浓酱兼香型白酒中甲醇和己酸检测方法研究

马晓斌，乔 笠，王雁秋，向雅洁

（松滋市公共检验检测中心，湖北松滋 434200）

浓酱兼香型白酒是具有浓香兼酱香独特风格的白酒[1]，深受消费者喜爱。白酒在发酵的过程中会产生对人体有害的甲醇[2]，因此，准确的检测浓酱兼香型白酒中的甲醇含量，对于保障人体健康具有重要的意义。己酸是己酸乙酯的前体物质，起到呈香、助香、减少酒体刺激以及缓冲平衡的作用[3]，对浓酱兼香型白酒的风味有较大的影响。

孟雄飞等[4]建立气相色谱法同时检测酒中的甲醇、乙酸乙酯、己酸乙酯等10种成分的方法，标准曲线相关系数均在0.9990 以上，加标回收率在82.3%～118.6%，具有较高的准确度和精密度。季方等[5]利用CP-Wax 57CB 色谱柱型，采用气相色谱法对浓香型白酒中己酸检测方法进行研究，己酸加标回收率96.1%～102.9%。韩旭等[6]建立白酒中同时检测己酸乙酯和己酸的毛细管气相色谱分析方法，己酸乙酯和己酸加标回收率分别为99.12%～103.22%和98.52%～101.23%。目前，同时检测浓酱兼香型白酒中的甲醇和己酸的方法尚未见报道。本研究结合GB 5009.266—2016《食品安全国家标准食品中甲醇的测定》[7]和《浓香型白酒》报批稿中己酸的测定，优化检测条件，最终得到同时检测浓酱兼香型白酒中甲醇和己酸的检测方法。

1 材料与方法

1.1 材料、试剂及仪器

白酒样品：湖北白云边股份酒业有限公司浓酱兼香型白酒。

试剂及耗材：甲醇（Dr.Ehrenstorfer 纯度99.9%），叔戊醇（Dr.Ehrenstorfer，纯度99.9%），己酸（山东西亚化学试剂有限公司，纯度99.9%），2-乙基丁酸（山东西亚化学试剂有限公司，纯度99.9%）。

仪器设备：安捷伦7890B 气相色谱仪配备FID检测器；梅特勒-托利多ME403 电子天平；漩涡混合器。

1.2 标准溶液的配制

1.2.1 混合标准储备液的制备

准确称取甲醇和己酸各0.5 g，置于100 mL 容量瓶中，用60 %乙醇溶液稀释至刻度，摇匀，作为混合标准储备液。

1.2.2 混合内标标准溶液的制备

准确称取叔戊醇和2-乙基丁酸各2 g，置于100 mL 容量瓶中，用60%乙醇溶液稀释至刻度，摇匀，作为混合内标标准溶液。

1.2.3 样品溶液的制备

准确吸取白酒样品10.0 mL 置于离心管中，加入内标混合溶液0.10 mL，混匀，作为样品溶液。

1.2.4 标准曲线的配制

准确吸取混合标准储备液1 mL、2 mL、4 mL、5 mL、8 mL，置于50 mL 容量瓶中，分别加入混合内标标准溶液0.5 mL，用60%乙醇溶液稀释至刻度，摇匀制备成100 mg/L、200 mg/L、400 mg/L、500 mg/L、800 mg/L混合标准系列溶液。

1.2.5 色谱条件

色谱柱：ZB-WAX plus(60 m×0.25 mm×0.25 μm)；载气流量：1.0 mL/min；升温程序：初温40 ℃保持1 min，3 ℃/min 升至130 ℃，10 ℃/min 升至200 ℃保持5 min；检测器温度：250 ℃；氢气流速：40 mL/min ；空气流速：400 mL/min；进样口温度：200 ℃，进样量：1 μL，分流比：30∶1。

2 结果与分析

2.1 色谱条件优化

试验研究了不同分流比（20∶1、30∶1、40∶1）和第二阶段升温速率（2 ℃/min、3 ℃/min、4 ℃/min）组合色谱条件对被测组分分离度的影响。综合考虑分析时间和分离度两个条件，分流比30∶1 和第二阶段升温速率3 ℃/min 为最佳色谱条件。混合标准溶液和浓酱兼香型白酒样品溶液色谱图分别见图1和图2。

图1 混合标样色谱图

图2 浓酱兼香型白酒样品色谱图

2.2 校准曲线

图3 所示混合标准曲线中甲醇标准曲线，以甲醇浓度为横坐标，以甲醇峰面积与叔戊醇峰面积比值为纵坐标进行线性回归，甲醇回归方程y=0.00232x-0.00542，R2=0.99998，R2≥0.99，满足检测要求。以己酸浓度为横坐标，以己酸和2-乙基丁酸峰面积比值为纵坐标绘制己酸标准曲线，如图4所示。己酸回归方程y=0.00624x-0.01289，R2=0.99743，R2≥0.99，满足分析要求。

图3 甲醇标准曲线图谱

图4 己酸标准曲线图谱

2.3 精密度试验和加标回收试验

浓酱兼香型白酒样品在统一条件下重复测定6次，计算甲醇和己酸在不同加标浓度下相对标准偏差（RSD）和加标回收率。所得结果见表1。该法的甲醇标准偏差在1.0%～1.9%之间，己酸标准偏差在0.6 %～1.1 %之间，结果表明，本方法具有良好的精密度。甲醇平均加标回收率分别为100.456 %、99.963 %、100.571 %，己酸平均加标回收率分别为100.976%、96.331%、99.531%,表明本方法的回收率令人满意。

表1 精密度检验(n=6)和加标回收率结果

3 结论

本实验采用内标法对浓酱兼香型白酒中的甲醇和己酸进行分析，该方法能同时准确的测定甲醇和己酸含量，操作简单，相关性系数(R2)、精密度（n=6）和回收率满足检测要求，可以用于浓酱兼香型白酒中的甲醇和己酸含量的检测。