长链非编码RNA SOX2OT在肝细胞癌组织中的表达及与预后的相关性

廖豪杰 李 俊 熊海林 袁 霞 袁乐中

广东省惠州市中心人民医院 (广东 惠州， 516000)

肝细胞癌(HCC)是常见的恶性肿瘤，是一种高死亡率的原发性肝癌。外科手术是临床上HCC最有效的治疗方法，术后1年及5年生存率分别可以达到80%及50%[1]。转移及复发是影响HCC患者预后的重要因素，术后2年及5年复发率分别为50%、75%左右[2]。因此，寻找预测HCC患者预后的生物标志物具有非常重要的临床意义。SOX2重叠转录本(SOX2OT)是定位于人类染色体3q26.33的长链非编码RNA(lncRNA)。有研究发现，lncRNA SOX2OT在多种恶性肿瘤组织中异常表达，且通过不同途径调控恶性肿瘤的生物学过程[3,4]，有望成为精准治疗及预后预测的新型生物标志物。本文将探讨lncRNA SOX2OT在HCC组织中的表达情况，及其与患者预后的相关性，为临床决策提供参考。

1 资料与方法

1.1 临床资料 回顾性纳入2017年1月至2019年6月于我院实施手术切除治疗的120例HCC患者。病例入选标准：①均经过临床及病理证实为HCC，年龄≥18岁；②术前均未进行相关放化疗或生物治疗；③均自愿接收HCC切除术；④临床资料及随访资料均完整。病例排除标准：①合并其他恶性肿瘤；②临床资料及随访资料不完整；③癌旁组织无炎症表现。纳入的120例HCC患者中，男98例，女22例；年龄20～85岁，平均(52.36±8.19)岁，72例(60.00%)患者肿瘤直径>5 cm，76例(63.33%)患者发生远处转移，56例(46.67%)患者的血清甲胎蛋白(AFP)>400 ng/ml，80例(66.67%)患者的乙型肝炎病毒(HBV DNA)>1 000 IU/ml。

1.2 入选患者HCC组织及癌旁组织lncRNA SOX2OT水平检测 采用RNA提取Trizol试剂盒提取患者HCC组织及癌旁组织总RNA，使用逆转录试剂盒合成cDNA，按照TOYOBO SYBR Green Realtime PCR Master Mix使用说明书进行qRT-PCR检测，采用2-△△Ct法计算lncRNA SOX2OT mRNA的表达水平。lncRNA SOX2OT引物序列为：5′-GCTCGTGGCTTAGGAGATTG-3′，5′-CTGGCAAAGCATGAGGAACT-3′；以GAPDH作为内参，引物序列为：5′-GTCAACGGATTTGGTCGTGATT-3′，5′-AGTCTTCTGGGTGGGCAGTGAT-3′。

2 结果

2.1 HCC组织lncRNA SOX2OT表达情况 入选患者HCC组织lncRNA SOX2OT表达水平为3.78±0.41，癌旁组织表达水平为1.53±0.22，差异有统计学意义(P<0.05)。

2.2 lncRNA SOX2OT表达与临床病理参数及血清学指标的相关性 按照HCC组织lncRNA SOX2OT的中位表达水平，将120例HCC患者分为高表达组(72例)与低表达组(48例)。98例男性患者中高表达55例(56.12%)，22例女性患者中高表达17例(77.27%)；56例年龄<50岁患者中高表达34例(60.71%)，64例年龄≥50岁患者中高表达38例(59.38%)；lncRNA SOX2OT表达与性别、年龄均无明显相关性(P>0.05)。lncRNA SOX2OT表达与临床病理参数及血清学指标的相关性见表1。

表1 lncRNA SOX2OT的表达与HCC患者病理参数的相关性 [例(%)]

2.3 lncRNA SOX2OT表达与预后的相关性 每6个月对患者进行随访，随访时间1～60个月(中位24个月)。随访期间，死亡39例(32.50%)，复发31例(25.83%)。lncRNA SOX2OT高表达组患者3年无瘤生存率及总生存率分别为25.00%(18/72)、41.67%(30/72)，lncRNA SOX2OT低表达组分别为64.58%(31/48)、85.42%(41/48)，差异均有统计学意义(P<0.05)。见图1。

图1 不同lncRNA SOX2OT表达水平HCC患者的Kaplan-Meier生存曲线

2.4 入选患者生存危险因素的COX回归模型分析 COX回归模型分析显示，低分化程度、有远处转移及SOX2OT高表达是影响HCC患者无瘤生存率及总生存率的独立危险因素(P<0.05)。见表3。

表3 HCC 患者无瘤生存率及总生存率的COX回归模型分析

3 讨论

HCC属于原发性肝细胞癌的一种，恶性程度高，患者预后差，已经成为临床研究的热点。目前，HCC的发病机制还不够清楚，但是研究发现多种基因参与了HCC的发生发展过程，例如：lncRNA、circ RNA等[5]。lncRNA是广泛存在于细胞核与细胞质中的一种线型RNA。近年来的大量研究发现，lncRNA能够通过多种作用途径参与恶性肿瘤的增殖、迁移及侵袭等生物学行为，从而患者的预后产生影响[6,7]。SOX2OT基因是定位于人类染色体3q26.33的一种lncRNA，具有多个转录起始点参与到多种人体生物学过程中。而且也有研究证实，lncRNA SOX2OT在多种恶性肿瘤的发生发展过程具有重要作用，并且与患者的预后存在明显相关性[8,9]。

lncRNA SOX2OT在肝癌中的研究报道很少。有一项研究发现，在84例肝癌患者中，相对于癌旁组织，SOX2OT在肝癌组织中过表达[10]；而本研究中，lncRNA SOX2OT在HCC组织中的表达水平明显高于癌旁组织；有研究显示，SOX2OT与肝癌组织分化程度、TNM分期及静脉侵犯均存在一定的相关性[11]；本研究中，lncRNA SOX2OT的表达与肿瘤病灶数目、分化程度、远处转移及HBV水平均存在明显相关性。以上研究结果显示，lncRNA SOX2OT在HCC组织中高表达可能预示患者的不良预后。lncRNA SOX2OT高表达HCC患者的无瘤生存率及总生存率均明显低于低表达HCC患者，进一步COX回归模型分析得出lncRNA SOX2OT高表达是营影响HCC患者生存的独立危险因素；上述研究结果表明lncRNA SOX2OT是HCC患者预后的潜在生物分子标志物，但是作用机制尚清楚。有研究发现，SOX2OT能够对恶性肿瘤细胞的活性进行明显的抑制，通过SOX2OT的自我更新能力，能够明显降低恶性肿瘤细胞的增殖、迁移及侵袭等生物学能力[12,13]。

综上所述，lncRNA SOX2OT在HCC组织中的高表达与患者的预后不良有关。但本研究属于小样本的回顾性研究，还需要多中心大样本研究进行进一步证实，且还需要对lncRNA SOX2OT预测HCC患者预后的作用机制进行深入研究。