维生素D受体基因多态性与代谢综合征相关性的Meta分析

韦 琴，史卫卫，杨语嫣，路笑颖，曹亚景，崔 泽*

(1.河北医科大学研究生学院2020级学硕4班，河北 石家庄 050017；2.河北省疾病预防控制中心慢性非传染性疾病防治所， 河北 石家庄 050024；3.华北理工大学公共卫生学院流行病学与卫生统计学教研室，河北 唐山 063210)

代谢综合征(metabolic syndrome，MetS)是指肥胖合并出现高血压、高血糖、高脂血症、高胆固醇的一组代谢紊乱症候群[1]。近年来，工作生活方式如久坐不动、高热量食品摄入增加等致使MetS发病率逐年上升，已成为现代社会的健康危害之一。据报道，目前大约三分之一的美国成年人患有MetS[1]，而中国成年人MetS患病率也从2000年的13.7%上升到了2010年的33.9%[2]。维生素D受体(vitamin D receptor，VDR)是一种核激素受体和转录因子，位于12q12-14号染色体上，在不同组织中广泛表达，并参与人体多种代谢途径，对代谢性疾病的发生发展起重要作用[3-4]。单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism，SNP)即DNA序列发生变异，是人类最常见的遗传变异，可决定个体对疾病的遗传易感性。VDR SNP序列变异可能影响VDR基因的生物效应，从而参与MetS发生发展。目前，VDR FokI 及BsmI基因多态性与MetS遗传易感性关系的研究较多，但各研究间结论并不一致。本研究纳入现有研究，对VDR基因多态性与MetS易感性的相关研究结果进行定量综合分析，为MetS的病因学研究提供循证医学证据。

1 资 料 与 方 法

1.1文献检索 计算机联合检索PubMed、中国知网、万方和中国生物医学文献数据库中公开发表的关于VDR基因多态性与MetS发病关系的中英文报道，检索时限截止2021年3月。中文检索词：“代谢综合征”、“维生素D受体或VDR或FokI或rs2228570或BsmI或rs1544410”、“单核苷酸多态性或基因多态性”；英文检索词：“metabolic syndrome”、“vitamin D receptor or VDR or FokI or rs2228570 or BsmI or rs1544410”、“polymorphism or genetic variation”。采取主题词和自由词结合的方式检索，并手工追溯纳入文献的参考文献，以提高查全率。

1.2纳入标准与排除标准 纳入标准：①已公开发表的、关于FokI rs2228570、BsmI rs1544410位点多态性与MetS发病关系的研究，且能获取全文，语种限定中文和英文；②研究对象MetS组为临床上确诊的MetS患者，对照组为具有可比性的未患MetS者；③MetS组与对照组均进行基因分型，且能获取完整的基因型数据。排除标准：①与FokI、BsmI基因多态性无关；②综述、文摘、会议报告、动物研究、学位论文及重复性文献；③基因型数据不完整，无法计算OR及其95%CI的研究；④不符合纳入标准的研究。

1.3文献筛选与资料提取 根据纳入标准和排除标准，筛选出合格文献，并获取全文，建立数据资料提取表格，由2名研究者独立筛选并按照统一设计的数据提取表录入所需信息，并交叉核对。若出现分歧，讨论决定或由第三人决定。提取第一作者姓名、文献出版年份、国家、种族、基因分型方法、样本量、各基因型频数、哈迪-温伯格平衡(Hardy-Weinberg equilibrium，HWE)等。

1.4文献质量评价 文献质量的评价根据纽卡斯尔-渥太华量表(Newcastle Ottawa Scale，NOS)项目进行，包括研究人群的选择、病例与对照的可比性、暴露因素3个类别8个评价条目，满分为9分，总分≥6分为高质量文献。

1.5统计学方法 应用Stata 12.0统计软件分析数据。以合并的OR及其95%CI，估计FokI rs2228570、BsmI rs1544410位点多态性与MetS遗传易感性的关联。采用I2检验进行异质性分析，当P<0.1且I2>50%认为纳入研究间异质性较大，采用随机效应模型进行分析；当P≥0.1且I2≤50%认为纳入究间异质性较小，采用固定效应模型进行分析。采用Begg′s检验和Egger′s检验评估发表偏倚，并采用敏感性分析评价结果的稳定性。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1纳入文献一般特征 依据检索策略，检索到潜在的相关文献共266篇，通过阅读标题及摘要初步筛选，去除重复、综述类及动物实验118篇，非VDR基因多态性与MetS易感性研究97篇，进一步阅读全文，去除非病例对照研究31篇、非FokI及BsmI位点研究11篇，最终纳入合格文献9篇[5-13]，均为英文研究，共包括4 239例研究对象。纳入文献经NOS评价，评分均≥6分，均为高质量文献。文献筛选过程如图1，纳入文献的基本信息见表1。

图1 文献筛选流程

表1 纳入文献一般特征Table 1 The basic features of the literature included

PCR-RFLP：限制性片段长度多态性技术；PCR-HRM：聚合酶链反应和高分辨率熔融分析；ASPCR：等位基因特异性聚合酶链反应；RT-PCR：实时荧光定量聚合酶链式反应；SNPscanTM：高通量SNP分型技术

2.2Meta分析结果

2.2.1FokI多态性与MetS的遗传易感性 本研究共纳入9项研究[5-13]，均报道了FokI 与MetS遗传易感性的关系，其中MetS组2 016例，对照组2 165例。异质性检验结果显示，等位基因模型(I2=61.8%，P=0.007)、隐性模型(I2=51.3%，P=0.037)、纯合子模型(I2=53.2%，P=0.029)异质性较高，采用随机效应模型进行分析；显性模型和杂合子模型无明显异质性，采用固定效应模型。Meta分析结果显示，FokI rs2228570位点多态性在多种模型下可显著提高MetS遗传易感性。等位基因模型(fvs.F)(OR=1.25，95%CI：1.07～1.46，P=0.005)；显性基因模型(ff+Ffvs.FF)(OR=1.25，95%CI：1.09～1.44，P=0.002)；隐性基因模型(ffvs.Ff+FF)(OR=1.40，95%CI：1.10～1.77，P=0.005)；纯合子模型(ffvs.FF)(OR=1.51，95%CI：1.13～2.03，P=0.005)。以上4种模型提示FokI rs2228570位点f等位基因、ff基因型及ff+Ff基因型可能是MetS发病的独立危险因素。杂合子模型(Ffvs.FF)未发现显著相关(P>0.05)。见表2，图2。

2.2.2BsmI多态性与MetS的遗传易感性 本研究纳入的9项研究中有8项[5-11，13]研究了BsmI与MetS遗传易感性的关系，其中MetS组1 633例，对照组1 725例。异质性检验结果显示，隐性模型(I2=61.2%，P=0.012)、纯合子模型(I2=66.5%，P=0.004)异质性较高，采用随机效应模型进行分析；其余3种模型未见明显异质性，采用固定效应模型。Meta分析结果显示，BsmI rs1544410位点可显著降低MetS遗传易感性。等位基因模型(bvs.B)(OR=0.86，95%CI:0.76～0.98，P=0.026)；杂合子模型(Bbvs.BB)(OR=0.77，95%CI:0.62～0.95，P=0.016)。以上结果提示BsmI rs1544410位点b等位基因与Bb基因型可能是MetS发病的保护因素。其余3种模型均未发现显著相关(P>0.05)。见表2，图3。

2.3发表偏倚检验 Begg′s检验显示，FokI rs2228570与BsmI rs1544410位点在5种模型下的漏斗图基本呈对称分布，Egger′s检验也未发现明显发表偏移(P>0.05)。提示纳入文献可能不存在明显发表偏移，纳入文献整体代表性较好。见表2，图4～5。

表2 VDR基因多态性与MetS关系的Meta分析结果Table 2 Meta-analysis results of the relationship between VDR gene polymorphism and MetS

图2 FokI rs2228570与MetS相关性的Meta分析森林图(f vs. F)

图4 FokI rs2228570 Begg′s漏斗图和Egger′s的线性回归发表偏倚检验(f vs. F)

图5 BsmI rs1544410 Begg′s漏斗图和Egger′s的线性回归发表偏倚检验(b vs. B)

2.4敏感性分析 采用逐一剔除文献的方法进行敏感性分析，将本研究纳入的文献逐一剔除后，结果显示，2个位点在5种模型下合并的OR 、95%CI以及异质性检验结果均未发生明显波动，提示本Meta分析结果稳健性较好，结论可靠。

3 讨 论

MetS是一种复杂的病理生理状态，是心血管疾病和2型糖尿病流行的重要因素，现已成为临床与公共卫生的一大挑战。MetS病因复杂，主要由于能量摄入与消耗不平衡引起，与环境因素、遗传易感性的相互作用也存一定在相关性[14]。研究显示，不良的生活方式、饮食习惯及亚健康状态等危险因素不能完全解释MetS的发病，仍有部分发病风险与遗传背景相关。因此，深入研究与MetS发病相关的基因多态性位点，对MetS的预防、筛查及治疗有重要意义。

维生素D是人体必需的营养物质，缺乏易引起肥胖、糖耐量异常及胰岛素抵抗，其机制可能与VDR激活有关[15]。VDR是一种由VDR基因编码的蛋白质，可与1,25(OH)2D特异性结合影响维生素D的生物活性，还可与核苷酸序列结合使蛋白质的结构、功能发生改变，从而引起特定疾病的易感性[16]。目前已知的VDR单核苷酸多态性位点有20多个，但其遗传性变异的研究多数集中在FokI、BsmI位点。FokI位于VDR启动子区附近，其多态性是由于内含子1与外显子2交界处的碱基C向碱基T突变引起，并可产生一个额外的起始密码子，使转录活性增加、VDR蛋白氨基酸序列改变，最终阻碍维生素D的结合及信号传导[17]。BsmI位于VDR基因3′端非翻译区，其多态性可能会影响各种转录因子的结合，并影响VDR表达及其mRNA稳定性[18]。多项Meta分析表明，FokI及BsmI位点基因多态性与高血压、2型糖尿病、多囊卵巢综合征、多种癌症、糖尿病血管并发症、哮喘等遗传易感性显著相关[19-23]。目前已有的研究中，有报道FokI及BsmI位点与MetS遗传易感性显著相关[7]，但也有研究认为FokI及BsmI位点与MetS遗传易感性无关[8-9]。本研究为进一步明确VDR FokI和BsmI位点基因多态性与MetS遗传易感性的关系，进行了Meta分析以综合评价。

本研究应用循证医学方法，分别对VDR FokI rs2228570、BsmI rs1544410位点的5种模型进行了Meta分析。结果显示，VDR FokI位点突变可显著提高MetS患病风险，BsmI位点突变可显著降低MetS患病风险。FokI位点多态性在等位基因模型、显性模型、隐性模型及纯合子模型下均发现与MetS遗传易感性显著相关(P<0.05)；BsmI位点多态性在等位基因模型、杂合子模型下与MetS遗传易感性显著相关(P<0.05)。本研究结果显示，FokI rs2228570位点f等位基因、ff基因型及ff+Ff基因型可能是MetS发病的独立危险因素；BsmI rs1544410位点b等位基因与Bb基因型可能是MetS发病的保护性遗传因素。这与最近一篇 Meta[24]分析的结果不完全一致，该研究认为FokI与MetS发病无相关，但认为BsmI是MetS发病的保护性因素，推测可能与文献纳入排除标准及信息提取方式不同，影响合并分析的统计学效能，从而导致分析结果的不一致性。

本研究纳入的9篇文献质量均较高，Begg′s漏斗图和Egger′s检验均未检测到发表偏倚，漏斗图基本呈对称分布，提示纳入的文献整体不存在明显发表偏倚。敏感性分析也未发现OR、95%CI及异质性检验结果在5种基因模型下发生明显波动，表明本Meta分析结果稳健性较好。但本研究仍存在一定的局限，首先，纳入的文献仅为公开发表的中英文文献，不包括灰色研究，可能存在一定的发表偏移；其次，纳入的多是以医院为基础的研究，存在一定的信息偏移，且多为小样本研究，最终提取到的数量有限，可能会影响最终的统计效应；此外，MetS的发生发展可能与性别、年龄、遗传背景、环境暴露、维生素D摄入情况等有关，但本研究未提取到这部分的信息进行混杂因素调整，可能会对整体分析结果产生影响。

总之，VDR FokI rs2228570及BsmI rs1544410多态性与MetS遗传易感性显著相关，该结果对今后MetS的相关研究及临床实践有重要指导意义。但尚需通过更多大样本、多种族以及设计合理的研究验证。