ɑ-乳香酸对肺动脉高压大鼠模型的在体干预作用

肖斌欢，刘 炎，林健贤，肖秋蓉

(惠州市第三人民医院心内科，广东 惠州 516000)

肺动脉高压(PH)的发病低，但致残、致死率高，威胁着人们的健康乃至生命。前期研究完成了α-乳香酸对PH压大鼠模型(离体)的干预保护作用观察及其机制的研究，我们观察到α-乳香酸参与了抑制缺氧诱导的肺动脉平滑肌细胞凋亡和增殖，对动物模型具有保护作用。本研究通过观察α-乳香酸对PH动物模型的在体干预作用，取得α-乳香酸在动物模型(在体)试验的第一手资料及毒理学资料，为后续的Ⅲ期临床试验打铺垫。

1 资料与方法

1.1一般资料：①材料：α-乳香酸(经高效液相色谱法测定，纯度≥98%，从阿拉伯半岛的乳香属植物sacra flückig-erdupiron中提取)在-20℃下获得并保存。②动物：基本按照美国国立卫生研究院《实验动物护理和使用指南》(NIH出版物编号85-23，1996年修订)来进行试验，并由广州医科大学实验动物伦理委员会批准。雄性SD大鼠[1-2]，平均体重110～150 g(5周龄)，来自广州医科大学实验动物中心，是得到完全认可的动物护理和使用机构委员会(IACUC)。本次研究经过本院医学伦理委员会同意。将大鼠置于22～24℃的受控环境温度，相对湿度50%，12 h明暗循环，并间歇向所有大鼠提供食物和水。

1.2方法：应用随机对照的方法，随机把SD 大鼠(雄性)分成四组(包含低氧干预组、低氧对照组、常氧干预组、常氧对照组)。由氧电极监测低氧舱舱内氧浓度，通过自动控制仪调控，充入氮气来平衡，使舱内氧浓度维持在10%O2/5%CO2/平衡N2。8 h/d，间歇缺氧[3]。就在同一实验室内，对照组大鼠呼吸室内空气(21% O2/5% CO2/平衡N2)。

低氧环境处理低氧干预组、低氧对照组大鼠。在常氧干预组和低氧干预组中，每组每天α乳香酸按体重(10 μg/g)1次口服给药，安慰剂应用于低氧对照组、常氧对照组大鼠4～8周；满 8周时，各组大鼠运用右心导管，对肺动脉平均压力(mPAP)、右心室平均压力(mRVP)进行检查估测并计算，然后立即处死动物，沿心脏室间隔边缘剪下右心室(RV)，对右心室、左心室(LV)+室间隔(S)称取质量，并制作肺动脉病理切片。

1.3观察指标

1.3.1一般情况：在分组前，称取各组大鼠体重，对一般状况、外观、呼吸、心跳进行观察，并作相应记录。

1.3.2右心导管检查：①肺动脉压力：测定收缩压、舒张压，根据它们计算出平均压；②右心室压力：根据右心导管检测结果计算mPAP、mRVP。实验进行满8周，1%戊巴比妥钠溶液腹腔注射进行全身麻醉，取1%肝素充盈右心导管，由右颈外静脉插入，穿过上腔静脉，经右心房、右心室，抵肺动脉，导管外端接生理多导仪，并连接DMP343型压力传感器，记录模型肺动脉压力、右心室压力，计算出平均值作为mPAP和mRVP。

1.3.3测定RV、LV+S重量：满8周时，进行右心导管检测肺动脉压力、右心室压力后，处死动物，取RV、LV+S称取重量，制作肺动脉病理切片。

2 结果

2.1试验各组第8周mPAP、mRVP的比较：低氧干预组、低氧对照组大鼠肺动脉压力在8周时差异有统计学意义(P<0.05)。常氧干预组、常氧对照组大鼠肺动脉压力在8周时差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 各组第8周时mPAP、mRVP的比较

2.2试验各组RV、LV+S及RV/(LV+S)的比较：低氧干预组、低氧对照组大鼠RV/(LV+S)重量比值在8周时差异有统计学意义(P<0.05)，常氧干预组、常氧对照组大鼠RV/(LV+S)质量比值在8周时差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

2.3病理结果：见图1。

表2 各组第8周时RV、LV+S及RV/(LV+S)比较

常氧对照组

3 讨论

乳香是一种Boswellia属中提取的树胶，这些木本植物生长在阿拉伯半岛、印度、索马里和埃塞俄比亚等处。尽管一些研究报道了β-乳香酸的抗炎作用，但是没有关于α-乳香酸在医药研究及临床应用中的科学数据。本研究采用缺氧大鼠模型，其主要原理是缺氧诱导肺血管纤维化。病理学家报道，肺血管纤维化存在于绝大多数的PH患者[4]。

前期的离体试验提示，缺氧诱导PH大鼠的肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖和凋亡，α-乳香酸抑制缺氧诱导的这种增殖和凋亡。这种抑制与抑制c-Jun氨基末端激酶(JNK1)和细胞外信号调节激酶(ERK)1磷酸化、mRNA表达和c-Jun激活等活动可能相关，并且通过抑制血管过氧化物酶1(VPO)1发挥抗炎作用，导致细胞周期停滞在S和G 2/M期。α-BA作为JNK1和ERK1抑制剂和炎性抑制剂，可能具有治疗PASMCs过度增殖和不适当凋亡相关疾病的潜在治疗剂[5]。

通过PH大鼠模型在体试验，本研究观察了α-乳香酸对动物模型的在体干预作用，结果提示α-乳香酸对PH动物模型低毒性，α-乳香酸抑制低氧大鼠模型肺动脉增厚，抑制模型右心室增厚增重，降低动物模型肺动脉压力，对PH大鼠具有保护作用。在体试验结果与离体试验基本一致，α-乳香酸有抗大鼠肺动脉纤维化的作用。α-乳香酸有望成为治疗PH新的良药。