全自动血液分析仪在有核细胞分析检测中研究进展

韩秀玲 李清源 天津市宝坻区妇产医院检验科 （天津 301800）

内容提要：血液检测中“有核细胞”一般是指有细胞核的红细胞，又称为幼稚红细胞。健康成年人外周血中红细胞无有核细胞，但是在胎儿外周血、新生儿或幼儿血液中可少量出现，成年人外周血中出现有核细胞时多为病理状态，多见于溶血性贫血、急性大量失血、严重的组织缺氧、急慢性白血病及恶性肿瘤中。同时，血液中的有核细胞多为晚幼红细胞，亦可见幼红细胞或更幼稚的红细胞。数字细胞图像分析技术是自动扫描技术与现代神经网络分析相互结合，能简化细胞扫描过程，更加有效地对异常的细胞进行筛选与分类。全自动血液分析仪是有核细胞分析中常用的测定方法，具有特异性和准确性高的优点，可用于临床检测细胞的数量和形状，且操作简便，能评估患者身体状态，可指导临床治疗。因此，以有核细胞为起点，分析传统血涂片检验在有核细胞中的缺点，探讨全自动血液分析仪在有核细胞分析中的优点及注意事项，为临床有核细胞分析提供方法。

血液检查中，所指的“有核细胞”一般是指骨髓中未完全成熟红细胞，由于各种原因出现在外周血液中。新生儿外周血中可出现数量不等的有核细胞，且随着年龄的增加逐渐在外周血中消失。赵艳等[1]研究表明，健康成人外周血中一般无有核细胞，一般只存在于人体出现某种病理状态时，如：血液系统恶性肿瘤、身体缺氧、骨髓损伤、感染等，将会引起有核细胞的数量与形态发生变化。因此，加强有核细胞检测、分析，对评估患者身体状态具有重要的意义。传统的血涂片检验是有核细胞常用的方法，并将其视为“金标准”，但是该方法效率低下、繁冗、耗时费力、精密度较差，无法进行标准化。全自动血液分析仪是一种全自动检测方法，通过WNR、WNB等通道，利用荧光染色流式细胞进行紧缺的辨别，能避免额外试剂和附加成本，从而可精准的识别和技术有核细胞。此外，借助全自动血液分析仪能完成白细胞自动校正，避免其他细胞的干扰[2]。因此，本研究以有核细胞为起点，分析传统血涂片检验在有核细胞中的优缺点，探讨全自动血液分析仪在有核细胞分析中的优点及注意事项，综述如下。

1.传统血涂片检验优缺点

目前，临床上对于有核细胞分析仪检测方法以血涂片检验为主，并将其视为“金标准”。李小云[3]研究表明，血液细胞形态学检验涉及内容相对较多，包括红细胞、白细胞、血小板及其他异常细胞形态学的基础知识。①异常白细胞形态。中性粒细胞的毒性变化较为常见，多见于严重感染及中毒。密切观察白细胞数量及中性粒细胞的毒性变化，对判断感染程度、患者抵抗力及预后判断具有重要价值。②中性粒细胞的其他异常变化。包括巨多分叶和中性粒细胞、棒状小题、其他异常粒细胞。③异型粒细胞。多见于严重病毒感染、过敏及中毒。④涂抹细胞或篮状细胞。多见于淋巴细胞白血病。从上述分析结果看出，血涂片在临床疾病诊断、预后判断中发挥了重要的作用，但是由于血片制备和染色不良，常使细胞鉴别难度较大，部分患者甚至会引起错误结论，如：血膜过厚细胞重叠缩小，血膜太薄白细胞集中在边缘。分析原因：传统的血涂片检验以人工进行观察为主，虽然能反映有核细胞数量、形态，但是，检测效率低下、繁冗、耗时费力、精密度较低，难以实现检验标准化，该结果对判断往往存在主观性、片面性，各实验室结构难以互认，导致临床应用受到局限性。传统的血涂片用于有核细胞分析中存在诸多不足，主要体现在以下4个方面：①检验门诊血液学检验力量相对薄弱，对于异常细胞如：原始细胞、幼稚细胞等具有较高的漏检率[4]；②血细胞自动分析仪的普遍下，再加上操作便捷性的影响，有核细胞检验的重要性背进一步淡化、忽视；③血涂片用于有核细胞中检验诊断缺乏其他参考信息，导致临床使用受到限制；④外周血涂片难以对造血深层次了解。当前，临床实验室尚缺乏较为成熟和完整的可定量的质控片，导致室内与室间质量控制难度较大。因此，积极探索有效的方法，加强有核细胞的检验，对指导临床治疗具有重要的意义[5]。

2.全自动血液分析仪在有核细胞分析中的优缺点

由于有核细胞在健康人群中相对罕见，常被误认为白细胞，不仅会对其他检验指标产生影响，亦可对临床诊断产生偏差。根据美国临床和实验室标准协会（CLSI）建议，应根据质量需求进行推片镜检，保证有核细胞的准确计数。近年来，随着医疗检验技术的不断发展，全自动血液分析仪得到发展，能为有核细胞分析提供新的思路，具体如下。

2.1 全自动血液分析仪在有核细胞中的应用

全自动血液分析仪是一种新型的检测仪器与设备，通过分析——用吸引探针吸引样品检测紧缺的量进入混均腔，且与稀释液进入转换器中，采用相同的转换器根据顺序分析白细胞计数、血红蛋白、红细胞计数、血小板计数及有核细胞的所有参数[6]。对有核细胞进行分析时，通过相应的溶血剂被加入测量室中，进一步稀释和溶解红细胞，并对样品完成10min化学反应，且反应过程中保证有核细胞发生溶解，从而产生相应的化合物，完成有核细胞的定量分析。目前，全自动血液分析仪广泛用于各级医院中，检验准确的结果为临床诊断提供非常大的方便，可指导临床诊疗。

2.1.1 全自动血液分析仪用于有核细胞中优点

全自动血液分析仪用于有核细胞中具有以下优点：①独立的血红蛋白测量系统，特有的体积计量管直接定量技术，用于有核细胞中能消除干扰源，提高诊断准确性；②全新高密度微量血液处理技术，氰化高铁血红蛋白法、氰化物的SFT法及较大的触摸屏；③粒子向导技术。仪器具有细胞粒子向导技术，能保证细胞粒子以直线运动产生真实脉冲，从而保证有核细胞的计数；④仪器具备先进的浮动界标算法，配合较为完善的血样专家系统，能及时筛选出一次的有核细胞标本[7]；⑤细胞信号全数字化处理技术，具有成熟的液路设计，保证检验运行测量结果的准确性。同时，仪器具有双向立体后旋流技术，用于有核细胞中能避免流体对检验结果产生影响。Lazcano等[8]对全自动血液分析仪DM96系统的有核细胞辨别能力的稳定性进行综合评价，并将血细胞分析仪、显微镜下结果进行比较，结果表明：全自动血液分析仪速度较人工快，中性粒细胞、淋巴细胞分类具有较好的相关性。同时，系统对血小板的形态及计数与血常规自动分析仪具有良好的相关性，能在一定程度上替代人工检验。马学峰[9]对两台基于人工神经网络显微镜自动计数系统进行比较分析，结果表明：二者均能对红细胞、白细胞、有核细胞进行分类，但是对病理细胞的分类相对较差。国内学者[10]分别比较了XN-1000、FCM及镜检法的有核细胞检验结果，但是由于实验中多数标本选择异常细胞较为单一的溶血性贫血患者的EDTA-K2抗凝静脉血，其中含有其他异常细胞数量较少，导致其形态学方面干扰相对较少，结果可靠性较为理想。

2.1.2 全自动血液分析仪用于有核细胞中准确性分析

孙亚杰[11]研究发现，外周血中出现有核细胞的患者主要来源于以下典型科室，即：血液科占47.4%、儿童10.3%、感染科6.4%、肾脏科5.1%、皮肤科为3.8%。出现这种现象的原因是多方面的，正常情况下新生儿或幼儿血液中存在有核细胞，而成人中出现有核细胞常与溶血性贫血、急慢性白血病和感染等有关。对于临床上疑似为血液病或已确诊为血液病患者，进行复查血细胞计数时应选择有核细胞计数，避免发生漏诊。对于标本外周血中白细胞极度减低时会对全自动血液分析仪检验精度产生一定的误差。何文军等[12]一项研究XN-1000和镜检法的计算方法，结果表明：有核细胞得到需要白细胞绝对计数值，上述原因会对有核细胞结果准确性产生影响。从本研究结果看出，全自动血液分析仪快速检验有核细胞能矫正其对白细胞计数的干扰，对于临床疾病的鉴别和诊断具有重要的指导意义。

2.2 全自动血液分析仪在有核细胞中的缺点

尽管全自动血液分析仪用于有核细胞中具有明显的优势，但是该检验方法使用时亦存在一定的局限性和不足。当体内有核细胞数量偏高时，全自动血液分析仪的识别和自动校准与推片镜检结果产生一定的偏差，该方法检验师需要提高其对有核细胞识别能力，从而保证检验结果的准确性与可靠性。研究表明[13]，由于全自动血液分析仪利用电阻抗法对有核细胞进行检验分析，均存在分类不准确特点，尤其是对于中间型细胞群异常时的检验与结果存在出入。一项研究[14]以三分群ABX MRCRO S60血液分析仪与三分群CD1800型全自动血液分析仪对儿童血液标本进行检验，并同时采用手工染色镜检进行对比分析，结果表明：当血细胞分析仪检测有核细胞时应进行人工镜检复查，防止幼稚细胞、异型淋巴细胞等病理性细胞的漏检。此外，全自动血液分析仪用于有核细胞中亦存在一定的误诊率和漏诊率。高飞[15]对有核细胞标本进行统计分析，所有标本均采用全自动血液分析仪检验，结果表明：标本复检率为15.27%，阳性率为6.7%，假阴性率为1.86%。同时，全自动血液分析仪的使用不能将患者外周血形态异常的特征表达出来，导致容易漏掉重要的诊断信息。对于血象有变化的病例，尤其是全自动血液分析仪提示异常病例，如不进行镜检复查，误诊、漏诊率较高。

2.3 全自动血液分析仪在有核细胞中注意事项

全自动血液分析仪用于有核细胞中虽然具有诸多局限性，但是临床使用时亦存在诸多局限性。因此，为了提高有核细胞检出率，标本检验时应注意以下事项：①当血细胞分析仪检验有核细胞时，且为10.0%以上时，应进行瑞特染色的人工镜检复查，防止幼稚细胞、异型淋巴细胞、嗜酸性细胞等病理性细胞的漏检率；②为了降低全自动血液分析仪用于有核细胞中误诊率或漏诊率，全自动血液分析仪使用时应创建一个理论-检验-疾病相互结合，紧密联系的新体系，实践过程中不断发展完善和提高，以提高检测准确度和精度；③全自动血液分析仪用于有核细胞中，应结合医院情况建立自己相应的复检规则，有效降低误诊率[16]；④检查前应注意正常的生活饮食习惯，注意个人卫生；检查时应积极配合医生，并常规完成玻片的清洗、控制染色的施加、染色液的浓度、室温的高低及细胞的多少等，避免对检查结果产生影响。

3.小结

综上所述，有核细胞检验能为临床疾病的诊疗提供参考依据，常规方法以血涂片检验为主，并将其视为“金标准”，但是检验所需时间较长，难以实现大样本量的检验。而全自动血液分析仪是一种新型的检验方法，用于有核细胞能实现定量分析，其图像能完整保存在数据库中，便于临床诊疗。但是，全自动血液分析仪临床使用时亦存在一定的局限性，检验过程中必须保证标本合格，对于检验存在偏差时可联合血涂片检验，提高有核细胞检出率，指导临床诊疗。