血清Gd-IgA1、IL-6水平对儿童紫癜性肾炎的诊断效能

徐闪闪，丁樱，2，韩姗姗，代彦林，张霞，2

1河南中医药大学儿科医学院，郑州 450000；2河南中医药大学第一附属医院儿科

紫癜性肾炎（HSPN）又名IgA血管炎性肾病，是以免疫球蛋白A（IgA）为主继发于过敏性紫癜（HSP）的肾小球疾病，多发于儿童时期，发病年龄高峰为4～6岁，以血尿和（或）蛋白尿及肾外小血管炎性为主要临床表现［1-3］。HSPN预后一般良好，但仍有高达20%的患儿出现肾功能不全甚至发展为终末期肾衰竭，威胁患儿生命健康［4］。肾脏受累的程度影响着远期预后，故及时评估肾脏的病变情况至关重要。肾脏穿刺是评估肾脏病理变化的公认标准，但其具有创伤性，有潜在风险，且基层医院多不具备肾穿的条件。因此，寻找无创及安全评估HSPN病情的实验室指标一直为大家所关注。免疫、环境、遗传及细胞因子、炎性介质等多种因素参与了HSPN的发病与发展，其中异常糖基化的IgA1（Gd-IgA1）是非常重要的因素［5-6］。Gd-IgA1及形成的免疫复合物在肾脏中沉积，可引起系膜细胞的增殖、细胞外基质的分泌及细胞因子和炎症趋化因子的释放，造成肾脏的损伤，推测Gd-IgA1可能是肾脏损伤的潜在指标［7-9］。细胞因子IL-6在HSPN患者中也存在高表达，直接作用于血管内皮引起全身性小血管炎症及肾脏损伤外，可通过不同的信号通路影响糖基化关键酶的活性，导致Gd-IgA1形成增加［10-11］。目前，国内外对Gd-IgA1及IL-6在HSPN诊断中的价值研究较少。本研究通过检测HSPN血清Gd-IgA1、IL-6水平，并分析血清中Gd-IgA1及IL-6对HSPN的诊断效能。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2018年5—12月河南中医药大学第一附属医院收的HSPN患儿45例（A组），男30例，女15例；年龄（9.00±2.35）岁；体质量（34.47±14.01）kg；22例行肾脏穿刺术，其中病理分级为Ⅱa级4例，Ⅱb级2例，Ⅲa级13例，Ⅲb级3例。HSP患儿15例（B组），男8例，女7例；年龄（8.35±2.34）岁；体质量（32.00±11.96）kg。健康儿童15例（C组），男9例，女6例；年龄（8.59±2.60）岁；体质量（32.40±9.43）kg。纳入标准：①所有的HSPN患儿及HSP患儿均符合欧洲风湿病联盟（EULAR）制定的诊断标准；②年龄在2～18岁；③尿常规异常出现1周以上，病程不超过2个月；④针对尿检异常未使用过激素及雷公藤多苷片、CTX等免疫抑制剂；⑤患儿的监护人已同意并签署参与实验的知情同意书。排除标准：①临床诊断中发现除肾脏损伤以外的其他临床表现；②虽符合临床诊断标准，但其监护人未同意参与本次试验的患儿。各组一般资料无统计学差异，具有可比性。

1.2 血清Gd-IgA1、IL-6检测 抽取HSPN患儿入院后进行治疗前、进行治疗12周停药后及HSP患儿、健康儿童空腹静脉血5 mL，室温下静置1 h，以3 000 r/min速度离心10 min，提取血清，标记后在-80℃冰箱里冷藏备用，使用酶联免疫检测试剂盒检测血清Gd-IgA1及IL-6，所有操作按照试剂盒说明书进行。

1.3 统计学方法 采用SPSS23.0统计软件。符合正态分布的计量资料以±s表示，比较采用t检验或方差分析；使用受试者工作曲线（ROC）评价血清Gd-IgA1、IL-6诊断儿童HSPN的灵敏度和特异度；采用Pearson相关分析法分析血清Gd-IgA1、IL-6水平与24 h尿蛋白定量的相关性，Spearman相关分析法分析血清Gd-IgA1、IL-6水平与肾脏病理的相关性。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组血清Gd-IgA1和IL-6水平比较 各组血清Gd-IgA1和IL-6水平比较见表1。

表1 各组血清Gd-IgA1和IL-6水平比较（±s）

表1 各组血清Gd-IgA1和IL-6水平比较（±s）

注：与C组比较，*P<0.05；与B组比较。

组别A组B组C组n 45 15 15 Gd-IgA1（pg/mL）7 258.35±3 687.19*△3 087.12±2 219.93 1 543.01±712.20 IL-6（ng/mL）25.55±11.53*△19.71±3.32*12.53±1.48

2.2 A组治疗前后血清Gd-IgA1、IL-6水平比较 A组患儿治疗前后血清Gd-IgA1、IL-6水平比较见表2。

表2 A组患儿治疗前后血清Gd-IgA1、IL-6水平比较（±s）

表2 A组患儿治疗前后血清Gd-IgA1、IL-6水平比较（±s）

注：与治疗前比较，*P<0.05。

A组治疗前治疗后Gd-IgA1（pg/mL）7 258.35±3 687.19 2 238.14± 7.39*IL-6（ng/mL）25.55±11.53 9.09±2.51*

2.3 A组患儿血清Gd-IgA1、IL-6水平之间及其与24 h尿蛋白、肾脏病理的相关性 HSPN患儿血清Gd-IgA1水平与24 h尿蛋白定量呈正相关（r=0.43，P<0.05），血清IL-6水平与24 h尿蛋白定量无相关性（P>0.05）。HSPN患儿血清Gd-IgA1水平与肾脏病理等级呈正相关（r=0.829，P<0.05），血清IL-6水平与肾脏病理等级无相关性（P>0.05）。血清Gd-IgA1水平与血清IL-6水平呈正相关（r=0.51，P<0.05）。

2.4 患儿血清Gd-IgA1、IL-6水平对HSPN的诊断作用 当血清Gd-IgA1截点为3 235.26 ng/mL时，其诊断HSPN的灵敏度为0.956，特异度为0.8，ROC曲线下面积为0.879；当血清IL-6截点为21.88 pg/mL时，其诊断HSPN的灵敏度为0.49，特异度为0.87，ROC曲线下面积为0.65。

3 讨论

HSPN是免疫因素、环境因素等多种因素作用于遗传易感个体的继发性肾小球疾病，病理表现为IgA为主免疫复合物在系膜区沉积，伴有补体因子及大量中性粒细胞的浸润，临床表现多样［12］。发病机制尚不清楚，目前主要认为与IgA1介导的免疫异常有关。

IgA是人体内的5种糖蛋白之一，包括IgA1和IgA2两种类型，其中血清中大约90%的IgA为IgA1，主要以单体的形式存在［13］。IgA1在重链区存在一个可以转动的由脯氨酸残基、丝氨酸残基及苏氨酸残基等多种氨基酸构成的铰链区，其中丝氨酸残基及苏氨酸残基是O-糖基化过程中的结合位点，而IgA2分子结构上没有此区域，不能进行O-糖基化过程［14］。糖基化过程是翻译后的修饰过程，半乳糖与N-乙酰半乳糖胺结合障碍，导致N-乙酰半乳糖胺提前被唾液酸酸化，称为IgA1低糖基化或IgA1异常糖基化［15-16］。Gd-IgA1在HSPN发病过程多用“四次打击”学说进行描述，包括异常糖基化的IgA1产生过多，抗原的产生，异常糖基化的IgA1与抗体结合形成免疫复合物并激活补体，免疫复合物在肾小球系膜区沉积，诱导细胞因子、趋化因子、细胞外基质的增殖和分泌［12，17］。PILLEBOUT等［18］发现，IgA1-IgG-抗体循环免疫复合物在HSPN患儿体内呈高表达。HIKI等［19］在HSPN患儿的肾小球系膜区检测到Gd-IgA1形成的大分子免疫复合物。有学者认为，IgA1-IgG-抗体免疫复合物在肾脏中沉积可能是HSPN发生的主要原因［20］。目前，Gd-IgA1在HSPN诊断中的应用研究较少，因IgAN肾病与HSPN有相同的发病机制，多参照Gd-IgA1在IgAN诊断中的研究。宋轻雷等［21］检测了40例IgAN血清Gd-IgA1水平，发现与对照组相比。Gd-IgA1水平升高，且随着肾脏病理Lee分级的增加而升高，此指标诊断IgAN的灵敏度为82.5%，特异度为80%，ROC曲线下面积为0.886。本研究发现，A组患儿治疗前血清Gd-IgA1水平高于B、C组，且A组治疗前血清Gd-IgA1水平高于治疗后，此结果与既往研究一致，表明Gd-IgA1参与了HSPN的发病，可能与肾脏损伤及疾病的活动相关。

IL-6是一种促炎因子，是由多种细胞分泌的，功能多样，在体液免疫和免疫应答中发挥着重要作用。HSPN患儿体内存在着免疫功能异常，Th2类细胞因子的过度表达，而Th2类细胞因子分泌炎症因子IL-6［22］。IL-6可导致和加重血管的炎性反应，导致内皮细胞的损伤，促进内皮细胞分泌炎症因子，导致相关脏器的损伤［23-24］；也可通过STAT3信号通路，增加了IgA1糖基化过程中ST6GalNAc-酶的活性，降低了C1GalT1酶的活性，导致Gd-IgA1产生增多［25］。研究［26］发现，与健康儿童及HSP患儿相比，HSPN患儿血清中IL-6水平升高，与HSPN的发生呈正相关，当截点为18.16 pg/mL时诊断HSPN的灵敏度为80.62%、特异度为83.27%。本文结果显示，A组患儿血清IL-6水平高于B、C组，B组患儿血清IL-6水平高于C组，且A组治疗前血清IL-6水平水平高于治疗后，表明IL-6可能参与了HSPN的发病，且与疾病的活动相关，但IL-6作为炎症因子，与体内的所有炎性反应相关，不能作为HSPN的特异度诊断因子。同时也发现IL-6与Gd-IgA1存在着正相关，间接的证明了IL-6调控着糖基化过程，与Gd-IgA1的产生过多有关。

总之，Gd-IgA1及IL-6可能参与了HSPN的发病，且与疾病的活动相关，Gd-IgA1能在一定程度上反映肾脏的病理改变，可作为一种监测HSPN病情的指标。