细针穿刺细胞学联合BRAFV600E基因检测对甲状腺癌颈部淋巴结转移的价值

夏彩凤，王文平（通讯作者），雷 凡

（南京市江宁医院超声科 江苏 南京 211000）

甲状腺癌属于临床常见病之一，对患者的身心健康乃至生命安全均造成危害。调查显示[1]，约50%以上的甲状腺癌患者存在颈部淋巴结转移情况，因此，及时、准确、高效的诊断对疾病的治疗具有重要意义。当前，临床常用诊断方法以CT检查为主，但准确性不理想，且定性检查需通过细针穿刺进行细胞学检测。然而细针穿刺对操作医生、获取样本质量均有较高要求。随着医疗技术水平的提高，2015年美国研究发现，通过细针穿刺配合基因检测能够有效提高诊断准确性[2]。本文以2019年1月—2020年12月我院收诊的疑似乳头状癌患者74例为例，探讨细胞学检查联合基因检测的临床应用价值，内容具体如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2019年1月—2020年12月我院接诊收治的疑似乳头状癌患者74例进行观察分析，其中男性患者13例，女性患者61例，年龄16～74岁，平均年龄（45.3±1.3）岁。以手术病理结果为金标准，所有患者均进行超声检查。

1.2 方法

1.2.1 超声引导下的FNAC检测方法 指导患者取平卧仰卧位，分别在颈后侧、双肩下放置软垫，通过角度拉伸的方式充分对颈前区域进行暴露。对穿刺部位和周围皮肤进行常规消毒处理，选择规格为10 mL的注射器，配套规格为7号的注射针头，需在超声设备的引导下穿刺，超声设备为日本日立HI VISION Preirus（二郎神）。引导时线阵探头频率设定为7.5～10.0 MHz，在超声设备下观察针头走向，直至其进入病灶组织内部。选择不同位点负压抽取组织样本，采集足量样本后解除负压，并移除针头。采用喷打的方式将吸出的样本涂于载玻片上，选择HE染色法处理样本，阅片时需由至少2名病理科医生共同进行，当阅片医生评估结果一致的情况下才可做出诊断。

1.2.2 BRAFV600E基因检测方法 借由超声引导下FNAC检测时提取活体病灶组织样本，提取其中的DNA信息，严格按照人类BRAF基因V600E突变检测试剂盒的相关说明和操作标准进行检验。需将洗脱液、试剂等按规定加入PCR反应管当中，并准确添加组织样本，使用PCR设备进行检验和分析，评估样本组织中的基因是否存在突变阳性情况。

1.3 观察指标

以手术病理结果为金标准，对比分析联合检测及单一技术检测结果的诊断准确性、灵敏度及特异度。

1.4 统计学分析

采用SPSS 25.0完成结果数据分析及处理，计数资料以率（%）表示，行χ2检验；计量资料采取（±s）表示，行t检验，P＜0.05则结果差异存在统计学意义。

2 结果

2.1 诊断灵敏度、特异度、准确性对比

74例疑似患者经手术病理诊断，病理诊断甲状腺乳头状癌（+）65例，其中35例（47.30%）患者出现颈部淋巴结转移情况，甲状腺良性病变（-）9例。基于手术病理诊断金标准，细针穿刺细胞学检查准确诊断甲状腺乳头癌55例，BRAFV600E基因检测准确诊断甲状腺乳头癌47例。经计算，细针穿刺细胞学与BRAFV600E基因检测联合诊断甲状腺乳头癌的灵敏度与准确性均高于两项指标单一诊断，差异有统计学意义（P＜0.05），联合诊断灵敏度与特异度同病理金标准对比差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。

表1 诊断灵敏度、特异度、准确性对比[%（n/m）]

2.2 穿刺阳性和转移的相关性

此次经细针穿刺细胞学检查，阳性结果患者淋巴结转移率显著高于阴性结果患者（P＜0.05），见表2。

表2 穿刺阳性和转移的相关性[n（%）]

3 讨论

3.1 超声检查

超声检查是所有恶性肿瘤类疾病诊断的最常用方式，其优势在于无创性和快速性，且可重复操作性强，加之现代多普勒彩超技术的进一步完善，使得以往很多小型结节也可准确判断，也能探查出部分结节侵犯和微小病灶转移情况，属于现代甲状腺癌患者首次筛查的最佳方式之一[3]。但这种诊断方式仅能确定患者体内是否存在肿瘤病灶，而对于结节本身良恶性的分级标准受检测医生主观意识、个人操作技术等因素的影响较大，因而容易出现误诊情况，使得肿瘤分型的准确率大幅下降。根据临床大数据统计显示，超声技术评估甲状腺癌分型检测的误诊率可达到20%以上，因此大多数学者均推荐超声用于确诊判断，而不推荐其用于定性诊断[4-5]。

3.2 超声引导下的FNAC诊断

细针穿刺活检是判断肿瘤良恶性质的最佳方式之一，其不仅操作简便，且采样速度较快，加之现代探针技术的完善，使得细针规格分型更加丰富，也进一步控制对患者造成的损伤程度。实际操作时可利用超声技术对穿刺角度、方向等进行引导，从而提升一次成功率，使穿刺针可在最短时间内到达病灶部位，降低患者不适感的同时也可提升样本采集的准确性和充分性，避免了传统穿刺活检时采样准确率无法保障的缺陷。目前国际医学界公认的甲状腺癌诊断金标准即为FNAC检查，其灵敏度最高可达到98%，特异度最高可达100%。但需要注意的是，实际采样时必须保证活检样本当中包含完整的甲状腺乳头状组织，才能准确判断乳头状癌的具体分型，如存在取样不足、穿刺操作破坏乳头状组织等情况，则会导致检测结果的准确率大幅下降。另外还有约30%的结节病灶经由细胞学检测无法明确诊断[6]。

3.3 BRAFV600E基因检测

甲状腺乳头状癌患者基因序列当中BRAF点突变率可达到75%以上，因此临床可采取基因测序的方式确认是否出现图片，而其中V600E段突变判断甲状腺乳头状癌患者阳性率时的准确率无限接近于100%。目前国际医学界报道的体细胞突变中的40多种均位于BRAF癌基因序列内，其中的T1799A段基因突变后会使细胞的MAPK信号过度激活，从而导致正常体细胞异常复制和增殖，从而转变为癌细胞，而此类癌细胞的出现和甲状腺癌的发病和发展均有着密切关联[7]。BRAFV600E突变型的甲状腺乳头状结节侵袭性强，较容易发生甲状腺外侵犯、淋巴结转移等，是影响其预后不良的一个独立危险因子[8]，FNAC结合BRAFV600E基因检测，可明显提高PTC诊断的准确率。