结直肠肿瘤腹腔镜术后感染患者病原菌特征及对Th1/Th2、MCP-1、sTREM-1表达的影响

丁海霞

(陕西省西安市中心医院肿瘤科，陕西 西安 710003)

结直肠肿瘤是发生于结肠、直肠交界区域的恶性肿瘤，为消化系统常见肿瘤，发病率位居我国胃肠道肿瘤第二位，位居全部恶性肿瘤第三位，严重影响患者生命安全及身心健康[1-3]。现阶段，临床上多采用外科手术疗法提高其生存率，由于受相关因素影响，术后极易引发并发症，尤其是术后感染较为常见[4-5]。一旦发生感染，势必影响治疗效果，若感染未得到有效控制，甚至可能致死[6]。因此，结直肠肿瘤患者术后感染的防治及诊断对于预后具有至关重要作用。正常情况下，辅助性T细胞(T Helper，Th)1细胞、Th2细胞互相拮抗，处于动态平衡状态，前者功能减弱、后者功能增强，导致Th1/Th2比值失衡为诱发感染的重要病理机制[7-8]。单核细胞趋化因子1(monocyte chemoattractant protein-1，MCP-1)作为炎症反应的重要媒介，在炎症反应过程中可激活、介导炎症反应[9-10]。可溶性髓样细胞触发受体1(soluble Trigge ring receptor expressed on myeloid cell-1，sTREM-1)与机体炎症反应有关，可活化多种细胞因子，增加单核细胞炎症反应[11-12]。此外，术后感染的主要原因为病原菌入侵，故掌握感染病原菌特征对于防治术后感染尤为关键。为提高腹腔镜术后感染控制率，促进患者康复，本研究旨在分析结直肠肿瘤腹腔镜术后感染患者病原菌特征及对Th1/Th2、MCP-1、sTREM-1表达的影响。

1 资 料 与 方 法

1.1一般资料 选取2017年5月—2020年4月我院收治的结直肠肿瘤腹腔镜术后感染患者67例作为感染组，其中轻度感染23例，中度感染27例，重度感染17例；另选取同期收治结直肠肿瘤腹腔镜术后未出现感染患者67例作为非感染组。纳入标准：①均经电子肠镜及病理学检查确诊，其中腹腔镜术后感染诊断标准参考文献[13]，包括切口感染、腹腔脓肿、院内获得性肺炎、下尿路感染、导管相关感染等；②手术指征明确，且自愿配合腹腔镜手术；③意识清楚、精神状况良好；④临床资料完整详细。排除标准：①行非手术治疗者；②术前合并感染性疾病者；③伴有严重肝、肾功能障碍者；④合并自身免疫性疾病；⑤存在手术区域污染者；⑥伴有血液传染性疾病者；⑦临床资料欠缺者。

1.2方法

1.2.1临床资料调查 通过医院病例系统查询、记录患者性别、年龄、体重指数、病程、临床分期、既往腹部手术史、手术时间、术中出血量、合并糖尿病、高血压等情况。

1.2.2病原菌检测 采集感染处脓性分泌物，应用美国BD公司提供全自动细菌培养仪(Bact/Alert 3D型)进行细菌培养，培养温度37 ℃，连续培养24 h后分离纯化病原菌，病原菌分离培养、鉴定操作严格遵循《全国临床检验操作规程》进行。

1.2.3血液指标检测 于术后1、3、7 d在空腹状态下采集肘静脉血5 mL，3 000 r/min离心处理10 min，离心半径10 cm，分离血清、血浆，贮存待检；以酶联免疫吸附法测定MCP-1、sTREM-1水平，试剂盒购自美国GTX公司；采用上海信然生物技术有限公司提供流式细胞分析仪检测Th1、Th2细胞，并计算Th1/Th2比值。

1.3观察指标 统计结直肠肿瘤腹腔镜术后感染病原菌特征，比较2组一般资料、术后Th1/Th2、MCP-1、sTREM-1水平，分析腹腔镜术后感染影响因素，评价Th1/Th2、MCP-1、sTREM-1水平对腹腔镜术后感染的诊断价值，并分析术后Th1/Th2、MCP-1、sTREM-1水平与感染程度的相关性。

1.4统计学方法 应用SPSS 22.0统计学软件处理数据。计量资料比较采用单因素方差分析、SNK-q检验和重复测量的方差分析；计数资料比较采用χ2检验；术后感染影响因素确定采用Logistic多因素回归分析；术后Th1/Th2、MCP-1、sTREM-1水平与感染程度的相关性采用Spearman相关系数模型分析；绘制受试者工作特征曲线(receiver operating characteristiccurve，ROC)得到曲线下面积(areas under the curve，AUC)，检验术后Th1/Th2、MCP-1、sTREM-1水平对腹腔镜术后感染的诊断价值。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1结直肠肿瘤腹腔镜术后感染患者病原菌特征 感染组67例患者共培养出病原菌138株，其中革兰阴性菌93株(67.39%)，革兰阳性菌33株(23.91%)，其他12株(8.70%)。见表1。

表1 结直肠肿瘤腹腔镜术后感染患者病原菌特征Table 1 Characteristics of pathogenic bacteria in colorectal tumor patients with infection after laparoscopic surgery

2.22组临床资料比较 感染组体重指数≥24、Dukes分期C、D期、糖尿病、手术时间>2 h比例高于非感染组，差异有统计学意义(P<0.05)，2组性别、年龄、癌症类型、高血压、冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)、手术出血量差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 2组临床资料比较Table 2 Comparison of clinical data between two groups (n=67，例数，%)

2.32组术后Th1/Th2、MCP-1、sTREM-1水平比较 2组Th1/Th2比值呈先降低后升高趋势，MCP-1、sTREM-1水平呈先升高后降低趋势，感染组Th1/Th2比值低于非感染组，MCP-1、sTREM-1水平高于非感染组,组间、时点间、组间·时点间交互作用差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 2组术后Th1/Th2、MCP-1、sTREM-1水平比较Table 3 Comparison of postoperative Th1/Th2, MCP-1, sTREM-1 levels between two groups

2.4结直肠肿瘤腹腔镜术后感染影响因素分析 以结直肠肿瘤腹腔镜术后感染为因变量(未感染=0，感染=1)，以体重指数(<24=0，≥24=1)、Dukes分期(A、B期=0，C、D期=1)、糖尿病(否=0，是=1)、手术时间(≤2 h=0，>2 h=1)、Th1/Th2(术后3 d，≤1.74=0，>1.74=1；术后7 d，≤2.36=0，>2.36=1)、MCP-1(术后3 d，≤261.33 ng/L=0，>261.33 ng/L=1;术后7 d，≤211.22 ng/L=0，>211.22 ng/L=1)、sTREM-1(术后3 d，≤238.92 μg/L=0，>238.92 μg/L=1;术后7 d，≤196.29 μg/L=0，>196.29 μg/L=1)为因变量进行Logistic回归分析，结果显示，体重指数、Dukes分期、糖尿病、手术时间、术后3 d、7 d Th1/Th2、MCP-1、sTREM-1水平为结直肠肿瘤腹腔镜术后感染的影响因素(P<0.05)。见表4。

表4 结直肠肿瘤腹腔镜术后感染影响因素分析Table 4 Analysis of influencing factors of infection of patients with colorectal tumors after laparoscopic surgery

2.5术后Th1/Th2、MCP-1、sTREM-1水平对结直肠肿瘤腹腔镜术后感染的诊断价值 绘制ROC曲线，可见术后3 d Th1/Th2、MCP-1、sTREM-1水平对腹腔镜术后感染的诊断AUC>术后7 d，术后3 d联合诊断AUC最大，为0.913，具有良好诊断效能。见表5，图1。

表5 术后Th1/Th2、MCP-1、sTREM-1水平对结直肠肿瘤腹腔镜术后感染的诊断价值Table 5 The value of Th1/Th2, MCP-1 and sTREM-1 levels in the diagnosis of infection of patients with colorectal tumors after laparoscopic surgery

图1 ROC曲线

2.6术后3 d Th1/Th2、MCP-1、sTREM-1水平与感染程度的相关性 结直肠肿瘤腹腔镜术后不同感染程度患者术后3 d Th1/Th2、MCP-1、sTREM-1水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。经相关性分析可知，结直肠肿瘤腹腔镜术后感染患者术后3 dTh1/Th2与感染程度呈负相关(r=-0.732，P<0.05)，MCP-1、sTREM-1水平与感染程度呈正相关(r=0.668，0.587，P<0.05)。见表6，图2～4。

表6 不同感染程度患者术后3 d Th1/Th2、MCP-1、 sTREM-1水平比较Table 6 Comparison of Th1/Th2, MCP-1, and sTREM-1 levels in patients with different infection levels at 3 d after surgery

图2 Th1/Th2与感染程度的关系

3 讨 论

腹腔镜治疗结直肠肿瘤具有减轻术后疼痛、促进康复、缩短住院时间等优势，目前该术式已得到临床认可，广泛应用于结直肠肿瘤治疗中，但从结果来看，术后感染仍是腹腔镜手术主要并发症[14-16]。本研究选取腹腔镜术后感染患者67例作为研究对象，发现体重指数、Dukes分期、糖尿病、手术时间为腹腔镜术后感染的影响因素，临床需加以重视，旨在降低腹腔镜术后感染发生风险。有研究显示，腹腔镜术后感染主要与病原菌侵袭有关[17]，而病原菌分布特点报道则存在明显差异。本研究中感染组67例患者病原菌培养结果显示，共培养出138株病原菌，其中革兰阴性菌占67.39%，其次为革兰阳性菌占23.91%，其他8.70%，临床可根据病原菌鉴别结果制定针对性治疗方案，以提高临床疗效。

结直肠肿瘤患者腹腔镜手术后常出现免疫功能下降，而免疫功能下降亦是造成术后感染的主要因素[18]。T淋巴细胞为人体免疫功能调节的重要活性细胞，其中CD4+T淋巴细胞可帮助B细胞产生抗体，是介导特异性免疫应答的重要细胞，可合成、分泌多种细胞因子[19]。CD4+T淋巴细胞主要分布于Th1细胞与Th2细胞中，其中Th1细胞主要分泌白细胞介素2、干扰素γ，可抑制B细胞功能，介导细胞免疫应答，Th2细胞以分泌白细胞介素4、白细胞介素10为主，可促进B细胞激活分化，产生抗体，介导体液免疫反应[20]。Th1/Th2比值在维持机体免疫稳定中占有重要地位，若前者处于优势，则可有效抑制炎症反应，若后者处于优势，则可抑制机体免疫功能，加速炎症反应[21]。本研究结果显示，2组Th1/Th2比值呈先降低后升高趋势，感染组Th1/Th2比值低于非感染组。李坚炯等[22]指出，结直肠癌患者术后感染性并发症患者术后3 d、7 d Th1/Th2比值明显低于术后未出现感染并发症患者，本研究结果与之一致，充分说明结直肠肿瘤腹腔镜术后感染患者免疫功能低下，分析原因，可能是由于结直肠肿瘤腹腔镜手术所造的的创伤及应激反应会一定程度抑制免疫功能，导致特异性免疫应答功能低下，免疫细胞含量减少，致使机体抗感染功能减弱，从而增加腹腔镜术后感染风险。

当机体发生感染后，炎症反应被激活，并大量分泌、释放炎症细胞因子，致使血清中炎症细胞因子水平随之升高[23]。MCP-1是一种由人体内多种细胞生成的单核巨噬细胞趋化因子，可在局部组织招募炎症细胞并激活炎症反应，对T淋巴细胞、单核巨噬细胞等炎性细胞具有一定激活、趋化作用，可在机体发生炎症反应时特异性高表达[24-25]。sTREM-1是单核细胞的细胞膜及中性粒细胞膜表面表达的跨膜糖蛋白的可溶形式，在炎症反应的触发及介导过程中发挥重要作用，参与炎症扩大反应过程，且其可参与血液循环，促使大量中性粒细胞聚集并发挥抗感染作用，增强机体局部与全身炎性反应强度[26]。有研究指出，sTREM-1可抑制促炎细胞因子形成，下调炎症细胞因子，其在血液中的变化对人体而言是一种自我保护机制，若其水平升高，则提示合并细菌性炎症[27]。有学者表明，结直肠癌术后感染患者术后MCP-1水平明显高于非感染组[28]。魏永花等[29-30]指出，sTREM-1可用于鉴别诊断细菌感染再发，且具有一定诊断效能。本研究结果显示，2组MCP-1、sTREM-1水平呈先升高后降低趋势，感染组MCP-1、sTREM-1水平均高于非感染组，提示MCP-1、sTREM-1在患者体内参与了相关炎症反应过程，作为临床诊断术后感染的标志物具有一定敏感度。

此外，术后Th1/Th2、MCP-1、sTREM-1水平联合诊断腹腔镜术后感染时，术后3 d诊断AUC值最大，具有较高诊断效能，分析原因，可能是由于腹腔镜术后，随感染发生，病情逐渐加重，术后3 d达到峰值，且结直肠肿瘤腹腔镜术后感染患者术后3 d Th1/Th2与感染程度呈负相关，MCP-1、sTREM-1水平与感染程度呈正相关，提示临床监测其水平变化，有助于评估术感染程度，便于指导治疗方案选择及预后预测。

综上所述，结直肠肿瘤腹腔镜术后感染患者术后3 d Th1/Th2明显下降，MCP-1、sTREM-1水平显著升高，可用于其诊断及感染程度评估，病原菌以大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌为主，临床工作中需加以重视，采取针对性治疗方案以便边提高临床疗效，改善患者预后。