咽拭子培养联合降钙素原、C反应蛋白及肺炎支原体检测在儿童肺炎诊断中的应用

赵贺红，曹丽敏，董凤芝

（1.河南省开封市人民医院 检验科，河南 开封 475000；2.天津医科大学中新生态城医院，天津 300467）

肺炎作为儿童最常见及最重要的呼吸系统疾病之一，主要以过敏性变态反应或吸入羊水、油类及病原体感染等引起肺部相应性局部炎症为特征，具有较高的病死率，其特点包括咳嗽、发热、呼吸不畅、食欲下降、腹泻、呕吐等症状为主要表现，好发于我国北方地区冬春季节［1］。儿童一旦罹患肺炎性相关疾病，应及时进行治疗，按照诱因的不同可将其分为细菌性肺炎、病毒性肺炎、真菌性肺炎、支原体肺炎及衣原体肺炎等若干类型。细菌性肺炎的患儿降钙素原（PCT）及C 反应蛋白（CRP）明显升高［2-3］，肺炎支原体肺炎患儿支原体培养及肺炎支原体（MP）检测阳性率升高明显［4］。儿童肺炎发病较急，因此早期有效识别各型肺炎，及早进行对照诊治显得尤为重要。故本研究选取开封市人民医院收治的各型儿童肺炎病例339 例，通过对其进行咽拭子培养及全血PCT、CRP 和MP 检测分析探讨其在各型肺炎的临床鉴别应用价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

本研究采用回顾性分析开封市人民医院儿科病区2018 年10 月至2020 年11 月339 例收治入院的肺炎患儿，其中男167 例，女172 例；年龄2～10 岁，平均（4.3±0.6）岁；分为细菌性肺炎组115 例、病毒性肺炎组113 例、肺炎支原体肺炎组111 例。另外选取健康儿童105 例作为对照组，男58 例，女47 例；年龄2～11 岁，平均（4.7±0.8）岁。排除标准：原发性肝、肾、心、肺功能异常，其它感染性疾病以及血液病史。所选健康儿童性别、年龄与实验对象构成比差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究征得经医院医学伦理委员会批准并告知患者家属知情同意。

1.2 方法

各研究对象均于晨起采集静脉血2 mL 于EDTAK2 真空紫色抗凝管，并使用无菌咽拭子采集鼻咽部分泌物于无菌管。对抗凝管血液标本进行尽快检测，所有实验项目均在1 h 内完成相关检测及接种培养。

PCT 检测采用荧光免疫层析法，仪器为上海奥普生物医药有限公司生产便携式荧光免疫分析仪（型号：Maya-500，注册证编号：沪械注准20192220131），试剂批号为机器配套的检测试剂盒，参考值为0.0～0.5 ng/mL，在此区间为正常（或认为是阴性），超过0.5 ng/mL 视为阳性（或认为有感染可能）。CRP 采用乳胶增强免疫散射比浊法进行测定，仪器为BC-5180 全自动血液细胞分析仪（深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司），试剂为机器配套的检测试剂盒，参考值为0.0～10.0 mg/L。MP 采用胶体金免疫层析技术进行检测，试剂盒由珠海丽珠试剂股份有限公司提供，结果判读为阴性、阳性和保留三种。MP 培养采用安图生物支原体培养鉴定计数药敏试剂盒（郑州安图生物工程股份有限公司），培养48 h 判读，其培养液颜色由桔红色转变成黄色表明有MP 生长，结果判读为阳性，培养液如无颜色改变为无MP 生长，结果判读为阴性。所有检测试剂批号均在有效期内使用。

1.3 统计学方法

本研究所有数据经SPSS 20.0 软件进行统计学处理。计量资料以均数±标准差（±s）表示，多组间比较用单因素方差分析，两两比较用t检验；计数资料以百分率（%）表示，用χ2检验。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清PCT 和CRP 检测结果分析

血清PCT 和CRP 在细菌性肺炎组中均显著上升，差异有统计学意义（P＜0.05）；且PCT+CRP联合检测针对细菌性肺炎的诊断与鉴别明显优于单独检测，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1、表2。

表1 各组血清PCT、CRP 水平比较（±s）

表1 各组血清PCT、CRP 水平比较（±s）

注：†与对照组比较，P＜0.05。

表2 各组血清PCT、CRP 及联合检测阳性例数比较（例）

2.2 MP 和咽拭子检测结果分析

肺炎支原体肺炎组MP 检测阳性率、咽拭子培养阳性率显著高于其他几组，差异有统计学意义（P＜0.05）；且MP+咽拭子培养联合检测针对肺炎支原体肺炎的诊断与鉴别明显优于单独检测，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表3 各组MP、咽拭子及联合培养阳性率比较 ［n（%）］

3 讨论

儿童免疫力相对较低，肺炎的发病率在儿童群体中居高不下，且具有相对较高的病死率。儿童是一个特殊的群体，因其语言表达能力差，所以儿科临床医生如何能够快速准确鉴别各型肺炎，并给予及时正确的治疗显得尤为重要。

PCT 是一种含有116 个氨基酸，生理情况下主要由甲状腺C 细胞合成分泌［5-6］的蛋白质，当机体受到细菌攻击感染时，上皮细胞合成表达PCT 浓度则引起上调。PCT 在细菌攻击所引起的周身性炎症早期反应中（2～3 h）即可显著升高，炎症反应12～24 h 即可达到峰值，患者受感染的程度比例与PCT 测定的数值呈正相关性，当机体所受感染因素消除后PCT 浓度即可恢复正常水准［7］；而当患者机体受到病毒性感染时，PCT 表达正常，这一数据变化可以用于初步协助评价患儿受到细菌性感染的危险程度［8］。本研究通过PCT 浓度的升高来区分儿童细菌性肺炎，指导临床准确快速用药，尽早减轻患儿痛苦。

超敏CRP 作为可以与肺炎链球菌的C 多糖体反应的一种急性时相反应蛋白，其通常主要由肝细胞分泌合成。在组织发生损伤6～8 h 就开始升高，峰值高度可以达到正常参考范围的20～500 倍，而当机体所受致病因素解除后CRP 则能够迅速降到正常范围［9］。CRP 在血液中的半衰期短暂（＜1 d），现在已广泛应用于临床，在观察抗生素治疗疗效时具有一定的参考价值。有研究指出CRP 对儿童肺炎早期检测特异度低，单独检测CRP 对鉴别各型肺炎意义不大［10］，因此本研究将实验对象进行PCT 与CRP 联合检测，且实验结果显示CRP 和PCT 联合检测能提高儿童细菌性肺炎的检出率。

从人类体内可以分离得到的支原体种类具有12 种，但能够对人体致病并可以引人类肺部炎症的仅有MP 这一种。支原体所引起的肺炎以患者多为儿童和青少年，长期顽固性咳嗽，头孢类及青霉素类常用药物对其治疗无效为特点。机体感染后MP 最早能在血清中检测到其抗体，对于MP 所引发的肺部炎症早期的诊断、早期的治疗具有很大意义。MP 作为主要的人类原发性非典型性肺炎病原体之一，其可从人体的上呼吸道以及口腔处分离采集。MP 通常经飞沫进行传播，主要易感人群为青少年及儿童。通过染色直接镜检病人的分泌物标本诊断MP 意义欠佳，是由于其没有固定的形态特点，导致染出的结果与样本中的组织碎片等杂物不能够进行区分，实验室通常主要通过微生物分离培养检验及依靠血液学免疫球蛋白M（IgM）抗体检查法。临床上通常采集胸水、痰、鼻咽部位及支气管部的分泌物等，由于儿童采集鼻咽部分泌物比较方便，通过咽拭子细菌培养出致病菌的方式可对儿童细菌性肺炎的诊断和治疗提供很大帮助；咽拭子MP 培养联合MP 检测可对儿童肺炎支原体肺炎的诊断和治疗提供帮助［11-12］。MP 阳性则表明该儿童现在感染或者近期曾经感染肺炎支原体肺炎，具有一定的假阳性与假阴性率；咽拭子MP 培养阳性表明儿童现在感染MP，但阳性率较低。血MP 检测联合咽拭子MP 培养结果可对该儿童是否为现在感染做出精准判断，并提高其检出率［13］。

本研究表明血清PCT、CRP 和MP 检测方便，快速；咽拭子培养耗时虽长，但是作为肺炎支原体肺炎来鉴别意义重大。咽拭子培养联合血清PCT、CRP 和MP 检测对儿童肺炎的分型很有帮助，并能够精准指导临床用药。

综上所述，我国各个地区医疗资源配置不同，儿童感染肺炎就医后如何能快速准确的鉴别和诊治显得尤为重要。咽拭子培养联合PCT、CRP 及MP 检测能够在儿童肺炎诊断的早期进行指导。临床医生可根据检测结果针对性采取预防与治疗的措施，对延缓和阻止肺炎的发生与发展具有积极的临床意义。