南京地区体检人群胃蛋白酶原表达水平和意义

刘艳秋 ,陈家慧 ,王琼琼 ,何 萍 ,王 坤 ,立 彦△

1.南京医科大学附属南京医院/南京市第一医院核医学科,江苏南京 210006;2.深圳市新产业生物医学工程股份有限公司,广东深圳 518000

胃癌属于最常见的癌症之一,是导致全球癌症死亡的主要因素[1]。胃癌的发病率在东亚居首位,其次是中欧、东欧和南美地区,在北美和非洲地区则较低[2-3]。胃癌以Correa级联的渐进方式发展。此过程由幽门螺杆菌引发,首先发生慢性活动性胃炎,然后发展为慢性萎缩性胃炎、肠化生和发育异常,最后发展成浸润性癌[4-5]。因此,确定萎缩性胃炎作为胃癌癌前病变的危险因子,对于预防胃癌至关重要。在健康人群的研究中,采用非侵入性标志物来识别有风险的患者是一种方便且有效的方法。目前,最常用的是胃蛋白酶原(PG)Ⅰ和PGⅡ。PG 分泌到胃腔中并且可以在血清中发现,是胃黏膜终末分化的特定产物。随着胃炎严重程度的增加,血清PGⅠ和PGⅡ水平升高,但是当萎缩性改变发生在胃体时,PGⅠ水平和PGⅠ/PGⅡ(PGR)降低。因此这些标志物可以预测萎缩性胃炎、肠上皮化生和胃癌[6]。由于PG 水平会受到地域差异、饮食习惯及性别和年龄等因素的影响,不同地区的参考值范围可能出现差异,所以不同地区建立独立的实验室参考范围具有重要的意义。本研究采用全自动化学发光法,对南京部分健康体检人群血清PG 水平进行检测,就PGⅠ、PGⅡ及PGR在不同性别和年龄段的表达水平进行分析,为临床进一步研究提供依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2019年6月3日至2020年8月10日在南京市第一医院体检的4 192例健康者为研究对象。其中男2 519例,年龄20～92岁;女1 636例,年龄19～90岁。按照世界卫生组织年龄划分标准,分为以下3个年龄段:19～<45岁、45～<60岁、60～90岁。排除标准:患有急性或慢性感染、胃溃疡、恶性肿瘤、胃炎、心血管疾病、肝脏疾病、肺部疾病、肾脏疾病或内分泌疾病者。

1.2 方法

1.2.1 标本采集与处理 所有体检人群清晨空腹采集5.0 mL静脉血至采血管中。室温静置后,离心、分离血清,2～8 ℃贮存或直接上机检测。

1.2.2 实验室检查 血清PGⅠ、PGⅡ检测采用全自动化学发光法,在南京市第一医院核医学科的新产业生物公司MAGLUMI®X8仪器上进行检测,试剂由新产业生物公司提供。PGⅠ试剂批号(09518090501、0951900101、0951900201、0951900301);PGⅡ试剂批号(0961900301、0961900201、0961900101、0961800101)。

1.2.3 参考区间的建立 依据CLSI C28-A3文件标准建立PG的参考区间。PGⅠ水平用第2.5个百分位数(P2.5)和第97.5个百分位数(P97.5)分别表示参考范围的下限和上限;PGⅡ水平用第97.5个百分位数(P97.5)表示参考范围的上限;PGR 用第2.5个百分位数(P2.5)表示参考范围的下限。

1.3 统计学处理 采用统计软件SPSS19.0对数据进行分析。计量资料采用Kolmogorov-Smirnov法进行正态性分析,非正态分布的计量资料采用M(P2.5,P97.5)表示,组间比较Mann-WhitneyU检验。以P<0.01为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 PGⅠ、PGⅡ、PGR 在不同性别中的比较 男性PGⅠ、PGⅡ水平均高于女性,差异有统计学意义(P<0.01),女性PRG 高于男性,差异有统计学意义(P<0.01)。见表1。

表1 不同性别血清PGⅠ、PGⅡ水平、PGR 比较[M(P2.5,P97.5)]

2.2 PGⅠ、PGⅡ、PGR 在不同年龄段的差异比较 结果显示,PGⅠ、PGⅡ水平随着年龄的增加而增加(P<0.01),不受性别差异的影响;而PGR 则相反,随着年龄的增加而降低。见表2。

表2 不同性别、年龄组血清PGⅠ、PGⅡ水平、PGR 比较[M(P2.5,P97.5)]

2.3 不同性别、年龄组血清PGⅠ水平及PGⅡ、PGR的参考范围 结果显示,不同性别年龄组血清PGⅠ、PGⅡ水平及PGR的参考范围不同,见表3。

表3 不同性别、年龄组血清PGⅠ、PGⅡ水平、PGR 参考范围

续表3 不同性别、年龄组血清PGⅠ、PGⅡ水平、PGR 参考范围

3 讨论

胃癌是全球常见的恶性肿瘤,发病率和病死率均较高。由于其预后较差,晚期胃癌患者术后生存率低,对人类的健康造成了严重的威胁[7]。早期胃癌的临床症状一般表现为非特异性或症状较轻,因此,仅通过临床表现直接做出诊断难度较大,待患者就诊时,病变往往已处于中晚期。降低胃癌病死率的核心在于早发现、早诊断、早治疗。目前,临床上使用的早期胃癌筛查方法主要包括胃镜活组织检查和X 线钡餐检查,虽然诊断准确率较高,但疼痛程度较大,因此不宜用于疾病筛查[8]。

天冬氨酸蛋白酶类是一种可由胃黏膜分泌的水解酶,其构成了人PG的主要成分。一般由Ⅰ型(PGⅠ)和Ⅱ型(PGⅡ)两种类型组成。PG 水平可直接反映胃黏膜的功能状态与形态,与胃部疾病的分类密切相关。PGⅠ水平降低与萎缩性胃炎的严重程度相关,同时PGⅡ水平升高,PGR 也会降低[9-10]。此外,当PGR 下降时,胃癌的风险急剧上升[11]。基于以上病理学基础,部分研究充分肯定了PG 检测在胃癌大规模筛查中的价值,并已在一些高流行地区成功实施了该检测,如东亚的日本和韩国,相比之下,中国仍缺乏具体的胃癌筛查计划[12]。萎缩性胃炎是公认的肠型胃癌前体,通过检测PGⅠ和PGR 诊断萎缩性胃炎具有重要的临床意义。研究表明,不同的国家、地区,性别、年龄、饮食习惯的差异,以及不同幽门螺杆菌的感染水平,其血清PG 水平都存在一定差异[13-14]。目前,PG的检测方法较多,包括直接化学发光法、免疫荧光法、流式荧光法、免疫比浊法、放射免疫分析法等,由于实验室检测方法不同,PG 水平也不同[15-16]。

本研究采用全自动直接化学发光法对南京地区部分健康体检人群PG的水平进行检测,结果显示,男性PGⅠ、PGⅡ水平高于女性,而女性PGR 则高于男性,跟男女性在胃癌发病率上的差异相似,男性的PG水平可能受到生活习惯较差、饮食不规律、工作压力大的影响,普遍比女性要高。同时,随着体检人群年龄的增长,无论男性女性,PGⅠ、PGⅡ均出现上升趋势,而PGR 则呈现下降趋势,这与国内外部分报道结果一致[17-18],原因可能为 PGⅠ的分泌部位主要在胃底主细胞和颈黏液细胞,而PGⅡ的分泌部位更广泛,十二指肠、幽门等部位均可分泌,是整个胃部(即胃窦和胃体)炎症的标志物[19]。随着年龄增长,健康人患慢性胃炎、萎缩性胃窦炎等胃部疾病的风险和发病率都有所上升,此时 PGⅠ相应升高,而PGⅡ的升高幅度更大,导致PGR 下降。同时,幽门螺杆菌作为胃癌的独立危险因素之一,也能够通过刺激胃窦内的G 细胞增加胃泌素水平,进而直接刺激PGⅠ和PGⅡ的合成与分泌。然而,随着疾病的进展,胃体细胞逐渐丢失,导致PGⅠ水平下降,而PGⅡ水平较高或保持稳定,PGR 进一步下降[20]。

本研究结果显示,按照性别和年龄对PGⅠ和PGⅡ参考范围进行分析,在19～<45、45～<60、60～90岁这3个年龄段,男性PGⅠ参考范围分别为60.26～153.04、54.33～190.10、40.86～219.87 μg/L,PGⅡ参考范围分别为≤18.95、≤21.42、≤24.44 μg/L,PGR 参考范围分别为≥6.23、≥5.31、≥5.02;女性PGⅠ参考范围分别为52.95～143.44、51.21～148.91、41.82～226.34 μg/L,PGⅡ参考范围分别≤18.29、≤19.45、≤23.59 μg/L,PGR 参考范围分别为≥6.07、≥5.32、≥4.69。本研究结果与国外的研究结果有一定差异[21],可能与地区、检测方法和样本量不同有关。

本研究从健康体检人群中抽取标本,旨在探讨性别与年龄这两个影响因素对于PG 参考范围的影响及不同水平的临床意义。但种族、体表面积、吸烟、饮酒习惯、胃酸抑制史、幽门螺杆菌治疗史等因素没有排除。因此,进一步的研究旨在探索PG 在胃部疾病不同病变程度上的变化情况,幽门螺杆菌阳性对PG 水平的影响,以及PG 与幽门螺杆菌联合检测在胃癌风险预测中的价值。同时本研究通过对南京地区健康体检人群的PG 参考范围进行研究,发现和国内外的相关研究结果中存在一定差异的,说明建立本地区不同检测方法下的参考范围具有极大的必要性。