苦参燥湿洗剂制备工艺研究及质量控制

张胜龙

苦参燥湿洗剂是在濮阳市中医医院现有制剂品种苦参燥湿散(豫药制字Z20120362(濮))基础上改良发展而来。苦参燥湿散在临床中对痔瘘、肛裂具有较好的治疗效果，该药剂为中药煮散，患者需自行煎煮后使用。由于患者煎煮方法的操作规范程度可影响药液的疗效，因此，为了提高患者使用制剂的便利性并提高药品疗效，本研究在原有的注册制剂品中苦参燥湿散的基础上，增加了提取浓缩配液工艺，并将煮散剂型改为洗剂。此外，为使其检测方法更加合理有效，本研究对其质控方法进行了升级，新增了薄层色谱鉴别个数，保证了药品的优良品质和确切的临床疗效。

1 材料与试剂

硅胶G、盐酸小檗碱对照品和苏木对照药材(中国食品药品检定研究院)；其他试剂均为分析纯。处方组成：苦参、黄柏、防风、白矾、白芷、黄芩、苏木、当归、甘草。

2 方法与结果

2.1 制备工艺确定本品处方中君药苦参和黄柏主要含生物碱类、黄酮类成分；其余各味药主要含挥发油类、三萜皂苷类、有机酸、多糖类、氨基酸类及鞣质等成分[1-3]，主要成分可以被热水提取。考虑到临床用药对象的疾病特点、给药途径以及使用便利性，本品拟选用洗剂。根据本品的剂型要求和主要有效成分的理化性质，拟采用以下工艺设计：苦参等九味饮片，拟以水为提取溶媒，采用水煎煮提取。拟定制备工艺路线见图1。

图1 工艺路线图

2.2 制备工艺的考察

本研究以加水量、提取时间、提取次数、空白等4个因素为指标，每个因素取3个水平，选用L9(34)正交设计试验；取1/10处方量药材，按表1进行试验，并以干膏得率作为考察指标，以优选出最佳提取工艺条件。取苦参、黄柏、防风、白矾、白芷、黄芩、苏木、当归、甘草，共9份，根据表2正交试验表进行9种提取工艺的提取、滤过，得其水煎液。按照正交设计试验操作，各水煎液分别浓缩，浓缩条件为：温度60～70 ℃，真空度-0.06～-0.07 Mpa，蒸汽(压力0.03 MPa)，称量干膏重量。将浓缩液置于100 ml量瓶中，定容、摇匀。精密吸取浓缩液10 ml置干燥至恒重的蒸发皿中，水浴蒸干，于105 ℃干燥至恒重(约10 h)后，置于干燥器30 min，冷却后称定重量，计算干膏得率。每份试验平行做3次，取平均值，试验结果见表2。对实验结果进行方差分析，因素A和C有显著性影响，根据正交设计试验直观分析，因素A2>A3>A1，选择A2，C2>C3>C1，选择C2，因素B差异无统计学意义，且B3>B2>B1，B2与B3差异微小，考虑到兼顾充分提取和适当提高生产效率，选择B2。因此综合生产实际状况，最佳提取工艺为：加8倍量水，提取2次，每次提取1.5 h。见表3。

表1 苦参燥湿洗剂提取因素水平表

表2 苦参燥湿洗剂L9(34)正交试验安排及干膏率测定结果

表3 方差分析结果

2.3 中试样品的制备研究

为了验证工艺的稳定性和科学性，中试生产3批苦参燥湿洗剂。批量设定按照50倍处方量进行投料，对成品率分别进行考察。工艺设定合理，3批成品按照苦参燥湿洗剂的质量标准草案检验，结果均符合规定。该工艺稳定可靠，已初步具备大批量生产的条件。见表4。

表4 苦参燥湿洗剂3批中试样品生产参数

2.4 质量控制本品处方中主要有效成分为生物碱类、挥发油类、黄酮类、三萜皂苷类、有机酸、多糖类、氨基酸类及鞣质等化合物[4]。本制剂性状为红棕色液体；气微，味苦。取本品20 ml，蒸干，加甲醇10 ml，超声处理30 min，上清液作为供试品溶液。另取苏木对照药材0.3 g，同法制成对照药材溶液。薄层色谱法(通则0502)试验，吸取供试品溶液各5 μl，对照药材和对照品溶液各2 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-丙酮-甲酸(8∶4∶1)为展开剂[4]，展开，取出，晾干，立即置干燥器内放置4 h后置紫外灯(365 nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。用不含苏木的制剂进行阴性对照试验，图2显示，阴性对照色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，无相同颜色的荧光斑点。取本品20 ml，蒸干，加乙醇15 ml，超声处理10 min，上清液作为供试品溶液。另取盐酸小檗碱对照品，加乙醇制成1 ml含1 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录一)试验，吸取供试品溶液各5 μl，对照品溶液2 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水(7∶1∶2)为展开剂[4]，展开，取出，晾干，置紫外灯(365 nm)下检视。供试品色谱中，图3显示，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。用不含黄柏的制剂进行阴性对照试验，结果阴性对照色谱中，在与对照品色谱相应位置上，无相同颜色的荧光斑点。

注：1 缺苏木阴性对照；2 苦参燥湿洗剂供试品(20190401)；3 苦参燥湿洗剂供试品(20190402)；4苦参燥湿洗剂供试品(20190403)；5苏木对照药材图2 苏木薄层色谱图

注：1 缺黄柏阴性对照； 2 苦参燥湿洗剂供试品(20190401)； 3 苦参燥湿洗剂供试品(20190402)； 4苦参燥湿洗剂供试品(20190403)；5盐酸小檗碱对照品图3 黄柏薄层色谱图

3 讨论

中医结合现代医学对痔瘘，肛裂的治疗，目前具有较好的治疗效果。本证皆属湿热下注或气滞血瘀，湿毒蕴结而成，基于湿热瘀滞，络阻肿瘤之病机。苦参清热燥湿、祛风止痒为主药，黄柏、黄芩清热利湿、消肿止痛，防风祛风止痒，白矾燥湿、敛疮为辅药，白芷消肿排胀润肤止痛，苏木消风肿止痛，当归养血润燥、止痛为佐药，甘草调和诸药，有利湿之用而为使，诸药合用共奏：清热燥湿、祛风止痒、消肿止痛之效[5-7]。

该方于1999年12月正式批准为濮阳市中医医院制剂，2004年注册批准文号，现已使用17年，其前应用汤剂已使用8年。濮阳市中医医院现有制剂品种苦参燥湿散，为中药煮散，患者需自行煎煮后使用，由于患者提取方法的操作规范程度有差别，药液的疗效有一定的影响；为了患者更便于使用制剂，并保证药品疗效更好，在原有的注册制剂品种苦参燥湿散的基础上，工艺改为提取浓缩配液过程，将煮散剂型改为洗剂。苦参燥湿洗剂方从改善肛门疾病疼痛、排便障碍入手，经多年临床使用证明是一种较好的治疗方法，患者使用中药制剂苦参燥湿洗剂熏洗坐浴，对肛门疾病疼痛、排便障碍等有明显缓解作用，使用安全，疗效确切。

选用L9(34)正交设计试验对样品进行提取确定最优制备工艺，测定3次提取液的干膏率，结果表明该制备工艺重现性较好。3批中试样品的制备研究成品率分别为：95.5%、97.0%、96.0%，制备工艺稳定可靠，重新性好，已初步具备大批量生产的条件。通过查阅资料和进行预实验，对方中的黄柏、苏木进行薄层鉴别考察，结果显示无阴性干扰，斑点清晰，不受样品中其他药味的干扰，专属性较强。本制剂具有制备方法较为科学、质量易于控制，整体药效较为稳定，使用更为方便等优点，值得推广[8]。