慢性阻塞性肺疾病患者调节性T细胞、树突状细胞水平和中性粒细胞计数/淋巴细胞计数比值与症状严重程度及肺功能的关系

赵展 李准 曲慧

慢性阻塞性肺疾病(COPD)是以气流阻塞为特征的慢性支气管炎、肺气肿，进一步可发展至肺源性心脏病和呼吸衰竭[1]。流行病学调查结果显示，全国COPD总患病人数接近1亿人，其中60岁以上成人COPD患病率达27.0%[2]，是老年患者死亡的主要病因，因此探究COPD的发病机制具有重要意义。COPD的发生、发展与机体免疫功能和炎症反应有关[3]，中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)是临床新近发现的炎症反映指标，但应用于COPD的研究相对较少[4]。调节性T细胞(Treg)和树突状细胞(DC)水平均可有效反映机体免疫功能，但在COPD患者症状严重程度和肺功能的研究有待深入。本研究主要探讨COPD患者Treg、DC水平和NLR与其症状严重程度及肺功能的关系，旨在为临床评估COPD患者病情、提高临床诊疗率和改善患者生活质量等提供依据。

对象与方法

1.对象：纳入2018年3月～2020年1月我院收治的240例COPD患者(COPD组)，COPD诊断均符合《慢性阻塞性肺疾病诊断指南》[5]。选择同期在我院体检的50例健康受试者(对照组)。两组患者一般资料比较差异均无统计学意义(P>0.05)，见表1。本研究经我院伦理委员会审核通过，所有受试者均知情同意。

2.方法：

(1)一般资料收集：收集所有受试者的一般资料，包括年龄、性别、BMI、文化程度、吸烟及饮酒情况。

(2)分组评估标准[6]：收集患者分组评估指标，具体如下：(1) 肺功能：用日本捷斯特HI-801型号肺功能测试仪，测定第1秒用力呼气量(FEV1)和用力肺活量(FVC)等指标。(2) CAT评分：用COPD评分量表进行评价，根据慢性阻塞性肺疾病全球倡议(GOLD)2011指南，CAT评分<10分，判定为症状轻，CAT评分≥10分，判定为症状重。(3) COPD加重(AECOPD)次数：记录诊疗前12个月发生AECOPD的次数。低危：AECOPD发生次数<1次，FEV1≥50%；高危：AECOPD发生次数≥2次或FEV1<50%。将240例COPD患者分为A组(低危、轻症状，58例)、B组(低危、重症状，56例)、C组(高危、轻症状，64例)和D组(高危、重症状，62例)。

表1 两组患者一般资料比较

(3)观察指标：采集患者空腹外周血，5 ml用于Treg亚群指标检测，5 ml用于DC亚群指标检测，2 ml用于血常规指标检测。①Treg亚群指标检测：用淋巴细胞分离液分离外周血单核细胞，细胞液加入抗CD4-FITC和CD25-PE单抗，并以IgG-FITC和IgG-PE作为对照，采用FAS-Calibur型号流式细胞仪(美国BD公司)检测CD4+CD25+Treg水平，单抗购自美国BD公司。②DC亚群指标检测：采用FAS-Calibur型号流式细胞仪(美国BD公司)检测血检样本髓样树突状细胞(mDCs)、浆细胞样树突状细胞(pCDs)、CD123+和CD11+等DC亚群，并用CellQuest软件分析DC亚群水平。③NLR：采用BS-280型号全自动生化分析仪(深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司)测定中性粒细胞和淋巴细胞计数，计算NLR。

结 果

1.5组受试者肺功能指标比较：5组受试者肺功能指标比较差异有统计学意义(P<0.05)。对照组、A组、B组、C组及D组患者FEV1和FVC水平依次降低，除B组和C组比较差异无统计学意义(P>0.05)外，余两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 5组受试者肺功能指标比较

2.5组受试者Treg亚群水平比较：5组受试者Treg亚群水平比较差异有统计学意义(P<0.05)；对照组、A组、B组、C组及D组患者CD4+Treg、CD25+Treg、CD4+CD25+Treg水平依次降低，除B组和C组比较差异无统计学意义(P>0.05)外，余两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 5组受试者Treg亚群水平比较

3.5组受试者DC亚群水平比较：5组受试者DC亚群水平比价差异有统计学意义(P<0.05)；对照组、A组、B组、C组及D组患者CD123+DC和CD11+DC水平依次降低，mDCs和pCDs DC水平依次升高，除B组和C组比较差异无统计学意义(P>0.05)外，余两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。见表4。

4.5组受试者NLR比较：5组受试者NLR比较差异有统计学意义(P<0.05)；对照组(2.08±0.49)、A组(3.13±0.58)、B组(5.45±0.67)、C组(5.48±0.54)和D组(7.87±0.76)NLR依次升高，除B组和C组比较差异无统计学意义(P>0.05)外，余两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。

表4 5组受试者DC亚群水平比较

5.肺功能指标与Treg亚群、DC亚群和NLR的相关性：Spearman相关分析结果显示，FEV1及FVC与CD4+Treg、CD25+Treg、CD4+CD25+Treg、CD123+DC和CD11+DC水平呈正相关(P<0.05)，而与mDCs、pCDs和NLR呈负相关(P<0.05)。见表5。

表5 肺功能指标与Treg亚群、DC亚群和NLR的相关性

讨 论

COPD的发病机制尚未阐明[7]，但临床上通常认为其与炎症反应和免疫功能紊乱相关[8]。卓超洲等[9]研究表明，NLR与COPD患者病情的发展密切相关。DC参与淋巴细胞的激活或分化，进而调控免疫应答方式，Treg在识别自身抗原肽、下调免疫反应机能等方面发挥重要作用，但二者在COPD中的研究较少，因而本文研究COPD患者Treg、DC水平和NLR与其症状严重程度及肺功能的关系，旨在为临床提供依据。

COPD本质是慢性炎症反应疾病，炎症因子和潜在标志物的研究是临床重点[10]。本研究表明，5组受试者NLR比较差异有统计学意义，且肺功能指标与NLR呈负相关，提示COPD与炎症因子的异常表达相关。分析认为，COPD病理特征为中性粒细胞、巨噬细胞和淋巴细胞等细胞在肺实质和气道中聚集，增加机体炎症反应，加重病情。罗德云等[11]研究了210例COPD患者，结果发现，NLR可有效预测AECOPD感染性死亡，对炎症和疾病的预测有一定的作用。Lee等[12]研究结果表明，NLR水平与COPD患者气流受限程度有关，且NLR水平越高，其COPD病情加重的几率越高，可作为AECOPD的典型炎症标志物。

COPD的炎症反应会破坏机体正常的免疫功能，表现为Treg和DC的异常表达。本研究结果显示，5组受试者DC亚群和Treg亚群水平比较差异均有统计学意义，且肺功能指标与CD4+Treg、CD25+Treg、CD4+CD25+Treg、CD123+DC和CD11+DC水平呈正相关，而与mDCs和pCDs呈负相关，提示COPD症状严重程度与免疫功能紧密联系。从一定程度上来说，DC可作为人体免疫系统的启动因子，在COPD的产生、发展及恶化加重等进程中具有明显作用，而检测CD123+DC、CD11+DC、mDCs和pCDs等可有效评估机体免疫状况，为预防和治疗COPD提供临床参考[13]。CD4+CD25+Treg是新发现的T细胞亚群，可负性调节免疫功能，郝璐等[14]研究发现，COPD患者血液中Treg水平明显高于正常人群，CD4+CD25+Treg可发挥拮抗免疫应答，参与COPD疾病的发展和转归。本研究样本量较小，需纳入多中心样本对象，以验证研究结果；同时本研究仅针对COPD症状严重程度分组，未探讨预后等方面，可作为下一步研究思路。

综上所述，Treg亚群、DC亚群和NLR对于评估COPD患者的症状严重程度和肺功能等具有重要的临床价值，值得临床进一步研究并推广。