台州地区不同年龄人群的维生素D营养现况调查

蔡莺莺　石庆新　周秋菊　陈佳喜　沈莉萍　陆如岳　王冬莲

[關键词] 维生素D;高效液相色谱;营养现况;不同年龄

[中图分类号] R153.2          [文献标识码] B          [文章编号] 1673-9701（2021）18-0133-05

Investigation on the status quo of vitamin D nutrition of people in different ages in Taizhou area

CAI Yingying1，2   SHI Qingxin1，2   ZHOU Qiuju1，2   CHEN Jiaxi1，2   SHEN Liping1，2   LU Ruyue3   WANG Donglian1，2

1.Department of Clinical Laboratory， Taizhou Hospital of Zhejiang Province，   Linhai 317000， China; 2.Department of Clinical Laboratory， Enze Hospital of Taizhou Enze Medical Center （Group），  Taizhou 318053， China; 3.Department of Clinical Laboratory， Luqiao Hospital of Taizhou Enze Medical Center （Group），  Taizhou 318053， China

[Abstract] Objective To understand the status quo of vitamin D nutrition of people in different ages in Taizhou area，and to find out the main people with vitamin D poverty， so as to provide necessary scientific basis for the follow-up prevention and treatment of vitamin D poverty. Methods A total of 17815 cases of serum samples of vitamin D detected by high performance liquid chromatography combined with tandem mass spectrometry sent to and examined in Enze Hospital of Taizhou Enze Medical Center （Group） from August 2017 to December 2019 were analyzed retrospectively.They were divided into the neonate group， the infant group， the child group， the teenager group， the youth group， the middle-aged group and the elderly group according to their ages. Results The vitamin D level of the total population was 23.31 （17.98-29.59） ng/mL.The levels of vitamin D in the neonate group， the infant group， the child group， the teenager group， the youth group， the middle-aged group and the elderly group were 17.39 （14.21-29.91） ng/mL， 35.08 （29.71-41.41） ng/mL， 26.41 （21.91-31.45） ng/mL， 20.61（16.81-24.43） ng/mL， 21.59 （16.22-28.71） ng/mL， 22.61 （17.77-27.45） ng/mL and 22.12 （16.98-27.81） ng/mL， respectively， with statistically significant differences in different age groups （P<0.01）.In the assessment of status of vitamin D nutrition， vitamin D poverty accounted for 6.16%， deficiency accounted for 27.96%， and normal accounted for 65.88%， mainly with the normal serum content of vitamin D.In all age groups， the neonate group was the most poverty， the youth group and the teenager group were the second， and the middle-aged group and the elderly group were the third.There were statistically significant differences in status of vitamin D nutrition in different age groups （P<0.05）. Conclusion The vitamin D level in patients of Taizhou area is mainly normal， but vitamin D poverty with different degrees exists in different age groups except for the infant group， especially in the neonate group， the youth group and the teenager group.

[Key words] Vitamin D; High performance liquid chromatography; Status quo of nutrition; Different ages

维生素D是一种重要的类固醇激素，广泛参与了人体骨代谢、心血管系统、免疫系统、神经系统、代谢性疾病、感染性疾病和肿瘤的调控[1-5]。维生素D在体内的充足水平，与以上相关疾病风险呈负相关[1-5]。25-羟基维生素D是血液中维生素D的主要循环形式，稳定性好，是公认的评价人体维生素D营养状况的可靠指标[6]。2020年5月6日，国家卫健委发布了卫生行业标准WS/T677～2020[6]，并于2020年11月1日起实施，该标准明确了人群维生素D营养状况判定指标及参考判定值。因此，参考新行业标准，有必要对台州地区不同年龄层的人群维生素D营养状况进行调查分析。

本研究对台州地区2017年8月至2019年12月送检到恩泽医疗中心（集团）恩泽医院的血清标本17 815例，采用高效液相色谱串联质谱法检测维生素D，有助于了解台州地区各年龄层中维生素D的营养现况，为后续防治维生素D缺乏提供科学依据，也为相关疾病的营养状况评估提供新的参考。

1 资料与方法

1.1资料来源

收集2017年8月至2019年12月间在台州地区的三家医院（浙江省台州医院、台州恩泽医疗中心（集团）恩泽医院、路桥医院）就诊的，并集中送检到恩泽医疗中心（集团）恩泽医院进行维生素D检测的血清标本17 815例，已剔除重复送检的标本。

1.2仪器和试剂

仪器：ABI3200MD型高效液相色谱串联三重四级杆质谱仪（AB SCIEX，Singapore）。试剂：25-羟基VD2/VD3萃取液（衍生化法）试剂盒（浙江迪赛思诊断技术有限公司）。

1.3方法

1.3.1年龄分组  将标本根据年龄分为7组，具体分组和例数如下：新生儿组（1 d～1月）18例、婴儿组（2月～1岁）1821例、儿童组（1～6岁）1595例、少年组（7～17岁）2236例、青年组（18～40岁）4757例、中年组（41～65岁）5390例、老年组（≥66岁）1998例。

1.3.2 维生素D的检测

1.3.2.1血清样品前处理 采集血液，待血液凝固，以4℃ 3000 r/min离心10 min分离血清。吸取血清样品200 μL于2 mLEP管中，加入50 μL内标工作液;再加入萃取试剂（乙腈）400 μL，涡旋1 min;再加入1.2 mL正己烷，涡旋10 min，然后14000 r/min离心5 min;取离心后的上清液，在氮气下吹干。将60 μL衍生化试剂工作溶液加入到吹干后的残渣中，涡旋1 min。50℃下反应30 min，室温冷却后加入40 μL乙醇终止反应，涡旋1 min，氮气吹干;残渣用100 μL复溶液复溶，涡旋10 min，然后14000 r/min下离心5 min，吸取20 μL倒进样瓶中，用ABI3200MD型高效液相色谱串联三重四级杆质谱仪（AB SCIEX，Singapore）分析。

1.3.2.2标准工作样品前处理 向6个2 mLEP管中各加入190 μL磷酸盐缓冲液工作溶液，依次向每个管中分别加入50 μL的内标和10 μL的标准工作溶液1～6 μL，混匀。加入萃取试剂（乙腈）400 μL，涡旋1 min;以下步骤同血清样品前处理。

1.3.2.3质控样品前处理 吸取质控样品200 μL于2 m LEP管中，加入50 μL内标工作液;向其中加入萃取试剂（乙腈）400 μL，涡旋1 min;以下步骤同血清样品前处理。

1.3.2.4工作条件参数  色谱条件：色谱柱：Gemini C18（50×2 mm，5 μm）;其中流动相A为水（含0.1%甲酸），B为甲醇（含0.1%甲酸），流速：0.1 mL/min;进样量：10 μL。质谱条件：电喷雾电离源（ESI），正离子模式;选择多反应监测模式分析;氮气作为碰撞气和辅助气，喷雾气60 psi、气帘气20 psi、加热温度400 ℃，GAS2 60 psi，离子带电5500 V，入口电压9 V，碰撞能量28 V，碰撞出口电压4 V。

1.3.2.5维生素D的样本分析 打开软件Queue Manager，检查样品队列。待仪器平衡好，点击Acquire菜单中的Start Sample按钮开始样品分析。结束后打开Quantitation Wizard（定量分析导航器）分析数据，获得血清维生素D的检测值。

1.3.3维生素D的营养评估 根据行业标准WS/T 677～2020[6]判定如下：<12 ng/mL为缺乏;12～20 ng/mL为不足;≥20 ng/mL为正常。

1.4统计学分析

应用SPSS 22.0统计学软件进行分析，正态分布的连续变量以均数±标准差（x±s）表示。偏态分布的数据以中位数和四分位数间距表示，计数资料以[n（%）]表示，组间比较采用Pearson卡方检验，等级资料采用秩和检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1不同年龄组中维生素D水平的比较

台州地区2017年8月至2019年12月送检到恩泽医疗中心（集团）恩泽医院的血清标本17815例中，男6922例（38.85%），女10891例（61.15%）;维生素D总水平为23.31（17.98～29.59）ng/mL。维生素D在新生儿组、婴儿组、儿童组、少年组、青年组、中年组和老年组水平分别为17.39（14.21～29.91）ng/mL、35.08（29.71～41.41）ng/mL、26.41（21.91～31.45）ng/mL、20.61（16.81～24.43）ng/mL、21.59（16.22～28.71）ng/mL、22.61（17.77～27.45）ng/mL和22.12（16.98～27.81）ng/mL，各占比0.10%、10.22%、8.95%、12.55%、26.70%、30.26%和11.22%。其中，检测人群以中年组最多，青年組次之，新生儿组最少。采用正态性检验，除新生儿组外，其余各组均呈偏态分布（P<0.10）;因而采用秩和检验，各年龄组间差异有统计学意义（P<0.01）。按维生素D水平从高到低排序依次为婴儿组>儿童组>中年组>老年组>青年组>少年组>新生儿组。见表1。

2.2不同年龄组维生素D营养状况的比较

在总检测人群中，维生素D缺乏占6.16%（1097例）、不足占27.96%（4981例）、正常占65.88%（11737例），以维生素D血清含量正常为主。比较各年龄组维生素D营养状况，维生素D水平正常组中以婴儿组占比最高，达97.58%（1777例）;新生儿组最低，占33.33%（6例）。维生素D不足组和缺乏组中均以新生儿组占比最高，分别是44.44%（8例）和22.22%（4例）;以婴儿组最低，分别是2.20%（40例）和0.22%（4例）。维生素D正常组按比例从高到低分别是婴儿组>儿童组>中年组>老年组>青年组>少年组>新生儿组;维生素D不足组与缺乏组基本一致，只少年组发生维生素D不足的比例更高。见表2。采用Pearson卡方检验比较不同年龄组的维生素D营养状况，各年龄组间差异有统计学意义（P<0.05）。总体来说，除婴儿组外，其余各组都有不同程度的维生素D缺乏;以新生儿组最为缺乏，青少年组其次，再次之是中老年组。

3讨论

维生素D的检测方法有质谱法和免疫法。质谱法的优势在于高通量，有标准测量程序，可精确区分25-羟基维生素D代谢物;劣势在于未常规用于临床样本分析，非自动化且仪器复杂、昂贵，无法区分3-epi-25-羟基维生素D的异构体[7]，存在检测值偏高的可能性。免疫法的优势在于高灵敏度，需要的标本量少，自动化;劣势在于存在与其他维生素D代谢物的交叉反应，测量需要维生素D结合蛋白的参与[8-10]，测量准确度不高。本研究采用高效液相色谱串联质谱法检测25-羟基维生素D，结果更精确，能检出更低含量的维生素D，临床指导意义更大。

Hajar Mazahery等[1]研究报道，维生素D缺乏症在美国、澳大利亚和新西兰的患病率为27%～32%。本研究显示台州地区总检测人群中维生素D缺乏、不足和正常分别占6.16%、27.96%和65.88%，与报道基本一致。乔璐莎等[11]报道，329例住院治疗中新生儿维生素D水平为（14.21±12.05）ng/mL，正常、不足、缺乏、严重缺乏分别占22.19%、6.38%、54.71%、16.72%。王昌燕[12]等报道，西安市582例新生儿出生后24 h内血清维生素D平均水平为（11.2±3.2）ng/mL，其中不足、缺乏和严重缺乏的合计占比96.70%。耿立蒙等[13]报道，山东省滨州地区2771例婴幼儿（0～3岁）25-羟基维生素D水平为（36.27±9.09）ng/mL，缺乏、不足比率分别为4.5%、20.9%。高鳳英等[14]报道，河北省三河市600例儿童中，正常、不足、缺乏、严重缺乏分别占68.5%、19.8%、8.8%、2.8%。李晶等[15]报道，嘉兴市338名健康婴儿维生素D正常、不足、缺乏分别占99.70%、0.30%、0%。张正超等[16]报道，简阳地区0～1岁组儿童维生素D正常、缺乏分别占比61.55%、38.45%;2～6岁组儿童维生素D正常、缺乏分别占比68.60%、31.40%。本研究中新生儿组维生素D水平为17.39±3.18（14.21～29.91）ng/mL，正常、不足、缺乏分别占33.33%、44.44%、22.22%;婴儿组维生素D水平为35.08（29.71～41.41）ng/mL，正常、不足、缺乏分别占97.58%、2.20%、0.22%;儿童组维生素D水平为26.41（21.91～31.45）ng/mL，正常、不足、缺乏分别占84.33%、14.67%、1.00%。人体中维生素D的来源约90%由表皮和真皮层的7～脱氢胆固醇经紫外线照射转变而来[2，16-17]，10%来自天然食物摄取。新生儿无法通过皮肤经紫外线照射转变，主要来自母体，因此维生素D缺乏比例最高。而婴儿组由于当地经济、生活水平较高，父母普遍比较重视，保证足够的维生素D摄入，因此维生素D正常比例最高。此外，1岁以后的婴幼儿往往以儿童奶粉代替母乳，而儿童奶粉维生素D平均水平要低于母乳，加之随着儿童年龄增加，存在厌食、挑食、偏食的情况[18]。因而，在儿童组维生素D正常比例又有所下降。

张正超等[16]报道，简阳地区7～12岁组维生素D缺乏、正常分别占比69.91%、30.09%。陈京蓉等[19]报道，重庆市6～17岁青少年维生素D缺乏、不足分别占比9.32%、61.27%。本研究中少年组（7～17岁）维生素D缺乏、不足和正常分别占6.26%、39.22%和54.52%。这是因为青少年处于生长发育的快速时期，营养需求增长较快，同时又有课业压力导致户外运动时间相对减少，是维生素D缺乏的高危人群[18]。本文中青年组（18～40岁）维生素D缺乏、不足和正常分别占9.17%、33.40%和57.43%;中年组（41～65岁）维生素D缺乏、不足和正常分别占5.81%、30.20%和63.99%。两者因为是社会的中坚力量，工作、美容等因素导致户外紫外线照射时间不足，也存在约40%的维生素D缺乏和不足。有趣的是，维生素D检测人群以中年组为主，其次是青年组，表明这两个人群的健康意识比较高。

李海侠等[10]报道的全国多家中心临床大数据显示，罗氏检测分析老年人群维生素D缺乏率、不足率和正常率分别是40.04%、31.92%和28.04%;新产业检测分析老年人群维生素D缺乏率、不足率和正常率分别是68.81%、24.18%和7.01%。本文中老年组（≥66岁）维生素D缺乏、不足和正常分别占9.21%、30.28%和60.51%。存在差异的原因在于不同地区纬度不同，光照时长、强度都有所不同;各地区经济水平不同也影响维生素D的膳食补充。总的来说，老年人因生理机能下降，外源转化减弱，维生素D缺乏比较普遍。

维生素D不足和缺乏组都以新生儿组的比例最高，以婴儿组最低。而吴依然等[2]报道，维生素D低水平与儿童多种感染性疾病相关;而补充维生素D可减少冬季流感的发生率。肖培等[20]报道的前瞻性队列研究显示，儿童期维生素D水平越低，TC、LDL～C和非HDL～C异常的发生风险越高，而充足的维生素D水平可能有助于心血管疾病的早期预防。但是，人体对补充的维生素D制剂反应各异，受地理、季节、日照时间、疾病、药物、年龄、BMI/体脂率等多种因素影响[1]。维生素D不足，可通过日晒和吃富含维生素D食品进行补充，服用过量则存在中毒风险。因此，需要遵医嘱选择不同剂量维生素D制剂进行补充，临床医生也需要关注患者维生素D营养状况。

本研究的局限性在于研究中收集的新生儿组例数相对不足，结果可能存在一定的偏差;其次，这是一项回顾性分析，文中只初步分析了不同年龄人群的维生素D营养现状，与特定疾病的相关性研究正在进行中，有待进一步的证实。

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（收稿日期：2021-02-02）