HBV相关慢加急性肝衰竭血清AFP、GP73的表达与疾病预后关系分析*

杨 涛 苏 忠 杨 奕 刘 剑 李高岩

秦皇岛市第一医院普外一科 (河北 秦皇岛， 066000)

慢性乙型肝炎(CHB)是我国的高发疾病之一，主要是由于乙型肝炎病毒(HBV)感染所致，部分患者可在急性损伤或者其余某些诱因的作用下，在短时间内出现急性或者亚急性的肝功能失代偿，形成慢加急性肝衰竭(ACLF)，短中期病死率可高达50%～90%[1,2]。寻找与HBV相关ACLF(HBV-ACLF)的指标在早期干预疾病、改善预后方面具有重要作用。甲胎蛋白(AFP)是原发性肝癌诊断中的特异性标志物，临床上也多用于评价肝细胞再生情况[3]。高尔基体蛋白73(GP73)是近年来新发现的一类肝癌肿瘤标志物，有研究证实，血清AFP、GP73联合检测更有助于提高肝癌检出率，了解肝细胞损伤程度[4]。但关于两者在HBV-ACLF患者中的研究报道仍较少，因此，本研究通过观察HBV-ACLF患者血清AFP、GP73的表达，旨在探讨其与疾病预后的关系，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 回顾性分析2016年1月至2020年我院接诊的60例HBV-ACLF患者、60例CHB患者临床资料。

1.2 诊断标准 HBV-ACLF诊断标准参照《肝衰竭诊疗指南》[5]：有HBV感染病史，短期内出现极度乏力、消化道症状、黄疸、凝血功能障碍等症状，通过肝组织病理学检查显示有不同程度的肝细胞坏死性病变。CHB诊断标准参照《慢性乙型肝炎防治指南(2015年更新版)》[6]，并通过HBV血清学检查、HBV DNA定量、实验室指标等检查确诊。

1.3 纳排标准 纳入标准：①符合HBV-ACLF、CHB相关诊断标准者；②年龄18～60岁者；③临床资料完整者。排除标准：①其余类型肝炎病毒感染者；②合并失代偿期肝硬化者；③合并肝癌者；④由于药物、酒精、自身免疫性疾病等所致的肝功能衰竭者；⑤患者合并其余对生命安全有影响的重大躯体疾病、脏器功能障碍等；⑥妊娠期、哺乳期患者。并选择同期于我院体检的60例健康人员作为对照组，该组人员体检报告结果均正常，无肝炎病史及其他重大疾病。

1.4 检测指标 收集3组受试者的性别、年龄等一般资料，收集清晨空腹静脉血5 ml，凝聚2 h后，将血液样本上离心机进行离心处理，转速为3 500 r/min，时间15 min，完成后收集上层血清储存于-80℃的冷冻箱中准备检测。采用电化学发光法记录乙肝表面抗原(HBeAg)阳性情况，定量PCR法检测血清HBV DNA定量水平；血清AFP的检测选择罗氏公司生产的全自动生化免疫分析仪Coba6000及其配套的试剂盒，正常参考值<25 ng/ml；GP73的检测使用酶联免疫吸附法(ELISA)试剂盒，购自北京热景生物技术有限公司，并根据标准浓度曲线进行计算最终结果。

1.5 HBV-ACLF组亚分组方法

1.5.1 不同病情程度 参照《肝衰竭诊疗指南》[6]，对HBV-ACLF组患者的不同病情程度进行分组。①早期组：有极度乏力以及明显厌食、腹胀、呕吐等严重消化道症状；出现黄疸进行性加深表现，血清TBil结果>171 μmol/L或者每日升高程度≥17.1 μmol/L；有出血倾向，PTA 31%～40%；尚未发生肝性脑病或明显腹水。②中期组：在病情早期的基础上，病情出现进展，具有下述两项标准之一。a.发生Ⅱ度以下的肝性脑病，和(或)出现明显的腹水；b.出血倾向明显，有出血点或者瘀斑等症状，PTA 21%～30%。③晚期组：在病情中期的基础上，病情进展，具有下述3项标准之一。a.发生上消化道大出血、肝肾综合征、严重肝肾综合征、感染、难以纠正的电解质紊乱等现象；b.发生Ⅲ度以上的肝性脑病；c.出血倾向严重，PTA≤20%。

1.5.2 不同预后 根据患者3个月后的病情转归情况分组，其中病情好转出院或者病情得到稳定控制的患者分为生存组，病情恶化死亡的患者为死亡组。

2 结果

2.1 3组受试者基线情况比较 见表1。

表1 3组受试者基线情况比较

2.2 3组受试者血清AFP、GP73表达水平比较 见表2。

表2 3组受试者血清AFP、GP73表达水平比较

2.3 不同病情程度HBV-ACLF患者血清AFP、GP73表达水平比较 见表3。

2.4 不同预后HBV-ACLF患者血清AFP、GP73表达水平比较 见表4。

表3 不同病情程度HBV-ACLF患者血清AFP、GP73表达水平比较

表4 不同预后HBV-ACLF患者血清AFP、GP73表达水平比较

2.5 血清AFP、GP73和HBV-ACLF患者预后的Logistic回归分析 将血清AFP、GP73作为自变量，将是否死亡作为因变量，经过Logistic回归分析显示，血清AFP、GP73水平均是影响预后的独立危险因素(P<0.05)。见表5。

表5 血清AFP、GP73表达水平和HBV-ACLF患者预后的Logistic回归分析

3 讨论

研究显示，亚洲国家中约70%ACLF患者由HBV感染所致，寻找一种有效评估病情及预后的可靠指标在挽救预后方面显得极为重要[7]。HBV-ACLF的发病机制较为复杂，其中肝细胞的衰竭参与疾病的发生和发展。

AFP属于一种单分子糖蛋白，是白蛋白家族成员，主要合成在胎儿时期，正常的成年人机体中所检测出的AFP含量较少，但当肝细胞遭受到损伤后，抑制AFP合成的基因会发生激活，致使AFP大量合成于肝脏，并增加血清中AFP的表达[8]。目前AFP已成为临床上具有较高敏感度的肝脏肿瘤标记物，其表达升高可提示肝脏存在着恶性占位性病变[9，10]。近年来研究发现，由于AFP参与着肝细胞的增殖及调控过程，而在肝衰竭过程中，AFP的升高提示可能与肝细胞的生长速度有关，并和患者的预后关系密切[11]。

GP73是美国学者Kladney等在对成人巨细胞肝炎病原学研究时所发现的一类跨膜糖蛋白，其基因主要位于第9号染色体，相对分子含量约为45 000，随着之后临床研究的不断深入，GP73已被证实在肝癌的诊断中具有重要意义[12]。王春艳等[13]研究中指出，CHB患者血清中GP73的表明显升高，但和肝脏炎症程度、肝纤维化之间呈正相关。另也有研究指出，在HBV慢性病毒感染患者中，GP73的表达和HBeAg阳性、病毒载量之间无明显关系，但与肝脏疾病进程之间密切相关，有助于判断肝损伤程度[14]。

本研究结果显示，和其余两组相比，HBV-ACLF组患者血清AFP、GP73表达明显升高，随着病情的加重，血清AFP逐渐降低，而GP73逐渐升高，且两者均是影响预后的独立危险因素，显示出血清AFP、GP73在HBV-ACLF患者的发生和发展过程中均具有重要作用，通过分析是由于有以下原因：①和CHB及健康人群相比，HBV-ACLF存在着肝细胞损伤现象，血清AFP的含量出现升高，而AFP又具有促进变异性蛋白含量增加、肝细胞再生等作用，随着病情的加重，肝细胞坏死程度会更为严重，肝细胞再生能力越差，因此也就导致了AFP表达更低的现象，且在死亡患者中，肝细胞的再生速度远远不及其坏死速度，AFP的表达则呈急剧降低趋势，李雷等[15]分析中指出，当AFP>121 μg/L时可提示急性肝衰竭患者预后较好，生存情况好，但当小于这个水平时则可提示患者预后较差，病死率较高；和本研究得出的结论有一定相似性；②和CHB患者相比，HBV-ACLF患者的肝脏会处于更为严重的炎症及应激的状态，可进一步加剧GP73大量释放，而随着GP73的过量表达，也可进一步加重肝损伤程度，影响肝细胞再生，形成一种恶性循环，且在病情较重及死亡的患者中，肝损伤程度和肝脏组织会发生重构及纤维化，细胞核及线粒体的正常生理功能遭受到破坏，此过程也会导致GP73的大量释放。因此笔者认为，通过了解HBV-ACLF患者基线AFP、GP73的表达有助于判断患者短期预后，而在今后的临床中，也可通过动态监测AFP、GP73的表达变化，在指导临床用药上也具有积极意义。但本研究也存在不足，仅观察了基线血清AFP、GP73的表达，未分析两者在对HBV-ACLF诊断价值等内容，此后也需进一步深入研究。