子宫内膜异位症患者血清及腹腔冲洗液中FABP4和瘦素的测定

姬笑影，任琛琛，杨 立，陈雁南，李飞燕，朱远航

郑州大学第三附属医院妇产科 郑州 450052

子宫内膜异位症(endometriosis，EMT)是妇科常见的慢性炎症性疾病，受此影响的妇女多伴有慢性盆腔痛、经期和性交疼痛以及不孕症等症状，临床上对本病早期诊断和治疗十分重要。有文献报道EMT患者BMI偏低[1]，血脂代谢较差[2]。脂肪组织可分泌大量的脂肪因子、趋化因子等，参与稳定腹腔内环境，介导腹腔内炎症反应，影响机体对胰岛素的敏感性[3]，可能与EMT的发生发展有关。脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(adipocyte-fatty acid binding protein，FABP4)和瘦素是重要的脂肪因子，参与机体的糖脂代谢和炎症反应，除了存在于脂肪组织中，还可分泌入血。我们研究了EMT患者血清及腹腔冲洗液中FABP4和瘦素水平的变化及其临床意义，以期为EMT的诊断和治疗提供帮助。

1 对象与方法

1.1 研究对象选取2019年11月至2020年8月就诊于郑州大学第三附属医院妇科，行手术治疗且资料齐全患者。因不孕症、卵巢囊肿等于我院行手术治疗并且最终病理确诊非EMT的患者为对照组(n=36)；因卵巢囊肿于我院行手术治疗并且最终病理确诊EMT的患者为EMT组(n=32)。排除妊娠期或者哺乳女性，其他雌激素依赖性疾病(子宫内膜息肉、子宫肌瘤、子宫内膜增生等)的患者，合并糖尿病、高脂血症、恶性肿瘤等原发性疾病者，依从性差者。入选者对该研究均知情同意。

1.2 病情程度评价EMT病情程度评价采用r-AFS评分，Ⅰ～Ⅱ期为轻度，Ⅲ～Ⅳ期为重度。疼痛程度分级采用语言评价量表法[4]：无痛为0级；1级(轻度)，虽有疼痛但可以忍受，能正常生活，睡眠不受干扰；2级(中度)，疼痛明显，不能忍受，要求服用止痛药，睡眠受到干扰；3级(重度)，疼痛剧烈，不能忍受，需要止痛剂，睡眠受到严重干扰，可伴有自主神经功能紊乱或被动体位。

1.3 观测指标入组患者均于入院时专人记录年龄、孕次、痛经情况、身高、体重、腰围、臀围，计算BMI、腰臀比；收集CA125、空腹血糖、C反应蛋白、血脂、胆固醇水平等资料，均由本院检验科严格按照检验步骤检测。

1.4 血清及腹腔冲洗液中FABP4和瘦素的测定术前空腹状态采集5 mL外周静脉血，1 000 r/min离心20 min后留取血清，置于-80 ℃下保存待测。手术时进入腹腔采用头高脚低位，用10 mL无菌生理盐水对子宫、卵巢、肠管等进行冲洗,回收直肠子宫陷凹、膀胱子宫陷凹液体，回收率>85%，1 000 r/min离心20 min后留取上清，置于-80 ℃下保存待测。

血清及腹腔冲洗液中FABP4和瘦素测定采用ELISA法，两种试剂盒均购自上海酶联生物科技有限公司，测试仪器为Rayto RT-6100酶标仪。检测方法严格参照试剂盒说明书进行。

1.5 统计学处理采用SPSS 24.0进行统计学分析。两组间年龄、身高、体重、BMI、腰围、臀围、腰臀比、甘油三酯、胆固醇的比较采用两独立样本t检验；月经周期、月经经期、孕次、CA125、空腹血糖、C反应蛋白不服从正态分布，使用中位数(四分位数)表示，两组间的比较采用秩和检验。轻度EMT组、重度EMT组、对照组及痛经程度1级、2级、3级患者FABP4和瘦素水平的比较采用单因素方差分析，两两比较采用SNK-q检验。采用Pearson相关分析所有患者血清FABP4、瘦素与腹腔冲洗液中水平的关系；采用Spearman秩相关分析痛经患者FABP4、瘦素水平与痛经程度的关系。检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 两组患者临床特征比较两组患者的年龄、身高、体重、BMI、腰围、臀围、腰臀比、月经周期、月经经期、孕次、空腹血糖、C反应蛋白差异均无统计学意义，EMT组血清CA125、胆固醇水平高于对照组，甘油三酯水平低于对照组(表1)。

表1 两组患者临床特征比较

2.2 轻度EMT、重度EMT及对照组患者FABP4和瘦素水平比较结果见表2。轻度EMT患者血清、腹腔冲洗液FABP4水平均低于重度EMT患者，腹腔冲洗液瘦素水平高于重度EMT患者。

表2 3组患者FABP4和瘦素水平比较 μg/L

2.3 所有患者血清FABP4、瘦素水平与腹腔冲洗液中水平的相关性所有患者血清FABP4与腹腔冲洗液FABP4水平呈正相关(r=0.304，P=0.012)；而血清瘦素与腹腔冲洗液瘦素水平无相关性(r=-0.890，P=0.469)。

2.4 痛经患者FABP4、瘦素水平与痛经程度的关系3级痛经患者血清FABP4水平高于1级痛经患者(表3)。痛经患者血清FABP4和腹腔冲洗液瘦素水平与痛经严重程度正相关(rs=0.471、0.393，P=0.004、0.018)。

表3 不同级别痛经患者FABP4和瘦素水平比较 μg/L

3 讨论

EMT是妇科常见的良性疾病，患病率可达10%～15%[5]。但其发病机制尚不明确，有研究[2]发现脂肪组织可通过其分泌的脂肪因子参与子宫内膜细胞黏附、增殖、侵袭、血管形成的各个过程，可为异位内膜细胞的存活提供物质材料、能量以及适宜环境。本研究中EMT和非EMT患者的身高、体重、BMI、腰围、臀围、腰臀比差异均无统计学意义，而EMT患者甘油三酯水平低于非EMT患者，胆固醇水平高于非EMT患者，提示EMT患者存在脂质代谢紊乱和脂肪动员加强。FABP4和瘦素作为脂质代谢的重要调节因子，可能与EMT的发生发展有关。

本研究发现EMT患者血清及腹腔冲洗液中FABP4水平高于非EMT患者，且r-AFS重度组高于轻度组，说明FABP4在EMT的发病和进展中起到了一定作用。血清与腹腔冲洗液中FABP4水平正相关，提示其可能在腹腔中营造了利于异位子宫内膜细胞存活和生长的环境。研究[6]发现异位表达的miR-455可降低过氧化氢诱导的细胞内活性氧和丙二醛水平，FABP4作为miR-455的直接下游目标，通过氧化应激而引起慢性炎症反应，为异位病灶创造良好的生存环境；FABP4可使脂质分子穿过细胞膜，它将前列环素转运到细胞核后，前列环素激活过氧化物酶体增殖物激活受体δ(PPAR-δ)，核PPAR-δ通过激活细胞表面前列环素受体抑制细胞凋亡[7]，利于腹腔中异位子宫内膜细胞存活。

本研究结果显示EMT患者腹腔冲洗液瘦素水平高于非EMT患者，但重度组低于轻度组，故推测腹腔液中瘦素水平可能与EMT的发病关系密切。有研究[8-9]发现瘦素可调节EMT模型中的细胞生长、血管生成和炎症反应。瘦素依赖于瘦素受体的JAK2/STAT3信号通路上调MMP-2来促进子宫内膜异位细胞的迁移和侵袭[10]。

我们还发现血清FABP4、腹腔冲洗液瘦素水平与痛经程度正相关。在EMT啮齿类动物模型中，在病变处注射聚乙二醇化瘦素受体拮抗剂或JAK2抑制剂，可显著减轻模型动物的疼痛。因此，针对瘦素信号的干预，特别是与降低雌激素水平的干预相结合，可能对治疗EMT疼痛有效[11]。

总之，FABP4和瘦素在EMT的发生发展中可能发挥了重要作用，该研究结果可为疾病的诊断和治疗提供了新思路。