肝细胞癌中的T-cadherin表达与肿瘤复发转移相关性分析*

陈辑，陈冰，林燕旋，易学华，陈连清，曾连山

（1.湛江市第一中医医院；2.湛江市港区人民医院；3.广东医科大学附属医院，广东 湛江 524000）

肝细胞癌（HCC）属于一种极为隐匿的疾病，在首次诊断过程中，部分患者便出现癌细胞转移或浸润，即使及时进行手术治疗，但术后转移与复发也存在极高的风险。目前预防和治疗肿瘤复发、转移已变成延长患者寿命的重要环节［1，2］。由于T-cadherin表达与肝癌复发转移的相关性研究尚未报道，故本研究旨在探讨肝细胞癌中的T-cadherin表达及其和肿瘤复发转移相关性，为今后治疗肝癌提高参考依据。报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2018年12月～2020年5月我院及广东医科大学附属医院收治的肝细胞癌（HCC）患者200例。其中男130例、女70例；年龄45～82（63.47±4.28）岁。所有患者均知情同意并签属知情同意书，本研究经我院医学伦理委员会审核批准。

1.2 纳入与排除标准 纳入标准：（1）无感染，且自愿参与该研究者；（2）对本研究所用药物无过敏反应者。排除标准：（1）血型不合者；（2）术后3个月内出现急性排斥反应者。

1.3 方法 采用免疫组化法对T-钙黏蛋白的表达进行检测，其内容如下：切除手术用3%甲醛固定，用石蜡将其打包，以此制作出切片，其厚度约为2μm，同时脱水、脱蜡；置于微波炉中60s抗原热修复，抗原显露之后；采用2%的双氧水阻断酶活性；常温下放置0.05%的聚山梨酯20（Amresco公司产品，Cat#9005-64-5）中，放置时间约一刻钟；随后将兔抗人T-钙黏蛋白单克隆抗体（1∶150，Gibco公司产品，Cat#PA5-81934）滴入，常温下放置1h；用PBS冲洗3min，需冲洗3次；再次置入0.05%的聚山梨酯20，常温放置2h；滴入加强剂一刻钟；加入羊抗兔二抗（中国碧云天公司产品，Cat#A0208），常温下放置半半小时；用PBS进行冲洗，采用DBA显色剂显色一刻钟；采用苏木精进行复染，采用饱和碳酸锂（中国索莱宝公司产品，Cat#G2960）25s，采用90%的乙醇进行脱水，随后吹干，将其封片，使用显微镜观察详细情况同时登记在册［3，4］。采用PBS取代抗原，将其看作阴性，对照同步染色。一般情况下，T-cadherin于肝细胞膜上进行表达，其为粗细相似的黄色颗粒，但是Tcadherin细胞质中，细胞核内无表达。评估方式：超过50%为强阳性（+++）；在20%～50%之间为阳性（++）；在5%～19%之间为弱阳性（+），细胞膜表达低于5%为阴性（−）[5]。当细胞膜上出现细胞和阳性和细胞质阳性表达>10%和阴性及弱阳性表达时均为表达异常［6］。

1.4 临床观察指标 分析T-cadherin蛋白在肝癌组织与癌旁组织、复发或不复发与转移或不转移以及高分化和低分化癌组织患者中的表达。

1.5 统计学处理 数据采用SPSS 26.0统计学软件进行处理。计量资料采用±s表示，行t检验；计数资料采用例（百分率）表示，行χ2检验。P<0.05示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 分析T-cadherin蛋白在肝癌组织和癌旁组织中的表达 肝癌组织和癌旁组织T-cadherin的表达主要在细胞膜上；肝癌组织T-cadherin阳性表达率低于后者，差异有统计学意义（P<0.05）；肝癌组织表达异常和缺失率高于癌旁组织表达异常和缺失率，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。

表1 T-cadherin蛋白在肝癌组织和癌旁组织中的表达比较[n(%)]

2.2 T-cadherin在高分化或低分化中的表达比较高分化癌组织与低分化癌组织中T-cadherin表达主要在细胞膜上，部门在细胞质上；高分化中T-cad herin异常表达率稍高于低分化中T-cadherin异常表达率，但差异无统计学意义（P>0.05）。见表2。

表2 T-cadherin在高分化与低分化中的表达比较[n(%)]

2.3 T-cadherin在复发或不复发、转移或不转移中的表达比较 复发和转移中T-cadherin异常与缺失表达率明显高于不复发或不转移T-cadherin异常与缺失表达率，差异有统计学意义（P<0.05）。见表3、表4。

表3 T-cadherin蛋白在转移或不转移中的表达比较[n(%)]

表4 T-cadherin蛋白在复发或不复发中的表达比较[n(%)]

3 讨论

T-cadherin又称CDH13或H-cadherin，其作为钙黏蛋白超家族中的关键成员，它属于一种钙黏蛋白分子，主要包括细胞外钙跨膜区和结合区［7，8］。Tcadherin在染色体16q24上，其cDNA主要由含有712个氨基酸的1个开放读码框组成，长度约3842bp［9，10］。

在本研究中，T-钙黏蛋白在HCC中表达异常，并且和切除手术的肝细胞癌复发转移关系密切。不过T-cadherin与肝细胞癌术后癌细胞发作转移的关系临床上还无相关报道，并且和HCC术后复发转移是相关性尚不明确。本文采用免疫组织化学方法检对患者的高分化癌组织和低分化癌组织、癌旁组织和癌组织、转移癌组织和无转移癌组织及复发癌组织与不复发癌组织的T-钙黏蛋白基因表达进行检测，结果显示，肝癌组织和癌旁组织T-cadherin的表达主要在细胞膜上，T-cadherin在肝癌组织中阳性表达率低于癌旁组织的阳性表达率（P<0.05），高分化中T-cadherin异常表达率稍高于低分化中T-cadherin异常表达率（P>0.05），复发和转移中T-cadherin异常与缺失表达率明显高于不复发或不转移Tcadherin异常与缺失表达率（P<0.05），表明HCC中的T-cadherin表达与肿瘤复发转移具有一定的相关性。

综上所述，T-cadherin在HCC中的表达与瘤组织的复发转移相关，T-cadherin的表达可作为预后的关键标志物和药物干预的靶点。