胃癌患者血清SFRP2、β-actin的水平变化及其诊断价值

兰宁

胃癌是临床常见的上消化道恶性肿瘤，2018年全球新发病例数约100万，死亡人数近80万，我国2015 年胃癌发病人数仅次于肺癌，约为67.9万，因胃癌死亡人数约50万[1]。胃癌早期发病隐匿，缺乏特异性临床症状和体征，因此寻找灵敏度高、特异性好的肿瘤标志物辅助临床早期诊断胃癌并评估疾病进展意义重大。分泌型卷曲相关蛋白2(SFRP2)是SFRP家族成员，与卷曲蛋白结构相似，通过与Wnt蛋白竞争性结合后可拮抗Wnt/β-catenin信号通路，进而抑制恶性肿瘤的发生发展[2]。β-肌动蛋白(β-actin)是在多种肌纤维细胞中广泛存在的具有收缩活性的微丝蛋白，参与维持细胞的结构、分裂、运动等生理过程[3]。本研究通过检测血清SFRP2、β-actin水平，旨在探讨其在胃癌发病及病情进展过程中的作用及其对胃癌的诊断价值。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2019年1月至2020年12 月本溪市红十字会医院收治的109 例确诊胃癌患者为胃癌组。胃癌组男66例，女43例；年龄34～75岁，平均年龄(63.82±10.17)岁。并于同期随机选取80例性别、年龄与胃癌组相近的胃良性疾病患者为对照组，对照除合并胃良性疾病以外，无其他系统重大疾病。其中男51例，女29例；年龄32～68岁，平均年龄(61.95±11.64)岁。两组患者性别、年龄比较，差异无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。本研究得到本溪市红十字会医院伦理委员会的批准，研究对象家属均在知情同意书上签字。

1.2 选取标准 纳入标准：经胃镜检查和病理活检证实为胃癌，符合《胃癌病理分型和诊断标准的建议》[4]中关于胃癌的诊断标准；首次发病的胃癌患者；患者年龄18～72岁；纳入研究前未接受过任何放化疗治疗者；患者临床病历资料完整者。排除标准：心脏功能不全及肝、肾功能障碍者；妊娠期及哺乳期的女性患者；急、慢性炎症反应性疾病及自身免疫性疾病患者；非原发性胃癌患者；伴有其他恶性肿瘤的患者；精神疾病患者。

1.3 方法 抽取胃癌组患者入院次日清晨空腹肘静脉血4 mL，对照组于入院当日空腹抽取，血液标本在含有EDTA的试管中室温下静置1 h，以3 000 r/min的转速离心，时间持续10 min，离心半径为12 cm，留取上清液置于－80 ℃环境下保存，留待检测。采用酶联免疫吸附法检测血清SFRP2、β-actin水平，检测仪器为Bio Tek ELx800全自动酶标仪(美国Bio Tek)，SFRP2试剂盒由上海江莱生物科技有限公司提供，β-actin试剂盒由美国Sigma公司提供。严格按照试剂盒上的相关说明进行操作。取样本490 nm处的光密度值通过标准曲线换算为SFRP2、β-actin的表达水平。

1.4 统计学方法 采用SAS 9.4软件录入数据及统计学分析，计量资料用均数±标准差(±s)表示，两组比较采用成组t检验，多组独立样本比较采用方差分析，计数资料用率表示，比较采用χ2检验，绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估血清SFRP2、β-actin对胃癌的诊断价值，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者血清SFRP2、β-actin水平比较 胃癌组血清SFRP2水平低于对照组，血清β-actin水平高于对照组，均P＜0.05，见表1。

表1 两组患者血清SFRP2、β-actin水平比较(±s)

表1 两组患者血清SFRP2、β-actin水平比较(±s)

注：SFRP2＝分泌型卷曲相关蛋白2，β-actin＝β-肌动蛋白。

?组别 例数 SFRP2(ng/L) β-actin(pg/mL)胃癌组 109 39.16±7.80 4.72±0.58对照组 80 86.53±8.49 2.39±0.64 t值 39.735 26.118 P值 ＜0.001 ＜0.001

2.2 血清SFRP2、β-actin与胃癌患者临床病理特征的关系 胃癌患者血清SFRP2、β-actin水平与TNM分期、分化程度、浸润深度及淋巴结转移有关，均P＜0.05；不同性别、年龄、肿瘤部位亚组血清SFRP2、β-actin水平比较，差异无统计学意义(P＞0.05)，见表2。

表2 血清SFRP2、β-actin与胃癌患者临床病理特征的关系(±s)

表2 血清SFRP2、β-actin与胃癌患者临床病理特征的关系(±s)

注：SFRP2＝分泌型卷曲相关蛋白2，β-actin＝β-肌动蛋白。

病理特征 例数 SFRP2(ng/L) t(F)值 P值 β-actin(pg/mL) t(F)值 P值性别 0.815 0.417 1.852 0.067男66 38.45±8.26 4.58±0.61女43 39.76±8.11 4.81±0.67年龄(岁) 0.241 0.815 1.496 0.141＜60 38 39.04±7.95 4.56±0.83≥60 71 39.42±8.09 4.80±0.79肿瘤部位 0.017 0.983 0.879 0.417胃窦 57 39.30±8.12 4.62±0.71胃体 31 38.97±8.01 4.69±0.75胃底 21 39.18±8.14 4.86±0.64 TNM分期 4.392 ＜0.001 13.167 ＜0.001Ⅰ～Ⅱ期 62 43.15±8.73 3.51±0.89Ⅲ～Ⅳ期 47 35.42±9.56 5.64±0.76分化程度 5.891 ＜0.001 11.395 ＜0.001低分化 51 34.49±8.60 5.39±0.67中高分化 58 43.86±7.99 3.83±0.75浸润深度 4.067 ＜0.001 12.182 ＜0.001黏膜层及以下 69 42.93±8.21 4.13±0.64浆膜层 40 36.27±8.34 5.82±0.79淋巴结转移 7.52 ＜0.001 16.824 ＜0.001有39 33.78±7.96 6.17±0.69无70 46.12±8.34 4.02±0.61

2.3 血清SFRP2、β-actin对胃癌的诊断价值 绘制ROC曲线结果显示，两指标联合检测诊断胃癌的AUC高于单一指标(Z＝4.028、3.792，P＜0.05)，见表3、图1。

图1 血清SFRP2、β-actin诊断胃癌的ROC曲线

表3 血清SFRP2、β-actin对胃癌的诊断价值

3 讨论

SFRP2是基因位于人第4号染色体上的抑癌因子，与Wnt/β-catenin信号传导通路的Frizzled受体具有相同结构，通过竞争性抑制Frizzled受体降解β-catenin水平，避免其在细胞内蓄积和减少转运到细胞核内，进而发挥拮抗Wnt/β-catenin信号通路的作用[5-6]。研究表明[7]，Wnt/β-catenin大量表达可导致细胞过度增殖和异常分化，SFRP2水平下调可过度激活其信号通路而诱发恶性肿瘤。β-actin广泛存在于不同种类肌型细胞中，在肌成纤维细胞的增殖和分化过程中动态改变，并维持细胞的结构、运动和分裂等[8]。研究显示[3]，β-actin 异常改变参与了胃癌的发病过程，并与TNM临床分期及淋巴结转移有关，对判断预后具有重要作用，β-actin是胃癌发病的独立危险因素，β-actin每增加1 pg/mL，胃癌发病风险增加4.425倍。可见，SFRP2、β-actin可能对胃癌的诊断及评估病情严重性方面具有作用，但是相关研究报道尚不多见。

本研究结果显示，与胃良性病变患者比较，胃癌患者血清SFRP2降低，血清β-actin水平升高，且与TNM分期、分化程度、浸润深度及淋巴结转移有关，均P＜0.05。提示两肿瘤标志物异常改变参与了胃癌的发病过程，其中SFRP2表达下调，未能与Wnt 配体的Frizzled 受体结合， 而过度激活Wnt/β-catenin信号通路，导致β-catenin未被降解，并且大量集聚到细胞核中作用于转录因子，启动转录和调控基因表达，最终促进胃癌的发生[9-10]。β-actin表达升高可能介导了恶性肿瘤细胞的运动及分裂过程[11]。通过绘制ROC曲线结果显示，两指标对胃癌均有较高的诊断价值，AUC分别为0.872、0.860，灵敏度和特异性均超过80%，并且联合检测的诊断价值更高，AUC达0.925，说明早期联合检测血清SFRP2与β-actin，对辅助临床诊断胃癌均有重要价值。

综上所述，胃癌血清SFRP2表达下调，β-actin表达上升，与胃癌发生发展密切相关。作为快捷、无创的检测方法，早期联合检测SFRP2、β-actin可辅助临床诊断胃癌，以指导临床医师制定针对性治疗方案，改善预后，延长患者生存时间。本研究为单中心回顾性研究，所得结论有待进一步的多中心前瞻性队列研究证实。