氨糖软骨素片制备工艺及其稳定性研究

刘磊，阴佳璐

神威药业集团有限公司（石家庄 051430）

骨氨糖软骨素片以D-氨基葡萄糖盐酸盐、硫酸软骨素、碳酸钙、鱼胶原蛋白及酪蛋白磷酸肽为主要原料，是一款可以增加骨密度、预防及缓解骨质疏松的保健食品[1]。氨基葡萄糖和硫酸软骨素广泛存在于结缔组织、肌腱、韧带及软骨中，两者联用可以协同促进软骨基质再生，有效保护及修复软骨组织[2-4]。钙是骨骼的重要组成成分，骨代谢与维持钙稳态密切相关，体内钙源充足是保证骨骼健康的前提[5]。胶原蛋白、酪蛋白磷酸肽可有效促进钙吸收，此外胶原蛋白作为关节软骨主要组成成分，与氨基葡萄糖、硫酸软骨素具有协同缓解骨关节炎的效用[6-7]。5种功效原料来源广泛，是增加骨密度类保健食品常用原料[8-9]。

结合原料对湿度有较高要求，因此选用剂型为薄膜包衣的片剂。片剂作为传统剂型，不仅剂量准确、质量稳定、易于运输，而且消费者服用和携带均十分方便，受到广泛的接受与认可[10]。在片剂生产过程中，添加一定辅料如黏合剂、润滑剂等极为重要，可以有效改善片剂片重差异及含量均一度等[11-12]。以制粒情况、压片情况、片剂硬度、脆碎度及崩解时间为考察指标，研究氨糖软骨素片的辅料使用、制备工艺，同时考察产品稳定性，以期为进一步生产利用提供参考依据。

护骨骼结构的完整性和硬度，足量钙营养对维持骨骼健康十分重要[9]。胶原蛋白作为结缔组织中的主要成分，不仅可以促钙吸收，还可与氨基葡萄糖、硫酸软骨素协同作用诱导软骨再生，防止关节损伤，有效缓解骨关节炎[7,10-12]。酪蛋白磷酸肽是牛奶酪蛋白的水解产物，具有极高安全性，可以有效促进钙的吸收和利用[13]。

1 材料与方法

1.1 样品与试剂

D-氨基葡萄糖盐酸盐（江苏澳新生物工程有限公司）；硫酸软骨素钠（嘉兴恒杰生物制药有限公司）；碳酸钙（宜都大恒碳酸钙开发有限公司）；鱼胶原蛋白（湖北瑞邦生物科技有限公司）；酪蛋白磷酸肽（上海统圆食品技术有限公司）；聚维酮K30、硬脂酸镁（安徽山河药用辅料股份有限公司）；薄膜包衣剂（天津爱勒易医药材料有限公司）。

1.2 主要仪器与设备

HC200C槽型混合机（宝鸡建华制药机械有限公司）；LYK160摇摆制粒机（重庆南方制药机械厂）；ZPV129旋转式压片机（上海天祥健台制药机械有限公司）；BGB-75B高效包衣机（温州市制药设备厂）。

1.3 氨糖软骨素片制备工艺流程

1.4 原料预混时间的确定

原材料预混工序是保健食品加工的重要工序，与片剂质量密切相关，原料混合的均匀程度直接影响片剂的质量，因此对原料混合时间进行确定。在预混工艺中，将称量后的D-氨基葡萄糖盐酸盐、硫酸软骨素、碳酸钙、鱼胶原蛋白及酪蛋白磷酸肽原料加入槽型混合罐中，分别在10，15和20 min时进行混合均匀性验证。通过检查混合粉色泽，并从混合粉6个不同部位取样检测标志性成分钙的含量，以混合粉色泽均匀、标志性成分钙的含量均匀度SRSD≤5%作为判定混合均匀的标准。

1.5 辅料的筛选

1.5.1 黏合剂添加量的确定

聚维酮K30作为黏合剂在片剂中使用较多，常用量2%~5%。为使制得颗粒的润滑性和流动性达到较好的效果，初步设定总混工艺硬脂酸镁添加量为1%。调节黏合剂聚维酮K30用量分别为2%，3%和5%，以制粒情况、颗粒休止角、压片情况、片剂硬度、脆碎度及崩解时限为指标，进行黏合剂添加量的确定。

1.5.2 润湿剂的筛选

产品对湿热较敏感，因此使用乙醇作为润湿剂，可以降低颗粒干燥温度，缩短干燥时间。为确定乙醇溶液的最佳体积分数，分别以60%，70%和80%乙醇溶液作为润湿剂进行制粒，后续按照工艺流程进行制备，以制粒情况、颗粒休止角、压片情况、片剂硬度、脆碎度及崩解时限确定最佳乙醇体积分数。

1.5.3 润滑剂添加量的确定

为保证片剂质量稳定、避免黏冲，需要加入润滑剂，食品药品制剂常用润滑剂为硬脂酸镁，硬脂酸镁在制剂中常用量为0.5%~1.0%。在总混工艺对硬脂酸镁添加量进行确定，聚维酮K30添加量5%，分别加入0.5%，0.7%和1.0%硬脂酸镁，以黏冲情况为指标确定硬脂酸镁添加量。

1.6 氨糖软骨素片稳定性测定

对氨糖软骨素片的质量稳定性进行分析，试验采用加速试验法。氨糖软骨素片包装为药用高密度聚乙烯瓶，在温度37±2 ℃，相对湿度75%±5%环境下存放，储存期为3个月。

1.6.1 感官评价

取10片该品，在良好自然光线下用肉眼观察片剂外表的色泽、形态，并用鼻嗅、口尝方法品其气、滋味。

1.6.2 理化指标检测

分别在第0，第1，第2和第3个月对氨糖软骨素片中理化指标进行测定，包括污染物（铅、总砷、总汞）、水分、灰分、蛋白质及崩解时限。其中，铅检测参照GB 5009.12—2010《食品安全国家标准 食品中铅的测定》第一法，总砷检测参照GB/T 5009.11—2003《食品安全国家标准 食品中总砷及无机砷的测定》第一法，总汞检测参照GB 5009.17—2014《食品安全国家标准 食品中总汞及有机汞的测定》第一法，灰分检测参照GB 5009.4—2010《食品安全国家标准 食品中灰分的测定》，水分检测参照GB 50009.3—2003《食品安全国家标准 食品中水分的测定》第一法，蛋白质检测参照GB 5009.5—2010《食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定》第一法，崩解时限检测参照中华人民共和国药典2010年版。

1.6.3 微生物学测定

分别在第0，第1，第2和第3个月按照GB 4789《食品安全国家标准 食品微生物学检验》对氨糖软骨素片中的菌落总数、大肠菌群、致病菌、霉菌及酵母菌进行测定。其中，菌落总数检测参照GB 4789.2—2010，大肠菌群检测参照GB/T 4789.3—2003，霉菌计数检测参照GB 4789.15—2010，酵母菌计数检测参照GB 4789.15—2010，沙门菌检测参照GB4789.4—2010，志贺菌检测参照GB 4789.5—2010，金黄色葡萄球菌检测参照GB 4789.10—2010，溶血性链球菌检测参照GB/T 4789.11—2003。

1.6.4 功效性成分测定

分别在第0，第1，第2和第3个月测定氨糖软骨素片中的盐酸氨基葡萄糖、硫酸软骨素、钙含量。其中，盐酸氨基葡萄糖检测方法参照GB/T 20365—2006《硫酸软骨素和盐酸氨基葡萄糖含量的测定 液相色谱法》，硫酸软骨素检测方法同上参照GB/T 20365—2006，钙含量检测参照GB/T 5009.92—2003《食品安全国家标准 食品中钙的测定》第一法。

2 结果与分析

2.1 原料预混时间的确定

不同混合时间下混合粉外观的检测结果如表1所示。混合时间15和20 min时，混合粉色泽均匀。为进一步确定混合时间，对混合粉不同部位标志性成分钙含量及SRSD值进行分析，试验结果如表2所示。混合时间15 min时SRSD值为3.73%，混合时间20 min时SRSD值为2.37%，原料混合均匀度均符合要求，但为节省生产时间，避免不必要的机能浪费，选择原料预混时间15 min。

表1 原料混合不同时间后外观检测结果

表2 不同混合时间下混合粉标志性成分钙含量的检测结果

2.2 黏合剂添加量的确定

聚维酮K30添加量筛选试验结果如表3所示。结果表明，添加量2%和3%均不易制粒，聚维酮K30添加量5%时，物料制粒效果较好，均匀且易成型，此时压片效果也较好。因此，确定5%聚维酮K30添加量。

表3 聚维酮K30添加量筛选试验结果

2.3 润湿剂添加量的确定

润湿剂添加量筛选试验结果如表4所示。使用70%乙醇作为润湿剂制粒时，制粒效果最好，且制得的颗粒均匀，硬度适中。因此，采用70%乙醇作为润湿剂。

表4 润湿剂添加量筛选试验结果

2.4 润滑剂添加量的确定

硬脂酸镁添加量筛选试验结果如表5所示。硬脂酸镁添加量1%时，压片时的黏冲现象得到明显改善，制得的片剂片面光滑。因此，确定1%硬脂酸镁添加量。

表5 硬脂酸镁添加量筛选试验结果

2.5 氨糖软骨素片稳定性测定结果

2.5.1 氨糖软骨素片感官评价结果

氨糖软骨素片的感官评价结果如表6所示。

表6 氨糖软骨素片感官评价结果

2.5.2 氨糖软骨素片理化指标测定结果

氨糖软骨素片理化指标如表7所示。结果表明，污染物（铅、总砷、总汞）含量、水分、灰分、蛋白质及崩解时限均符合要求。

表7 氨糖软骨素片中铅、总砷、水分、灰分、蛋白质及崩解时限测定结果

2.5.3 微生物学测定结果

依据GB 4789《食品安全国家标准 食品微生物学检验 总则》的试验方法检查氨糖软骨素片中微生物学指标情况，试验结果如表8所示。氨糖软骨素片在3个月的储存期内，未检出致病菌（包含沙门菌、志贺菌、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌），而菌落总数、大肠菌群、霉菌和酵母的检测结果符合GB 16740《食品安全国家标准 保健食品》中微生物限量要求。

表8 氨糖软骨素片微生物指标测定结果

2.5.4 功效成分测定结果

氨糖软骨素片中氨基葡萄糖、硫酸软骨素及钙含量如表9所示。盐酸氨基葡萄糖、硫酸软骨素及钙3种功效成分在储存期间内含量变化不大，由此说明功效成分在储存期内可维持稳定。

表9 氨糖软骨素片中功效成分测定结果 单位：g/100 g

3 结论

由于氨糖软骨素片原料均为细粉，流动性不佳，因此通过制粒改善物料的可压性。聚维酮K30是保健食品中常用的新型辅料，作为制粒所需黏合剂在片剂使用较多[13]。硬脂酸镁具有润滑、抗黏、助流作用，是应用最广的润滑剂，加入后可使得压片片面光滑美观[14]。辅料中使用聚维酮K30作为黏合剂，硬脂酸镁作为润滑剂，一方面可以改善颗粒的黏性，另一方面可改善颗粒的流动性，以便于制粒压片。

通过对辅料、工艺及产品稳定性的研究，得到氨糖软骨素片的片剂成型工艺条件。原料预混时间15 min，辅料中聚维酮K30添加量5%，以70%乙醇作为润湿剂制粒，硬脂酸镁的添加量1%时压片得到的片剂符合产品质量稳定性要求，且在贮藏过程中具有较好稳定性。