EBV-AHS患儿血清LMP1、炎症因子的表达及诊断价值

钱行

（商丘市第一人民医院检验科，河南 商丘 476000）

EB病毒相关性噬血细胞综合征（EBV−AHS）起病急，进展迅速［1］。EBV−AHS患儿出现T淋巴细胞和自然杀伤细胞功能障碍，机体中巨噬细胞呈过度活化状态，机体呈现高炎症。既往研究表明EBV−AHS的发生与白介素−2（IL−2）、干扰素−γ（IFN−γ）、肿瘤坏死因子−α（TNF−α）等细胞因子密切相关［2］。EB病毒潜伏膜蛋白1（LMP1）是TNF受体家族CD40分子的同源物，在EBV−AHS发病过程中可发挥重要作用。本研究选取2018年2月～2019年11月我院收治的102例EBV−AHS患儿作为研究对象，并与健康儿童进行对比，分析血清LMP1、炎性因子在EBV−AHS患儿中的检测价值，旨在为疾病的临床诊断提供参考。报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2018年2月～2019年11月我院收治的102例EBV−AHS患儿纳入EBV−AHS组，其中男59例、女43例；年龄1～14（6.54±1.28）岁。另选取同期在我院进行体检的50例健康儿童作为对照组，其中男29例、女21例；年龄1～14（6.67±1.34）岁。两组性别、年龄等一般资料比较，无显著差（P>0.05），具有可比性。本研究经我院医学伦理委员会审核批准。

1.2 纳入与排除标准 纳入标准：（1）均符合国际细胞组织协会制订的EBV−AHS诊断标准［3］，EB病毒IgM或IgG抗体阳性；（2）患儿于本院确诊EBV−AHS，确诊前未使用过免疫抑制剂、糖皮质激素或化疗药物；（3）患儿与家属治疗依从性较高，遵医行为良好；（4）患儿病历资料完整。排除标准：（1）诊断不明确患儿；（2）精神异常患儿；（3）恶液质患儿；（4）重要脏器功能严重不全患儿；（5）伴有恶性肿瘤或结核患儿；（6）过敏体质患儿；（7）合并自身免疫性疾病患儿；（8）同时参与其他项目研究患儿。

1.3 实验室指标 EBV−AHS组患儿在接受治疗前，对照组在体检时，分别通过美国BD真空采血管采集4ml外周静脉血，离心（3000r/min，离心半径15cm）10min后取上清液待测，采用酶联免疫吸附法，通过OLYMPUS AU640全自动生化分析仪检测血清LMP1抗体表达以及IL−2、IFN−γ、TNF−α水平，读取吸光度；试剂盒均购自芬兰Orion Diagnostica公司，严格按照说明书进行操作。

1.4 统计学处理 采用SPSS 20.0统计学软件对所得数据进行处理。计量资料采用t检验，Pearson相关性分析LMP1抗体A值与炎性因子的关系；采用受试者工作特征曲线（ROC）分析诊断价值，P<0.05示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血清LMP1抗体A值和各项炎性因子水平比较 EBV−AHS组血清LMP1抗体A值与TNF−α、IFN−γ、IL−2水平高于对照组（P<0.05）。见表1。

表1 两组血清LMP1抗体A值和各项炎性因子水平比较（±s）

表1 两组血清LMP1抗体A值和各项炎性因子水平比较（±s）

EBV-AHS组对照组t P LMP1抗体A值0.67±0.070.45±0.0321.259<0.01 TNF-α（ng/L）5.25±0.062.91±0.03259.97<0.01 IFN-γ（ng/L）138.91±12.884.74±1.1773.534<0.01 IL-2（ng/L）18.52±1.762.84±0.0362.886<0.01

2.2 EBV−AHS患儿血清LMP1抗体A值与各项炎性因子水平的关系Pearson相关性分析 EBV−AHS患儿血清LMP1抗体A值与血清TNF−α、IFN−γ、IL−2水平呈显著正相关（P<0.05）。见表2。

表2 EBV-AHS患儿血清LMP1抗体A值与各项炎性因子水平关系分析

2.3 ROC分析血清LMP1抗体A值及各项炎性因子诊断 EBV−AHS的价值联合血清LMP1抗体A值与TNF−α、IFN−γ、IL−2值诊断EBV−AHS的AUC为0.960大于单一诊断的0.857、0.842、0.865、0.841（P<0.05）。具体数据见图1、表3。

表3 ROC曲线分析数据表

图1 血清LMP1及各项炎性因子诊断EBV-AHS的ROC曲线

3 讨论

迄今为止，EBV−AHS确切发病机制仍未完全阐明，临床上多数学者认为患儿普遍存在细胞免疫过度活化和免疫功能紊乱，T细胞防御和功能缺陷，机体免疫紊乱，诱发Th1、Th2细胞因子异常表达和比例失调，发生机体组织细胞广泛损害，促进EBV−AHS的发生和进展［4］。本研究中EBV−AHS组患儿血清IL−2，IL−6，IFN−γ，TNF−α水平均高于对照组，管玉洁等［5］研究结果支持本结论。既往研究表明LMP1可通过核因子κB（NF−κB）途径和TNF相关因子来加强Th1细胞因子分泌，参与EBV−AHS疾病过程。本研究中EBV−AHS组患儿血清LMP1水平高于对照组，LMP1作为TNF受体CD40分子同源物，可和CD40分子竞争结合TNF因子，从而抑制B细胞的凋亡过程，与此同时，LMP1可诱导NF−κB表达活化，激活凋亡蛋白A20基因表达，抵抗TNF−α细胞毒性。

本研究Pearson相关性分析EBV−AHS患儿血清LMP1抗体A值与血清TNF−α、IFN−γ、IL−2水平呈显著正相关，LMP1经C末端活化区域介导免疫调解过程，通过胞内活化区域逃逸宿主细胞免疫促进病毒的侵袭，经TNF及NF−κB影响NK细胞、T细胞、NKT细胞等正常免疫功能，从而影响血清TNF−α、IFN−γ、IL−2表达水平。ROC曲线将多种指标敏感与特异度通过绘制曲线来评价其诊断价值，曲线下的面积越大，代表诊断价值越高。本研究通过ROC曲线分析血清LMP1、炎症因子单独或联合检测对于EBV−AHS疾病的诊断价值，ROC曲线下面积达到0.982，且多项指标联合检测诊断效能高于单一诊断，提示联合多种血清学指标检测可进一步提高EBV−AHS的临床诊断价值。

综上所述，EBV−AHS患儿血清LMP1、TNF−α、IFN−γ、IL−2水平均较健康儿童明显升高，各项指标联合检测可提高EBV−AHS的诊断价值，临床实践中可通过密切监测EBV−AHS患儿血清LMP1抗体A值和TNF−α、IFN−γ、IL−2等细胞因子表达水平为疾病的诊断提供血清学依据。