miR-1269a、SOX6在食管癌组织中的表达及与临床病理特征的关系

吴迪，沈兆坤，金昊

（盘锦辽油宝石花医院心胸外科，辽宁 盘锦 124010）

食管癌是临床常见的一种消化道恶性肿瘤，5年生存力较低[1]。研究[2]发现，miRNA能进入线粒体控制其基因表达，与某些恶性肿瘤的发生发展关系密切。miR-1269a是位于染色体4q13.2的一种miRNA，能够对Smad7、HOXD10等基因或蛋白的表达及转化生长因子-β12的正反馈环路进行抑制，在恶性肿瘤的增殖及迁移中具有重要作用。SOX6是位于11号染色体短臂5.2～15.3区域的一种蛋白质分子，参与细胞的分化及凋亡等过程。研究[3]发现，miR-1269a能够对SOX6的表达进行抑制，参与恶性肿瘤的发生与发展过程。目前关于miR-1269a与SOX6在食管癌方面的的研究报道较少，基于此，本研究分析miR-1269a、SOX6在食管癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系，以期为食管癌的临床治疗及预后的改善提供参考，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2019年1月至2020年6月本院收治的100例食管癌患者为研究对象，其中男80例，女20例；年龄32～73岁，平均年龄（54.18±4.66）岁；鳞状细胞癌85例，腺癌15例；分化程度：高分化56例，中低分化44例；临床分期：Ⅰ期42例，Ⅱ期27例，Ⅲ期16例，Ⅳ期15例；浸润深度：T135例，T224例，T323例，T418例；伴有淋巴转移43例。收集所有患者术后的食管癌组织及癌旁正常组织标本，患者均对本研究知情并签署知情同意书。纳入标准：①均经过术后病理组织学检查确诊为食管癌，年龄≥18岁；②术前均未进行相关放化疗或生物治疗；③均自愿接受食管癌手术治疗；④临床资料完整，依从性较好。排除标准：①合并其他恶性肿瘤、消化系统疾病；②临床资料及随访资料不完整；③癌旁组织无炎症表现。

1.2 miR-1269a、SOX6的qRT-PCR检测 采用RNA提取trizol试剂盒提取食管癌组织及癌旁组织标本中的总RNA，使用RNase-free水溶解提取的总RNA，控制样本的吸光度（260/280）在1.8～2.0。使用逆转录试剂盒对cDNA进行合成，再使用RNase-free水进行稀释，严格按照试剂盒要求进行操作。miR-1269a的正向、反向引物序列分别为：5′-GCTCGTGGCTTAGGAGATTG-3′，5′-CTG-GCAAAGCATGAGGAACT-3′；SOX6的正向、反向引物序列分别为：5′-GCTG-AGGAGCTTAGGAGGGAC-3′，5′-GTTCG-GTCCACCATGAGATGGGG-3′；以GAPDH作为内参，其正向、反向引物序列分别为：5′-GTCAACGGATTTGGTCGTGATT-3′，5′-AGTCTTCTGGGTGGGCAGTGAT-3′。按照TOYOBO SYBR Green Realtime PCR Master Mix使用说明书进行qRT-PCR检测，采用2-△△Ct法计算miR-1269a、SOX6的表达水平。

1.3 统计学方法 采用SPSS 22.0统计软件进行数据分析，符合正态分布的计量资料以“x±s”表示，组间比较采用t检验，采用t检验法分析miR-1269a、SOX6的表达与临床病理参数的关系，采用Pearson相关系数分析miR-1269a与SOX6的相关性；以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 miR-1269a、SOX6在食管癌组织中的表达 miR-1269a在食管癌组织中的表达水平明显高于癌旁正常组织，差异具有统计学意义（P＜0.05）；SOX6在食管癌组织中的表达水平明显低于癌旁正常组织，差异具有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 miR-1269a、SOX6在食管癌组织及癌旁正常组织中的表达（x±s）Table 1 The expression of miR-1269a and SOX6 in esophageal cancer tissues and adjacent normal tissues(x±s)

2.2 miR-1269a、SOX6的表达与临床病理参数的关系 中低分化、Ⅲ与Ⅳ期、T3与T4浸润深度食管癌组织中miR-1269a的表达水平明显高于高分化、Ⅰ期与Ⅱ期、T1与T2浸润深度（P＜0.05），中低分化、Ⅲ与Ⅳ期、T1与T1浸润深度食管癌组织中SOX6的表达水平明显高于高分化、Ⅰ期与Ⅱ期、T3与T4浸润深度（P＜0.05）。见表2。miR-1269a与SOX6在食管癌组织中的表达水平呈明显负相关（r=-0.775，P=0.000）。

表2 miR-1269a、SOX6的表达与临床病理参数的关系Table 2 The relationship between the expression of miR-1269a and SOX6 and clinicopathological parameters

3 讨论

食管癌是发生在食管黏膜上皮的一种恶性肿瘤，其典型症状是进行性的吞咽困难，表现为难咽干食，严重者流食也难以下咽。食管癌可以分为早期和中晚期，手术是首选治疗方式。

近年来，研究[4]发现，miR-1269a在多种恶性肿瘤组织中呈高表达，对治疗效果产生严重的影响，如miR-1269a参与结肠癌及胆管癌细胞的分化及侵袭等过程[5]。miR-1269a能够对LRP6、MYCBP2等靶基因的表达进行调节，而发挥其生物学作用[6]。因此，可以推测miR-1269a在食管癌细胞癌细胞的分化、增殖及迁移过程中也存在一定作用。本研究结果显示，miR-1269a在食管癌组织中的表达水平明显高于癌旁正常组织，说明miR-1269a在食管癌的发展过程中发挥作用，分析其机制可能是miR-1269对靶基因的表达进行上调，促进癌细胞的分化及增殖，恶性肿瘤细胞增多。本研究结果显示，miR-1269a在食管癌组织中的表达水平与肿瘤的分化程度、临床分期及浸润深度存在一定关系。有研究[7-8]证实，对miR-1269a的表达进行抑制，能够抑制癌细胞的生长及分化，降低肿瘤组织的分化程度；miR-1269a还能上调转化生长因子-β12的表达，通过PI3K信号通路对Akt进行激活，促进恶性肿瘤细胞的浸润及侵袭。

SOX6是一种具有多种生物学功能的转化因子，能够抑制癌细胞上皮间质转化、增殖分化等[9]，在恶性肿瘤的发生发展中具有一定的作用。研究[10]显示，肾癌、骨肉瘤等恶性肿瘤组织中呈低表达，能够上调p53及p21等的表达，下调CyclinA级β-catenin等的表达，抑制恶性肿瘤的进展。本研究中，SOX6在食管癌组织中的表达水平明显低于癌旁正常组织，说明miR-1269a在食管癌的发展过程中发挥作用，分析原因为SOX6是miR-1269a表达的靶基因，miR-1269a在食管癌组织中的表达水平增高导致SOX6的表达水平降低。本研究结果显示，SOX6在食管癌组织中的表达水平与肿瘤的分化程度、临床分期及浸润深度存在一定关系，分析其机制可能是SOX6能够抑制Cyclin D1、SOCS3，从而抑制恶性肿瘤组织的分化程度，增加肿瘤的恶性程度；SOX6具有抑癌基因的生物学作用，对癌细胞的增殖分化进行抑制，增加癌细胞的浸润程度[11-12]。

综上所述，miR-1269a在食管癌组织中的表达增强，SOX6的表达减弱，均与肿瘤的组织分化程度、临床分期及浸润深度存在一定关系。