta-analysis[J].Cochrane Database Syst Rev，2021，3(3)：CD013122.

[14] 高慧茹，高会斌，彭昭，等.乙型肝炎肝硬化并发食管胃底静脉曲张破裂出血患者临床特征及影响因素分析[J].实用肝脏病杂志，2021，24(3)：395-398.

[15] LI W F，LI W Q，YU J J，et al.Fraxin inhibitslipopolysaccharide-induced inflammatory cytokines and protects against endotoxic shock in mice[J].Fundam Clin Pharmacol，2020，34(1)：91-101.

[16] 林裕贵，李程颐，李培群，等.流感病毒感染中炎症小体的激活和调控机制[J]. 中国人兽共患病学报，2021，37(8)：741-747.

[17] LECH M，AVILA-FERRUFINO A，SKUGINNA V，et al.Quantitative ex pression of RIG-like helicase，NOD-like receptor and inflammasome-related mRNAs in humans and mice[J].Int Immunol，2010，22(9)：717-728.

[18] XING Z Y，WU Y Y，LIU N.IL-22 alleviates the fibrosis of hepatic stellate cells via the inactivation of NLRP3 inflammasome signaling[J].Exp Ther Med，2021，22(4)：1088-1095.

[19] 杨龙，彭伟，张洪涛，等.血清NLRP3 炎性小体、IL-18、IL-1β 水平与肝硬化、肝癌的相关性分析[J].解放军医药杂志，2021，33(5)：24-28.

[20] ZHOU W，XI D M，SHI Y Z，et al.MicroRNA-1929-3 participates in murine cytomegalovirus induced hypertensive vascular remodeling through Ednra/NLRP3 inflammasome activation[J].Int J Mol Med，2021，(47)：719-731.

[21] AVOLIO E，PASQUA T，DI VITO A，et al.Role of brain neuroinflammatory factors on hypertension in the spontaneously hypertensive rat[J].Neuroscience，2018(375)：158-168.

[22] 刘沁雨，常越，张文，等.GP73 预测慢性乙型肝炎患者肝硬化进展研究[J].武警医学，2020，31(4)：317-323.

[23] KLADNEY R D，CUI X，BULLA G A，et al.Expression of GP73，a resident Golgi membrane protein，in viral and nonviral liver disease[J].Hepatology，2002，35(6)：1431-1440.

[24] ZHANG X W，ZHU C L，WANG T C，et al.GP73 represses host innate immune response to promote virus replication by facilitating MAVS and TRAF6 degradation[J].Plos Pathogens，2017，13(4)：e1006321.