食管癌诊断、分期和预后中多肿瘤抑制基因-1、分泌素-3A1的表达研究

韩晓亮

（安阳市第五人民医院消化内科，河南 安阳 455000）

食管癌又称为食道癌，是发生在食管粘膜上皮组织的恶性肿瘤，占所有恶性肿瘤的2%[1]。随着年轻群体生活习惯的改变，近年来食管癌的发病率呈上升趋势[2]，因此，对食管癌的疾病相关的细胞分子进行研究对提高患者诊断、治疗及预后具有积极意义。多项临床研究表明：细胞周期的改变是导致组织发生癌变的主要原因，而癌基因及抑癌基因不仅在肿瘤的发生、发展中具有决定性意义， 而且在肿瘤的早期诊断及防治中扮演着越来越重要的角色[3-5]。有食管癌相关研究中发现，多肿瘤抑制基因-1（Multiple tumor suppress-1，MTS-1）及分泌素-3A1（Secretoglobin 3A1，SCGB3A1）在食管癌病程发展中发挥了重要作用[6]，但具体相关性尚未明确[7]。本研究通过对本院确诊为食管癌的79例患者进行回顾性分析，探究MTS-1、SCGB3A1的表达在患者的临床病理诊断及预后中的作用，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性分析我院2014年10月至2017年10月期间收治的79例食管癌患者的临床资料，其中男性46例，女性33例，年龄21～74岁，平均年龄 61.38±7.21岁，病程为 1～18 m，平均病程为9.06±1.14 m。根据临床分期[8]可知，31例患者处于鼻咽癌I～Ⅱ期，48例患者处于Ⅲ～Ⅳ期。

纳入标准：符合食管癌诊断标准且经病理检查结果证实[9]；术前未接受过抗癌辅助治疗，临床资料均完整。排除标准：伴严重系统性疾病；妊娠期或哺乳期女性；合并全身其它类型恶性肿瘤。本研究经医院医学伦理会审核通过，临床资料均完整。

1.2 S-P免疫组化染色检测MTS-1和SCGB3A1

1.2.1 组织标本采取

79 例食管癌患者均于我院在胸腔镜下行微创手术治疗，于术中留取79份食管肿瘤组织及79份癌旁 5 cm处正常食管黏膜组织标本作为研究对象。

1.2.2 检测方法

采用S-P免疫组化染色法测定肿瘤组织以及癌旁组织MTS-1和SCGB3A1的表达情况。具体方法：组织切片经常规脱蜡和水化后，用3%过氧化氢去除内源性酶，经微波抗原修复，加入兔抗人MTS-1单克隆抗体和SCGB3A1单克隆抗体，行DAB显色，苏木精复染，光镜下观察结果。分别用已知的阳性食管癌组织切片作阳性对照，正常小鼠和兔血清及 PBS代替一抗作阴性对照。MTS-1、SCGB3A1蛋白免疫组织学结果判定[10]：由两位病理科医生在400倍光镜下随机选取10个视野对染色细胞数量和染色程度进行评分，其中阳性细胞数量＜1%为 0分，1%～10%为 1分，11%～50%为2分，50%以上为3分；染色无染色为0分，弱阳性显黄色为1分，中等阳性显浅棕色为2分，强阳性显棕褐色为3分。将两者所得分数合计：无表达或低表达：0～3分，高表达：4～6分。

1.3 统计学方法

应用SPSS 18.0统计学软件对数据进行分析。计量资料以均数±标准差（±SD）表示，采用t检验；各项计数资料以百分比（%）表示，采用χ2检验。若P＜0.05，代表两组比较存在明显差异。

2 结果

2.1 MTS-1及 SCGB3A1蛋白在食管癌癌组织和癌旁组织的表达水平分析

MTS-1、SCGB3A1在癌组织中的高表达率分别为27.85%、77.22%，对应的癌旁组织中高表达率分别为79.75%和22.52%，癌组织中MTS-1的表达低于癌旁组织，SCGB3A1表达水平低于癌旁组织 (P＜0.05)，见表1、表2。

表1 食管癌癌组织中MTS-1的表达与患者临床病理特征的关系（n（%））

表2 食管癌癌组织中SCGB3A1的表达与患者临床病理特征的关系（n（%））

2.2 食管癌患者MTS-1、SCGB3A1蛋白的表达与临床病理特征的相关性分析

经 Spearman相关进行分析，食管癌患者MTS-1、SCGB3A1的表达水平与肿瘤分期、淋巴结转移程度呈负相关，与瘤分化程度呈正相关(P＜0.05)，见表3。

表3 食管癌患者MTS-1、SCGB3A1的表达与临床病理特征的相关性分析

2.3 预后情况

随访2年后，79例结食管癌患者2年总生存率73.42%（58/79）。MTS-1高表达和低表达的2年总生存率分别为 95.45%（21/22）、64.91%（37/57），具有明显差异（χ2=7.587，P=0.006）；SCGB3A1高表达和低表达的 2年总生存率分别为 94.12%（16/17）、67.74%（42/62），具有明显差异（χ2=4.756，P=0.029）。

3 讨论

我国是食管癌的高发地区，也是食管癌病死率最高的国家之一，由于食管癌早期的临床症状不明显，患者未引起重视，一旦确诊，往往都已处于疾病的中晚期，对患者造成了不可逆转的损伤[11]。

由于缺少对于危重疾病治疗的辅助诊断和实时监控的有效方法，肿瘤治疗一直是临床上的热点和难点[12]。目前临床上核磁共振、超声等影像学技术仍旧是检测肿瘤发生的主要手段，而其费用较高、灵敏性较低，监测机体肿瘤病变情况有限[13]。近年来，随着生物学研究的不断深入，有不少研究发现[14-15]：肿瘤的发生与多种基因、蛋白及因子的水平表达有密切联系，故近年来临床上对相关基因、蛋白及因子的检测逐渐成为对肿瘤诊断、病情及预后的评估的有效手段。

MTS-1是一种具有抑制肿瘤细胞生长作用的抑癌基因，已被证实与人体组织细胞发生癌病有着密切联系[16]。对食管癌前病变的不同时期、不同类型的癌变组织以及正常食管组织运用免疫组化法检测 MTS-1表达显示，癌前病变组织中MTS-1的表达明显低于正常组织，且随病情的变化及加重，MTS-1的表达呈现下降趋势；而在不同类型的癌变组织中无明显差异[17]。而本研究结果显示，MTS-1存在于癌旁组织及癌组织中，但在癌组织中的表达率显著低于癌旁组织，结合上述研究可有效的说明，MTS-1基因的异常表达在食管癌发生早期即已经存在，且随着病变的不断加重其表达不断下降，提示：该基因因子的缺失可能导致食管癌的发生，且在癌变病变过程中发挥着重要的作用。

SCGB3A1也是抑癌基因的一种，而国内外有相关研究对其在组织中检测发现：在正常食管上皮组织、胃、乳腺组织中均呈高表达状态，而在食管癌、胃癌、乳腺癌中其表达水平较低，甚至检测不到[18-19]，SCGB3A1的表达在上述肿瘤组织中呈抑制状态，可有效阻止细胞发生浸润、转移[20]。而在本研究中发现，SCGB3A1在癌旁组织中表达率显著高于癌组织，这有效的验证了上述研究的论点，且在肿瘤分期处于Ⅲ～Ⅳ期、伴随淋巴结转移、肿瘤分化为低分化的患者中SCGB3A1的

表达明显低于肿瘤分期处于I～Ⅱ期、无淋巴结转移、肿瘤高分化的患者，其表达与肿瘤分期、淋巴结转移程度呈负相关，与瘤分化程度呈正相关，由此也进一步说明了SCGB3A1基因因子的表达率下降可能是引起食管癌恶化的重要原因之一。

此外，本研究对79例食管癌患者2年预后随访发现：MTS-1、SCGB3A1表达的差异与食管癌患者生存率有着一定联系，其中MTS-1低表达与SCGB3A1低表达患者预后 2年生存率显著低于MTS-1高表达和SCGB3A1高表达患者，由此提示，及时监测MTS-1与SCGB3A1的表达水平对评估食管癌预后生存具有一定临床价值。

综上所述，MTS-1、SCGB3A1在食管癌中呈低表达，且与其病理组织特征存在相关性，检测两者表达情况对临床上食管癌诊断、治疗以及病情评估具有一定指导意义。