佛山地区婴儿血清心肌肌钙蛋白I参考区间的建立及意义

李青青

广东省佛山市妇幼保健院检验科，广东佛山 528000

心肌肌钙蛋白(cTn)具有较高的特异度和灵敏度，随着临床实践的发展，cTn的检测和临床应用也不断深入。有研究表明，cTn是目前应用于诊断心肌损伤较好的生物标志物[1-2]。

参考区间是目前国际通用的规范术语，是解释检验结果、分析检验信息的一个基本尺度和依据[3]。由于多年来一直没有中国人群参考区间的系统研究，我国目前临床应用的检验项目参考区间主要引自试剂说明书、行业指南、书籍等提供的资料，其参考区间多基于几十年前欧美人群的研究结果，而血清cTnI统一的参考区间为0.006～0.040 ng/mL。2012年，国家正式发布我国成人检验项目参考区间[4]，但目前尚未发布全国性的婴幼儿检验项目参考区间。

血清cTnI是儿科医生比较重视的，可反映婴幼儿心肌损伤的重要指标，参照成人的参考区间容易导致临床误判。因此有必要建立起地区性婴幼儿血清cTnI参考区间，这将对婴幼儿急性心肌损伤及疾病情况分析有重要指导意义。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2018—2019年于本院出生的1 264例1～12个月婴儿(男婴865例，女婴399例)为研究对象(由于新生儿的特殊性，仅收集到少量病例，将其纳入研究将影响统计分析，故本文暂不研究新生儿这一群体)。大部分资料来源于住院婴儿，心电图、B超检查无心脏病；肝功能、肾功能、血脂、血糖、尿酸正常；血、尿、粪便常规正常；乙肝表面抗原阴性及体格检查正常。

1.2仪器与试剂 仪器为西门子电化学发光分析仪；校准品、检测试剂盒及质控品均购自德国西门子公司。cTnI检测范围为0.006～50.000 ng/mL。

1.3质量控制 根据相关要求，西门子仪器自进入科室以来每年进行仪器校准、仪器性能验证；检验项目cTnI每年进行正确度验证、精密度验证、可报告范围验证、分析灵敏度验证。性能验证结果均符合项目说明书的要求。cTnI每年2次参加国家卫生健康委员会心肌标志物室间质评，室间质评成绩均为100%，每天检测开始前需保证室内质控在控，结果准确可靠。

1.4方法 搜集所有研究对象的血清。采用西门子电化学发光分析仪及配套试剂检测血清cTnI水平。采血后2 h内以3 500 r/min 离心10 min，血清在离心后2 h内检测。

1.5统计学处理 采用SPSS22.0统计软件对数据进行处理和分析。检测数据中如有疑似离群的数据，将疑似离群值的检测结果与其相邻值的差(D)和数据全距(R)相除，若D/R≥l/3 考虑为离群值，应弃之。若有2个以上疑似离群值，可将最小的疑似离群值做上述处理，如D/R 均≥1/3 则需将所有点弃去。绘制分布图及利用Kolmogorov-Smirnov统计方法检验数据是否服从正态分布。采用Mann-WhitneyU检验比较不同性别cTnI水平。采用Z检验，根据年龄进行分组，分别计算Z值和Z*值，分组后参考区间采用百分位法，计算P99作为参考区间。以P<0.05为差异有统计学意义。Z检验公式如下所示：

1.6参考区间的验证 选择20例本院出生的婴儿进行参考区间的验证。在剔除离群值后如果20例标本测定值落在需验证的参考区间外的比例不超过10%，则所建立的参考区间判定为通过验证，可为实验室直接使用；反之则所建立的参考区间可能不准确，不能为实验室直接使用，需重新进行计算以获得正确的参考区间。

2 结 果

2.1正态性检验 利用统计图和Kolmogorov-Smirnov统计方法判断数据是否服从正态分布，结果不服从正态分布(Z=0.265，P<0.05)。见图1。

图1 总样本的频数分布图

2.2不同性别婴儿cTnI水平比较 结果显示佛山地区男婴与女婴的cTnI水平差异无统计学意义(U=-0.748，P=0.454)，见图2。

图2 不同性别cTnI水平比较

2.3血清cTnI参考区间的建立 经过无数次剔除离群值后最终确定婴儿的分组主要可以分为1～2个月及3～12个月2组；利用百分位法计算P99作为参考区间，1～2个月的P99为0.099 ng/mL，3～12个月的P99为0.044 ng/mL。见表1。

表1 不同年龄段cTnI的Z检验及分组情况

2.4参考区间的验证 20例本院出生的1～2个月婴儿的cTnI测定值均落在该研究计算的参考区间范围内，20例本院出生的3～12个月婴儿的cTnI测定值均落在该研究计算的参考区间范围内，说明该研究的参考区间适用于当地的婴儿，均通过验证。

3 讨 论

研究表明，cTn是公认的心肌损伤重要生物标志物[5]。2002年公布的《心肌损伤标志物的应用准则》指出，将心脏cTnT或cTnI取代心肌酶成为检测心肌损伤的金标准[1]。由于健康人血清中cTnI水平极低，当心肌细胞因各种原因发生损伤时，cTnI快速释放到血液，导致人体血液中cTnI水平升高，心肌细胞损伤越严重，cTnI水平升高就越明显[6]。由此cTnI可反映心肌的坏死程度和损伤程度[7-8]。临床上血清cTnI对多种心肌疾病的诊断、治疗及预后判断均具有重要意义[9-12]。然而如何判断血清中的cTnI水平是否是病理性升高，依赖于准确的实验室诊断。

自本院2018年底开展cTnI检测项目以来，一共检测了约5 000余例血清标本，通过临床医生沟通反映，发现在没有任何临床症状及心电图改变的情况下，出生不久的婴儿的cTnI数值普遍超出试剂说明书的参考范围。通过剔除有基础疾病及心脏损伤的数据后，进行统计学分析发现，仅1～2个月的婴儿参考区间水平普遍高于其他年龄段。这一结果表明，试剂说明书上的参考范围并不适用于1～2个月的婴儿群体。而继续沿用该参考区间必然将多数健康婴儿误诊为心肌损伤患儿。为了避免误诊，每个地区需要根据该地区的差异建立属于本地区的实验室参考区间。

本研究结果显示，cTnI在1～2个月婴儿血清中水平很高，随着年龄的增长，cTnI水平逐渐降低。这可能与婴幼儿前2个月的心肌发育不完善，心肌存在更新有关，其病理机制尚需进一步研究。本研究最终确认了佛山地区1～12个月婴儿的参考区间。婴儿(1～2个月)血清cTnI的参考区间为0.006～0.099 ng/mL。婴儿(3～12个月)的参考区间为0.006～0.044 ng/mL，结果发现3～12个月婴儿的参考区间与成人的参考区间高度一致，所以仅建立1～2个月及3～12个月的婴儿参考区间将足以涵盖整个人群。

佛山地区婴儿的cTnI参考区间的建立有利于解释cTnI的检测结果，有利于临床医生的对婴儿心肌损伤进行及时的诊断和治疗，也为各医院检验结果与临床表现不符时，提供很好的科学解释，具有重要的临床应用价值及指导意义。