大球盖菇工厂化栽培菌株筛选试验

严胜泽 詹美蓉 王圣铕 罗情情 王爱琴

（三明市农业科学研究院食用菌所，福建三明 365500）

大球盖菇Stropharia rugoso-annulata，俗称粗腿蘑、益肾菇、彩云菇，因其形似松茸，又名赤松茸，色泽艳丽、肉质细嫩、盖滑柄脆、清香可口、营养丰富，是国际食用菌市场十大交易菇类之一，也是联合国粮农组织（FAO）向发展中国家推荐栽培的特色品种之一[1]。大球盖菇栽培料来源广泛，如稻壳、稻草、玉米芯、木屑、桑枝、果枝等农林废弃物，且无须添加麸皮、米糠等价格较高的辅料，栽培成本较低。农林废弃物再利用栽培大球盖菇是促进农业生态良性循环的典范[2-3]。目前，大球盖菇栽培以室外发酵料栽培为主，产量不稳，经济效益低。为了探索工厂化栽培大球盖菇技术，提高大球盖菇产量、经济效益，笔者进行了大球盖菇工厂化栽培菌株筛选试验，旨在筛选出适合工厂化栽培的高产菌株，以期为大球盖菇工厂化栽培菌株的选用提供参考。

1 材料与方法

1.1 供试大球盖菇菌株

D-1（河南省食用菌菌种供应中心）、D-2（江苏省高邮市联谊食用菌技术推广中心）、D-3（北京吉覃园科技有限公司）、D-9（将乐金土地生态农业有限公司）、D-16（辽宁盘锦大球盖菇合作社）。

1.2 栽培菇房设计与布局

1.2.1 出菇房结构

菇房按工艺要求分为发菌房和出菇房。菇房平面宽2.6 m，长4.8 m，高3.5 m。按照双排库，东西走向布局，分为10 间出菇房和两间发菌房，中间公共通道长8 m，宽1.5 m。公共通道墙体铺贴阻燃、防潮聚乙烯发泡隔热层，有利于隔热保温降低能耗。菇架均为5 层，层距0.35 m，双列纵向排列，四周及中间留有过道。

1.2.2 设备

菇房有制冷、光照、通风三种主要设备。各菇房配备1 台5 匹的半封闭水冷制冷机组（沈阳谷轮制冷机有限公司），配套1台双出风（040内螺纹高温蒸发器）的吊顶冷风机（嵊州市赛方制冷设备有限公司）；或2 间菇房配备1 台8 匹的半封闭水冷制冷机组压缩冷凝制冷机组，配套2 台双出风的吊顶冷风机。出菇房的天花板上及纵向二垛墙各安装1盏40 W 日光灯。排风口设在离地30 cm 左右，另在每间菇房进门上方，离地3 m 左右的位置留有换气窗，在菇房外墙安装一台进气风扇，新鲜空气经室外打入菇房，废气由菇房的排气扇排至室外。

1.3 培养基

母种生长培养基（1 L）：蛋白胨1 g，酵母粉3 g，麦芽糖20 g，琼脂20 g，水1000 mL，pH自然。配置好培养基分装入18 mm×200 mm的试管中，每管10 mL，硅胶塞封口，121 ℃，灭菌20 min，冷却摆斜面备用。

测定菌丝生长速度的菌丝培养基（1 L）：蛋白胨1 g，酵 母 粉3 g，麦 芽 糖20 g，琼 脂20 g，水1000 mL，pH 自然。配置好培养基分装入锥形瓶中，硅胶塞封口，121 ℃，灭菌20 min，在超净工作台（苏州安泰SW-CJ-2FD）中倒入培养皿（北京白鲨生物科技有限公司，规格为90 mm×15 mm）中，每个培养皿倒入15～20 mL。

栽培料培养基：木屑20%，谷壳20%，稻草40%，棉籽壳20%。料含水量70%～75%。配置：提前1～2 d 预湿稻草，木屑最好提前2～3 个月淋水、发酵，有利于灭菌，菌丝充分吸收营养成分。按照培养料配方称取主辅料混合均匀，加0.5% 石灰，调节好含水量，堆成高1～1.2 m，宽1.0～1.5 m 的料堆。当距离堆顶20 cm 处料温达65 ℃左右保持24 h 后翻堆，发酵阶段共翻堆3～4 次，翻堆时视料水分适当补水。每平方米投料折干30 kg。

覆土为肥沃、疏松的菜园土，晒干后加水搅拌，含水量为20%左右，最后加入石灰调土为pH为6.0。

1.4 试验方法

1.4.1 母种培养

将活化后的菌种接入固体PDA 培养皿中心位置，30 ℃恒温培养，培养28 d左右。每个菌株培养5个培养皿，重复3 次。比较菌丝萌发时间，菌丝长势，测定比较菌丝生长速度。

菌丝平均生长速度的测定：待菌丝生长后，用十字交叉法测量菌落直径，每7 d 测量1 次，取平均值，计算菌丝的平均生长速度。

菌丝平均生长速度=菌落直径（cm）/菌丝生长时间（d）。

1.4.2 原种和栽培种培养

1 支 母 种 接750 mL 原 种 瓶3～5 瓶，温 度24～26 ℃，黑暗培养25～30 d。一瓶原种接栽培袋24～30袋，温度24～26 ℃，黑暗培养25～30 d。

栽培种菌丝平均生长速度测定：待菌丝封面后，每3 d观察菌丝吃料情况，待菌丝吃料一定高度时开始第一次画线，菌丝满袋后，进行第二次画线，并随机选取3个位置，测量两次画线间的生长量，取平均值。

菌丝平均生长速度=菌丝生长量（cm）/两次画线间隔天数（d）。

1.4.3 栽培试验方法

采用块栽方式。备一0.5 m×0.4 m×0.3 m 的木板模具，先将裁剪好的塑料膜铺入模具内，再铺料播种。先铺料10 cm 厚，然后播种（图1），再铺料10 cm，再播种一次。播种结束后，拆除模具，扎好塑料膜放在托盘上，送入发菌房培养菌丝。每个菌株播种5块，重复3次，试验共75块。

图1 铺料播种（白色为菌种）

1.4.4 发菌管理

发菌房内温度23～25 ℃，相对湿度70%～80%，无光照。培养7 d 左右，查看菌丝生长情况和培养料内温度，保持料内温度不超过26 ℃。

播种后1～2 d 菌丝开始定植，50～60 d 后，待大部分料快的菌丝长透料三分之二后开始覆土。覆土后料温控制25 ℃以下，室温控制在19～21 ℃，相对湿度80%～85%，控制CO2质量分数为2000 mg/kg以内。正常情况下覆土后3～5 d 能见到菌丝进入覆土层，逐渐转入生殖生长阶段。

1.4.5 出菇管理

按一间出菇房15 块，分3 间出菇房进行出菇管理。覆土后5～10 d 便可出菇。此阶段的管理是大球盖菇的又一关键时期，控制温度10～15 ℃，相对湿度90%～95%，CO2质量分数为2000 mg/kg 以内，光照500～700 lx，每天光照8 h。

1.4.6 采收

当子实体的菌褶尚未破裂或刚破裂，菌盖呈钟形时为采收期，最迟应在菌盖内卷，菌褶呈灰白色时采收。采收时，用左手压住物料，右手拇指、食指抓住菇体的下部，轻轻扭转一下，松动后再向上拔，要注意不要松动周围的小菇蕾，以免影响下潮菇的生长。采收后，须清理床面残留物，用土补平菇穴。记录各菌株产量，并计算生物学效率。

2 结果与分析

2.1 供试大球盖菇菌株母种菌丝生长比较

由表1可知，在母种培养基上，供试大球盖菇菌株均在24 h内萌发；D-16菌株菌丝平均生长速度最快（0.313 cm/d），但供试菌株间菌丝平均生长速度没有显著性差异；供试菌株菌丝均生长浓密、洁白，长势旺盛。

表1 供试大球盖菇菌株母种菌丝生长比较

2.2 供试大球盖菇菌株栽培种菌丝生长比较

由表2可知，在栽培种培养基中，大球盖菇菌株D-3 菌丝生长速度最快，日均生长速度为1.843 mm/d；供试菌株菌丝生长速度排序：D-3 ＞D-16＞D-9＞D-1＞D-2。D-3、D-16菌株菌丝生长浓密、洁白，长势旺盛，D-9、D-1、D-2生长较旺盛，洁白。

表2 供试大球盖菇菌株栽培种菌丝生长比较

图2 覆膜培养菌丝

图3 出菇阶段

2.3 供试大球盖菇菌株产量

由表3 可知，供试菌株产量由高到低排序：D-16＞D-3＞D-9＞D-1＞D-2，其中菌株D-16 产量最高，为15.96 kg/m2。

表3 供试大球盖菇菌株产量比较

3 小结与讨论

大球盖菇具有非常广阔的发展前景，该菇栽培技术简单粗放，具有极强的抗杂菌能力，栽培成功率高，栽培原料来源广，但是，其栽培模式多以传统栽培模式为主，费工、费时，且受自然环境影响较大[4]。试验采用工厂化块栽模式，成功地筛选出了两株性状优良、产量较高的大球盖菇菌株，为进一步研究大球盖菇工厂化栽培技术奠定了基础。但是，由于现有栽培水平较为粗放，受到各种环境因素的影响，加之大球盖菇自身生长特性的原因，导致采菇周期过长，大大地增加了工厂化栽培的成本。因此，缩短采菇周期，提高出菇产量，是今后工厂化栽培大球盖菇的主要研究方向。